施氏鲟Asnanos1基因序列分析及其在雌雄不同组织中表达

本研究首先从施氏鲟(Acipenser schrenckii)性腺转录组中获得nanos1(Asnanos1)基因全长c DNA,并对其序列的准确性和特征分别进行PCR验证和生物信息学分析。进一步利用荧光定量RT-PCR技术检测Asnanos1基因在雌、雄施氏鲟的性腺、心脏、鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中的表达量。利用荧光定量RT-PCR技术检测Asnanos1基因在雌、雄施氏鲟的性腺、心脏、鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中的表达量。结果显示:Asnanos1的c DNA全长为1 389 bp,其中,5′非编码区(UTR)为414 bp,3′UTR为279 bp,ORF为696 bp。该基因共编码231个氨基酸。Asnanos1基因在施氏鲟除心脏以外的各组织中均有表达,在雌、雄鱼的鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中表达量无显著差异,但在卵巢中的表达量显著高于其他各组织(P<0.05)。所得到的结果可为人工培育全雌施氏鲟苗种提供一些基础资料。

同时检测海洋贝类包纳米虫和派琴虫的双重TaqMan MGB探针实时荧光PCR方法

根据包纳米虫(Bonamia sp.)SSU rDNA和派琴虫(Perkinsus sp.)ITS rDNA的保守区序列,设计特异性引物和Taqman MGB探针,建立了同时检测上述两种贝类原虫的双重实时荧光PCR方法.该方法可检测到包纳米虫基因的446拷贝质粒,以及派琴虫基因的171拷贝质粒,具有较高的灵敏度.以10倍系列稀释的包纳米虫阳性标准品质粒和派琴虫阳性标准品质粒为模板,测得该方法的定量标准曲线相关系数分别为0.999和1.000,显示出很好的扩增效率.同时该方法与尼氏单孢子虫(Haplosporidium nelsoni)、沿岸单孢子虫(H.costale)等其他贝类原虫,以及副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)等海水养殖常见致病菌之间无交叉反应,表现出较高的特异性.福建莆田的湄州湾、平海湾、兴化湾等地采集的296份贝类临床样本的检测证明,该方法是一种有效的快速检测鉴定上述2种贝类原虫的方法,具有良好的灵敏度和特异性,可广泛应用于海洋贝类原虫感染情况调查,以及贝类疫病检疫监控等领域.

真蛸FAXDC2基因的克隆及其表达分析

FAXDC2(fatty acid hydroxylase domain-containing protein 2)是脂肪酸羟化酶家族中的成员,在脂肪酸的合成与代谢中发挥重要功能。真蛸(Octopus vulgaris)是中国南方近海的经济种类,为了研究饥饿对真蛸FAXDC2(OvFAXDC2)基因表达的影响,本研究从课题组真蛸转录组数据库中筛选获得OvFAXDC2基因序列。采用从头至趾方法进行验证,最终获得OvFAXDC2的cDNA全长序列共1384 bp。它包含100 bp的5′非编码区(UTR)、228 bp的3′UTR和1056 bp的开放阅读框(ORF),ORF共编码351个氨基酸,预测其分子量为3.98 kDa,理论等电点为8.93。系统进化树分析显示,真蛸和加州双斑蛸(O.bimaculoides)聚为一支,而与其他无脊椎动物分开。实时荧光定量PCR分析表明,OvFAXDC2在消化腺中表达量最高,在鳃和鳃心中次之。在幼体饥饿试验中,随着时间的推移,OvFAXDC2表达量先升后降,在第三天达到最高,表明OvFAXDC2表达量的变化趋势可作为幼体代谢是否正常的一个指标。

饲料脂肪含量对施氏鲟生长及其肝脏脂质组成的影响

本文报道了饲料中不同脂肪含量对施氏鲟生长及其肝脏脂质组成的影响结果 .试验饲料是以酪蛋白质、鱼粉、糊精和纤维素等为主要原料配制而成的等氮和等能量的半精制饲料 ,以等量混合的海水鱼油、豆油作为脂肪源 .试验周期为 2 5d .结果表明 :施氏鲟饲料中脂肪适宜含量为 5.6 %～ 1 1 .4% ,最适含量为 7.5%左右 ;肝脏脂质含量和中性脂质含量随着饲料脂肪添加量的增加而升高 ,但在饲料脂肪适宜含量范围内各组间却无显著差异 .

史氏鲟饲料脂肪的最适合量

本文报道了史氏鲟饲料脂肪最适含量的结果。试验饲料是以酪蛋白、鱼粉、糊精和纤维素等为主要原料配制而成的等氮 (蛋白质含量 4 1% )和等能量的 ( 11 2MJ/kg饲料 )的半精制饲料 ,以等量混合的海水鱼油、豆油作为添加的脂肪源 ,设 0、2 %、4 %、6%、8%和 10 %共 6种添加浓度。试验周期为 2 5d。结果显示 :增重率、饲料系数和蛋白质效率均以脂肪含量 7 6% - 9 6%的 4、5组饲料最佳 ,与脂肪含量分别为 1 6%和 3 6%的 1、2组饲料差异显著 ,但与脂肪含量分别为 5 6%和 11 6%的 3、6组饲料差异不显著。如果考虑到饲料成本 ,把史氏鲟饲料脂肪的最适合量设定在

中华蛸章鱼胺受体OARβ2R基因克隆及表达分析

为了解中华蛸(Octopus sinensis)受精卵的孵化及幼体发育机制,本研究对其章鱼胺受体基因(OsOARβ2R)进行克隆和生物信息学分析,同时研究了OsOARβ2R在不同组织/器官、刚孵出的幼体不同饥饿时间及不同的胚胎发育时期表达水平的变化。结果为:OsOARβ2R开放阅读框全长为1158 bp,编码385个氨基酸,有7个跨膜结构域,具有G蛋白偶联受体的共性,其中TM3、TM5、TM6、TM74个跨膜结构相对保守。经氨基酸同源对比及构建系统进化树分析,其与加州双斑蛸(O.bimaculoides)的OAR的一致性最高。荧光定量PCR结果显示,在成体10个组织/器官中,OsOARβ2R在后唾液腺中表达水平最高,其次是脑和小肠;在幼体饥饿实验中,随着饥饿时间的推移,OsOARβ2R的表达水平在饥饿2 d后显著降低,在饥饿3 d时表达水平显著升高,且表达水平达到最高,之后表达水平开始回落;OsOARβ2R在中华蛸整个胚胎发育周期均可检测到,且在多细胞期表达水平最高,后显著下降,黑珠期显著高于红珠期及初孵幼体。这些结果为研究中华蛸受精卵的孵化及幼体发育机制、提高人工育苗效率提供了基础资料。

史氏鲟饲料脂肪的最适量研究

配制等氮 (蛋白质含量 41% )和等能量的 (11 2MJ/kg饲料 )的半精制史氏鲟饲料 ,以等量混合的海水鱼油、豆油作为添加的脂肪源 ,设 0、2 %、4%、6 %、8%和 10 %共 6种添加浓度。试验周期为 2 5d。结果显示 :增重率、饲料系数和蛋白质效率以脂肪含量 7 6 %～ 9 6 %的饲料为最佳 ,考虑到饲料成本 ,建议把史氏鲟饲料脂肪的最适量设定在

基于浒苔暴发海水池塘的微生物生态特征研究

为研究浒苔对海水养殖环境微生物生态的影响,采用Illumia高通量测序技术测定冬季垦区进水区、浒苔暴发的池塘和排水区水体以及底泥中菌群结构,分析进水区、池塘养殖区和排水区的环境微生物结构演变过程。结果表明:(1)γ-变形细菌、α-变形细菌、放线菌、拟杆菌和δ-变形细菌为海水养殖区的优势细菌门类;(2)进水区水体和底泥微生物种类和多样性指数均高于浒苔池塘和排水区;浒苔暴发的池塘和排水区微生物群落结构较为相似;(3)浒苔池塘的水体微生物以异养细菌为主,底泥以脱硫杆菌等厌氧细菌为主,增加了底泥潜在产生硫化氢的危害;(4)进水区水体含有丰度较高的弧菌和鱼立克次氏体等条件致病性病原菌,而浒苔池塘中含量较低,说明浒苔对弧菌等有一定的抑制作用;但浒苔暴发的池塘和排水区中另一种潜在致病菌黄杆菌类的丰度较高,养殖品种务必防患此类病菌感染疾病的发生。本文从微生态学角度全面揭示浒苔对近岸海区、海水池塘和排水区微生态演变过程的影响,发现了浒苔具有抑制和增加不同致病菌的双重作用,这对水产养殖有一定指导,也为浒苔发生原因、预报、预防等研究提供一定理论参考。

对虾细菌性鳃部病害的防治药物筛选和用药方法研究

对虾鳃部疾炳的病原具有多样性,因此防治的关键是筛选出广谱,抗菌、便于使用的药物。通过药物实验证明;防治对虾养殖中经常出现的细菌性鳃病用红霉素的效果最好,而呋喃唑酮、氯霉素、青霉素、磺胺嘧啶虽对部分菌株的抑菌力很强,但具有局限性。土霉素、四环索更因大量滥用已产生耐药性。实验还表明:多数药物在:120℃以上高温下易失效,制造药物饵料应在85℃以下进行。不能使用受潮的漂白粉。

低盐胁迫对黄鳍棘鲷幼鱼存活率、鳃ATP酶和肝脏抗氧化酶的影响

为了解低盐胁迫对黄鳍棘鲷(Acanthopagrus latus)养殖所产生的影响,采用快速或缓慢2种梯度淡化方法,研究盐度由20淡化至10,5甚至淡水后对黄鳍棘鲷幼鱼的存活率、鳃ATP酶和肝脏抗氧化酶的影响.结果表明:1)除了淡水组的黄鳍棘鲷全部死亡之外,其他低盐组中的成活率为100%;2)在响应不同盐度的低盐胁迫时,不同酶的敏感性有所不同,其中超氧化物歧化酶(SOD)仅对淡水胁迫敏感,Na+/K+-ATP酶和Ca2+/Mg2+-ATP酶对盐度10的低盐胁迫不敏感,过氧化氢酶(CAT)对所有的实验组都敏感,盐度胁迫强度由强到弱依次为淡水、盐度5和盐度10;3)不同的淡化速度影响着Na+/K+-ATP酶和CAT活力恢复到正常水平所需的时间,其中快速淡化所需时间要比缓慢淡化长.本研究结果表明黄鳍棘鲷幼鱼可以较好适应低盐度养殖环境,但淡化速率会对黄鳍棘鲷幼鱼产生一定的应激影响,并且在淡水中应激非常明显.

斑马蛤生态循环水育苗技术

菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum),俗称花蛤,属帘蛤科,蛤仔属,是我国四大经济养殖贝类之一,单种产量在我国养殖贝类中最高。菲律宾蛤仔有多个壳色品系,例如斑马蛤、两道红等等,斑马蛤因其贝壳表面有类似斑马条纹而得以命名,在莆田天然群体中约占0.24%,且存在稳定的性状遗传基础。

池塘高效生态养蛏技术

缢蛏俗称蛏,隶属于瓣鳃纲、异齿亚纲、帘蛤目、竹蛏科,是我国四大养殖贝类之一。缢蛏肉味鲜美,营养丰富,有较为广阔的销售市场,是福建、浙江、广东的主要贝类养殖品种。在沿海农村,缢蛏养殖具有成本低、周期短、产量高、收益大、管理简便、生产稳定安全等特点,生产技术易于推广普及。

史氏鲟南移人工养殖技术

史氏鲟（Ａｃｉｐｅｎｓｅｒｓｃｈｒｅｎｃｋｉ）原产于黑龙江流域，为淡水定居性鱼类。其味道鲜美、营养价值高，尤其是鱼卵加工成黑鱼籽酱，素有“黑珍珠”或“黑色黄金”之称，因此具有很高的经济价值和饲养潜力。据此，我们于１９９８年引进史氏鲟苗种进行南移养殖，...

史氏鲟南移人工养殖技术

史氏鲟（ＡｃｉｐｅｎｓｅｒＳｃｈｒｅｎｃｋｉ）原产于黑龙江流域，为淡水定居性鱼类。其味道鲜美，营养价值高，尤其是鱼卵加工成黑籽酱，素有“黑珍珠”或“黑色黄金”之称，因此具有很高的经济价值和饲养潜力。据此，我们于１９９８年引进史氏鲟苗种进行南移养殖，旨...

龙胆石斑鱼养殖技术初步研究

引进3～5cm龙胆石斑鱼鱼苗820尾,在室内水泥池进行养殖试验,冬天加热保温至约19℃,采用中西药结合的方法防治鱼病,经过1年的饲养,成活率56%,平均体重483g 尾。