养精种玉汤对小鼠卵母细胞体外成熟及PDGFA和PDGFRα表达的影响

目的:探讨养精种玉汤对小鼠卵母细胞体外成熟及血小板源性生长因子A亚基(platelet-derived growth factor subunit A,PDGFA)和血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptorα,PDGFRα)表达的影响。方法:SPF级雌性KM小鼠灌胃养精种玉汤后取血制备血清,养精种玉汤血清用于未成熟卵母细胞-颗粒细胞复合体培养。体外培养后,观察并计算小鼠卵母细胞成熟率、受精率和卵裂率,采用Western blot和real-time PCR分别检测卵母细胞PDGFA和PDGFRα的蛋白及mRNA表达情况。结果:养精种玉汤能明显提高卵母细胞体外成熟率和受精率(P<0.05或P<0.01),下调PDGFA和PDGFRα的蛋白和mRNA表达(P<0.01)。结论:养精种玉汤可能通过下调PDGFA和PDGFRα的表达促进小鼠卵母细胞体外成熟。

含养精种玉汤血清对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的含养精种玉汤血清对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法采用HPLC监测养精种玉汤的最佳取血时间点,制备血清用于未成熟的卵母细胞-颗粒细胞复合体培养,体外培养后观察并计算小鼠卵母细胞成熟率、受精率和卵裂率。免疫荧光、RT-PCR分别检测卵母细胞VEGF-A、cdc2蛋白及mRNA表达。结果养精种玉汤灌胃后0.5 h为最佳取血点。养精种玉汤能提高卵母细胞体外成熟率、受精率(P<0.05,P<0.01);下调VEGF-A蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01);上调cdc2蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论养精种玉汤可通过下调VEGF-A,上调cdc2表达促进小鼠卵母细胞的体外成熟。

左归丸对初老大鼠循环EPCs及其促动员因素E_2、VEGF水平的影响

目的:观察补肾中药复方左归丸对初老雌性大鼠外周血循环内皮祖细胞EPCs及其促动员因素雌二醇E2、内皮细胞生长因子VEGF水平的影响。方法:采用自然衰老动物模型,予以左归丸灌胃治疗,观察卵巢组织形态学变化,计算卵巢、子宫的脏器指数,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中CD34+/CD133+/VEGFR2+三阳性EPCs的比例,ELISA法检测促EPCs动员因素E2、VEGF水平。结果:左归丸33 g/kg组可明显增加初老大鼠各级生长卵泡数、黄体数、血管数、血清E2、VEGF及EPCs水平。结论:左归丸可能通过上调E2、VEGF水平,动员EPCs,从而促进卵巢血管生成,改善初老大鼠卵巢功能。

左归丸对大鼠卵巢血管生成与胎盘生长因子、肝细胞生长因子及其受体关系的影响

目的 观察左归丸对初老大鼠卵巢中胎盘生长因子(PLGF)及酪氨酸激酶受体(Flt-1)和肝细胞生长因子(HGF)及间质上皮细胞转化因子(c-Met)受体表达的影响。方法 初老大鼠40只按随机数字表法分为模型组、结合雌激素组、左归丸11、33 g/kg剂量组,每组10只,另取10只4月龄大鼠作为正常对照组。正常对照组以蒸馏水20 g/kg灌胃;结合雌激素组灌胃65μg/kg结合雌激素混悬液;左归丸11、33 g/kg组分别灌胃左归丸浸膏11、33 g/kg,1次/天,连续20天;观察大鼠生殖器官形态学变化,计算卵巢、子宫、阴道脏器指数,采用免疫组化法及Western Blot法检测大鼠卵巢PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白表达水平,原位杂交技术检测PLGF、Flt-1、HGF、c-Met mRNA表达水平,ELISA法检测雌二醇(E;)、孕激素(P)、促卵泡生成激素(FSH)水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠生长卵泡数、黄体数、血管数更少,闭锁卵泡数多,卵巢、子宫、阴道指数及E;、P含量明显降低,FSH含量明显升高,大鼠卵巢PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,左归丸11、33 g/kg组及结合雌激素组的生长卵泡数、黄体数、血管数增多,闭锁卵泡数明显减少,卵巢指数、子宫指数、阴道指数及E;、P水平明显升高,FSH水平明显降低,PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著升高(P<0.05,P<0.01);与结合雌激素组比较,左归丸33 g/kg组E;、P升高(P<0.05),左归丸11、33 g/kg组中生长卵泡数、黄体数、血管数更少,闭锁卵泡数更多,卵巢、子宫、阴道指数,FSH水平,PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与左归丸11 g/kg组比较,左归丸33 g/kg组生长卵泡数、黄体数、血管数增多,锁卵泡数减少,卵巢、子宫、阴道指数及E;、P水平均有所上升,FSH水平下降,PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平升高(P<0.05,P<0.01)。结论 左归丸可能通过上调PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平,促进初老大鼠卵巢血管生成,进而改善大鼠卵巢功能,且高剂量优于低剂量。