自体内皮祖细胞移植修复兔动脉内皮损伤

目的观察不同数量的内皮祖细胞移植对内膜球囊损伤血管修复的影响。方法密度梯度离心法分离兔外周血单个核细胞,以EGM-2培养基培养7天,获得兔外周血内皮祖细胞。分高细胞数量移植组(5×105个细胞)和低细胞数量移植组(2×105个细胞),将相应数量的内皮祖细胞重悬于100μL生理盐水中移植至兔内膜球囊损伤血管局部,对照组仅注入100μL生理盐水。同时用CM-DiI标记内皮祖细胞移植,进行细胞示踪。4周后,处死动物,荧光显微镜下观察CM-DiI标记细胞的分布,并测量各组内膜损伤血管再生内皮覆盖率和新生内膜增生程度。结果荧光显微镜下发现荧光标记的内皮祖细胞分布在血管的中膜层、新生内膜层和内膜表面。内皮祖细胞移植可显著促进内膜损伤血管的再内皮化,以高细胞数量移植组为著,同时内皮祖细胞移植也大大减少了新生内膜的形成。结论内皮祖细胞移植可修复内膜球囊损伤血管,高细胞数量移植有更显著的效果。

兔外周血两种内皮祖细胞的分离培养和鉴定

目的研究新西兰大白兔外周血两种内皮祖细胞(EPC和EOC)的分离培养和鉴定。方法由兔耳中央动脉采集外周血,以密度梯度离心法分离单个核细胞(MNC),置于EGM-2培养基中培养。用DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-acLDL)摄取试验和FITC标记的荆豆凝集素(FITC-UEA-1)结合试验,检测flk-1表达的免疫荧光法和检测CD34、Ⅷ因子表达的免疫组化染色法,以及体外血管形成试验对EPC/EOC进行鉴定。结果从新西兰大白兔外周血MNC中可成功地培养出EPC和EOC。培养第7天的EPC和第16天的EOC均能吞噬ac-LDL并与凝集素UEA-1相结合,同时均可表达CD34、flk-1和Ⅷ因子相关抗原。EOC在matrigel凝胶上可形成血管腔样的结构。结论用密度梯度离心法从兔外周血中分离的MNC在一定的培养条件下,能分化成为EPC和EOC,为后续的实验研究提供了细胞来源。

冷冻球囊消融和射频导管消融在心房颤动患者中应用的对比分析

目的比较心房颤动患者冷冻球囊消融(下称冷冻消融)与射频导管消融(下称射频消融)的操作过程以及两者对心肌组织的损伤程度和炎症反应的差异。方法选择经药物治疗无效的阵发性心房颤动患者80例,根据选择的消融方式分为冷冻消融组和射频消融组,每组40例。比较两组消融时间、手术时间和透视时间,检测术前及术后即刻、6、12、24h的肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(Tn I),术前和术后24h的C反应蛋白(CRP)以及体温变化。结果冷冻消融组患者消融时间[(37.2±7.0)min]和手术时间[(111.6±19.2)min]均短于射频消融组[(42.5±13.2)min、(135.5±35.0)min],透视时间[(22.4±8.1)min]长于射频消融组[(13.1±3.2)min],差异均有统计学意义(P<0.05或0.01)。冷冻消融组CK-MB、Tn I及CRP均高于射频消融组。两组患者术后发热患者比例和发热程度差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论心房颤动冷冻消融的消融时间短而心肌损伤明显。

兔外周血内皮祖细胞的分离、培养和鉴定

目的:研究新西兰大白兔外周血内皮祖细胞(EOCs)的分离、培养和鉴定方法,为后续实验研究做好准备。方法:通过耳中央动脉采集兔外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞(MNCs),在EGM-2培养基的诱导分化下,获得EOCs。通过标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-ac-LDL)摄取试验、荆豆凝集素(FITC-UEA-1)结合实验、CD34与VIII因子免疫组化染色、flk-1免疫荧光染色、体外血管形成实验以及细胞NO分泌功能测定,从细胞表面标记和细胞功能两方面对细胞进行鉴定。结果:新西兰大白兔外周血MNCs在体外培养可成功获得EOCs,EOCs能稳定摄取ac-LDL并与UEA-1结合,一致表达CD34、flk-1和VIII因子相关抗原。EOCs能分泌NO,并能在matrigel凝胶上形成稳定的血管腔样结构。结论:密度梯度离心法分离的兔外周血MNCs在一定的培养条件下能诱导分化成为EOCs。

左心耳封堵联合希氏束起搏房室结消融治疗心房颤动1例

1对象和方法 1．1对象 患者，女性，75岁，既往有高血压病病史4年，有糖尿病病史4年，3年前有“脑梗死”病史。发现“房颤”3年，3个月前因胸闷心悸在我院行冠脉造影示前降支近段局限狭窄85％，在前降支植入1枚支架，左室造影提示左室致密化不全。

国产比伐卢定用于冠状动脉介入治疗术中抗凝的疗效和安全性评价

目的:评估国产比伐卢定应用于择期冠状动脉介入治疗术(PCI)中抗凝治疗的疗效及安全性。方法:采用随机、单盲、多中心临床试验设计,随机将接受择期PCI的患者分为比伐卢定组和肝素组,在PCI术中分别采用比伐卢定或普通肝素抗凝治疗,主要疗效评价指标为术中测定激活的全血凝固时间(ACT)、手术成功率(靶病变术后狭窄程度小于20%并24 h内无冠状动脉事件发生)及30天无心血管事件生存率,主要安全性评价指标为轻度及重度出血。结果:共有218例患者入选,实际入组完成试验207例,比伐卢定组(n=105)和肝素组(n=102)。用药后5 min除肝素组2例需要追加剂量外,其余两组患者PCI术中均能维持ACT>225 s,两组差异无统计学意义(P>0.05);比伐卢定组和肝素组PCI手术成功率和30天无心脏事件生存率均分别为100%和98.04%(P>0.05),差异无统计学意义。比伐卢定组和肝素组24 h内轻度出血的发生率分别为0.95%和6.86%(P<0.05)、30天内轻度出血发生率分别为1.9%和8.8%(P<0.05),肝素组有1例发生严重消化道出血。结论:国产比伐卢定能安全有效地应用于择期PCI术中抗凝治疗,疗效不劣于肝素且出血副作用低于肝素。

另一类型内皮祖细胞移植在损伤血管内膜修复中的作用

目的:观察体外培养的兔外周血另一种内皮祖细胞(EOCs)自体移植修复内膜球囊损伤血管的效果。方法:实验动物随机分为EOCs移植组(n=8)和对照组(n=8)。密度梯度离心法分离兔外周血单核细胞(MNCs),在EGM-2培养基的诱导分化下获得EOCs。将第二次传代的EOCs重悬于100μL生理盐水中移植至兔颈总动脉内膜球囊损伤血管局部(移植组),仅注入100μL生理盐水者作为对照组。同时用CM-DiI标记EOCs移植,进行细胞示踪。术后4周,荧光显微镜下观察标记细胞的分布,并测量内膜损伤血管段再生内皮覆盖率(RA/TA)和新生内膜增生程度(IA/MA)。结果:术后4周,荧光显微镜下,在血管中膜、新生内膜层和内膜表面均可见荧光标记的细胞。伊文思蓝染色显示,EOCs移植组的再生内皮覆盖率(89.1%±6.3%)显著高于对照组(62.1%±7.5%,P<0.01);与对照组比较,EOCs移植组的新生内膜形成明显减少,两者的IA/MA比值分别为0.88±0.14和0.44±0.06(P<0.01)。结论:EOCs移植可显著加速内膜损伤血管的再内皮化,并减少新生内膜的形成。

冠心病患者循环内皮祖细胞与血浆非对称二甲基精氨酸的相关分析

目的探讨冠心病患者循环内皮祖细胞(EPCs)水平与血浆非对称二甲基精氨酸(ADMA)浓度的相关性及临床意义。方法将确诊或疑似冠心病的87例患者分为2组,经冠状动脉造影证实冠心病的患者55例为冠心病组,造影证实非冠心病患者32例为非冠心病组,采用流式细胞技术分析外周血循环EPCs水平,高效液相色谱分析法检测血浆ADMA浓度。结果冠心病组患者EPCs(0.033±0.014)%较非冠心病组(0.054±0.013)%显著降低,冠心病组患者血浆ADMA(0.374±0.059)mg/L较非冠心病组(0.317±0.023)mg/L显著升高(P<0.01);冠心病组循环EPCs水平与血浆ADMA浓度呈负相关(r=-0.691,P<0.01)。结论冠心病患者高浓度的血浆ADMA可能是外周血循环EPCs水平降低的原因之一。

内皮生长晕细胞冻存和复苏的可行性

目的研究冻存对内皮生长晕细胞增殖能力和成血管能力的影响,探讨内皮生长晕细胞冻存和复苏的可行性。方法分离脐血中单个核细胞,采用贴壁培养法培养扩增内皮生长晕细胞,免疫组织化学染色和荧光染色法鉴定其内皮细胞特性。扩增后的细胞采用浓度为650μmol/L(体积比为50mL/L)和1040μmol/L(体积比为80mL/L)二甲基亚砜的培养基冻存至液氮中,24h后复苏并观察冻存细胞的复苏率、复苏后细胞的增殖能力和成血管能力的改变。结果采用贴壁法培养的细胞具有多种内皮细胞特性。细胞采用含不同浓度二甲基亚砜(50mL/L和80mL/L)的培养基冻存后,其复苏率差异无统计学意义,细胞的增殖能力在复苏后36h内50mL/L、80mL/L二甲基亚砜组均较未冻存组减弱(P<0.05),72h后三组间比较差异无统计学意义。而复苏后6h内成血管速率较未冻存组减弱(P<0.05),但30h后三组间比较差异无统计学意义。结论内皮生长晕细胞可以进行冻存和复苏。

应用320排CT评估重度冠状动脉狭窄患者静息态心肌灌注

目的评估重度冠状动脉狭窄患者静息态心肌CT灌注改变。方法以冠状动脉造影(CAG)为参照,选择重度冠状动脉狭窄患者且CAG术前2周内接受320排C丁冠状动脉造影(CTCA)检查,共74例患者作为观察组。应用CTCA的原始数据重建心电图75%R-R间期时相进行灌注分析,自动获得重度冠状动脉狭窄患者16节段心肌平均衰减密度值(AD),并与同期对照组1 18例患者的相应心肌节段进行比较。结果有重度狭窄冠状动脉102支,其中左冠状动脉前降支(LAD)48支,左旋支(LCX)23支,右冠状动脉(RCA)31支。观察组各心肌节段AD值均低于相应对照组,除中间段下间隔壁(t=-1.478,P>0.05)外,两组间AD值差异均有统计学意义(t_(S1-S8,S10-S16)=-2.767、-2.309、-2.347、-3.567、-4.704、-2.947、-3.301、-3.643、-3.170、-3.188、-3.078、-3.589、-2.926、-2 103、-3 426,均P<0.05)。观察组中,LAD供血区各个节段心肌AD值存在差异(F_(LAD)=8.258,P<0.01),而且基底、中间及心尖部间隔壁AD值均高于前壁(均P<0.05)。而LCX、RCA供血区心肌节段间AD值差异无统计学意义(F_(LCX)=1.229,F_(RCA)=2.070,P>0.05)。结论半定量的静息态心肌CT灌注可以反应心肌灌注,重度冠状动脉狭窄患者相应供血区心肌灌注减低,而且左心室前壁灌注低于间隔壁。

稳定型心绞痛患者的血维生素D浓度和循环内皮祖细胞的关系

目的探讨在稳定型心绞痛患者中血清维生素D浓度同循环EPCs水平的相关性及临床意义。方法入选320例稳定型心绞痛患者,用电化学发光法检测检测血清25(OH)D3浓度、流式细胞术分析循环内皮祖细胞(EPCs)水平,同时检测血糖、血脂、甲状旁腺激素(PTH)等生化指标。根据血清25(OH)D3浓度的四分位数分为4组:Q1组(<20.25nmol/L,78例),Q2组(20.25～27.57nmol/L,82例),Q3组(27.57～34.89nmol/L,83例),Q4组(>34.89nmol/L,77例),分析25(OH)D3浓度与循环EPCs的相关性。结果在稳定型心绞痛患者中,血清25(OH)D3低浓度组的循环EPCs水平(0.024±0.015)%比高浓度组的循环EPCs水平(0.036±0.018)%下降有统计学意义(P<0.05),Pearson相关分析显示血清25(OH)D3浓度与循环EPCs呈正相关(r=0.523,P<0.05),进一步多元回归分析发现循环EPCs与血清25(OH)D3具有独立相关性(β=10.87,P<0.05)。结论稳定型心绞痛患者的血清25(OH)D3浓度降低是循环EPCs水平下降的独立危险因素,推测血清25(OH)D3浓度的下降也可以预测心血管危险事件发生的风险。

冠状动脉CT血管造影联合静息心肌透壁灌注指数诊断冠心病的临床价值研究

目的探讨冠状动脉CT血管造影(CCTA)联合静息心肌透壁灌注指数(TPR)诊断冠心病(CHD)的临床价值。方法162例临床疑诊CHD的患者,CCTA后2周内完成冠状动脉血管造影(CAG)检查。利用CCTA的原始数据进行TPR分析,以CAG结果为参照,评价CCTA联合TPR对CHD的诊断价值。结果 CCTA、TPR单独或两者联合均可用于诊断CHD(x^2=94.42、14.25、48.30,均P<0.01),ROC曲线下面积分别为0.899、0.589、0.701。CCTA单独诊断CHD的灵敏度为85.6%(95/111),特异度为94.1%(48/51),阳性预测值(PPV)为96.9%(95/98),阴性预测值(NPV)为75.0%(48/64)。TPR单独诊断CHD的灵敏度为82.9%(92/111),特异度为45.1%(23/51),PPV为76.7%(92/120),NPV为54.8%(23/42)。联合CCTA及TPR诊断CHD的灵敏度为99.1%(110/111),特异度为41.2%(21/51),PPV为78.6%(110/140),NPV为95.5%(21/22)。结论联合CCTA及TPR可用于诊断CHD并可明显提高CHD诊断灵敏度。

静息心肌透壁灌注指数(TPR)对冠心病附加诊断价值

目的探讨静息状态下心肌透壁灌注指数（TPR）能否提高冠状动脉CT血管造影（CCTA）对冠心病诊断的准确性。方法回顾性分析2015年1～10月临床疑诊为冠心病并于CCTA后2周内完成冠脉血管造影（CAG）检查病例，共270例入选。应用CCTA的原始数据进行TPR分析，以CAG结果为参照，评价CCTA联合TPR对冠心病的诊断价值。结果单独CCTA以及联合TPR均可诊断冠心病（X2=146．2、141．9，P均〈0．01），受试者特征曲线（HOG）下面积分别为0．866、0．885。单独CCTA诊断冠心病的敏感性为93．5％（188／201），特异性为79．7％（55／69），阳性预测值为93．1％（188／202），阴性预测值为80．9％（55／68）。CCTA联合TPR诊断冠心病的敏感性为88．6％（178／201），特异性为88．4％（61／69），阳性预测值为95．7％（178／186），阴性预测值为72．6％（61／84）。结论TPR有助于提高CCTA诊断冠心病的准确性及特异性。

人血浆非对称性二甲基精氨酸浓度的RP-HPLC测定法

目的:建立一种测定人血浆中非对称性二甲基精氨酸(Asymmetric Dimethylarginine,ADMA)浓度的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法:采用Waterssymmetry C18柱(5μm,3.90mm×150mm),以0.05mmol/L乙酸钠(pH6.8)为流动相A,甲醇为流动相B,线性梯度洗脱:14%15min,31%25min,45%5min(V/V/V),流速1.0ml/min,荧光检测,激发波长330nm,发射波长450nm,邻苯二甲醛(OPA)进行柱前衍生,室温下检测。结果:ADMA在0.05～5μg/ml范围内有良好线性关系,最小检出量为0.05μg/ml,平均相对回收率为(93.76±2.57)%,日内、日间平均变异系数分别为(3.25±1.59)%、(4.60±1.37)%。结论:本方法准确、简便、快速,适用于科学研究和临床检测。

冠心病患者外周血内皮祖细胞与LDL-C的相关性分析及意义

目的探讨冠心病患者外周血内皮祖细胞（EPCs）与低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）的关系及临床意义。方法55例经冠状动脉造影证实的冠心病患者（冠心病组）和32例经冠状动脉造影证实的非冠心病患者（对照组），采用流式细胞术分析外周血EPCs，同时检测LDL-C。结果冠心病组外周血EPCs较对照组显著降低，LDL-C较对照组显著升高，差异均有统计学意义（P〈0．01）；冠心病组外周血EPCs与LDL-C呈负相关关系（r=-0.656，P〈0.01）。结论冠心病患者外周血EPCs与LDL-C呈负相关关系，升高的LDL-C是外周血EPCs降低的原因之一，提示提高外周血EPCs可降低LDL-C，减少心血管危险事件的发生。

急性ST段抬高型心肌梗死PCI术后微冠状动脉再灌注的研究

目的 探讨经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后ST 段抬高型心肌梗死（STEMI）患者T 波幅度值的改变对微冠状动脉再灌注的判断价值.方法 收集PCI 术前后106 例ST段抬高型心肌梗死患者心电图,分析T 波幅度动态变化.结果 T波幅度改变和术后ST段恢复延迟有关,T波幅度值的动态变化能更早的反应微冠状动脉再灌注情况.结论 在PCI 术前后,倒置T波以及T波幅度的动态变化与早期微冠状动脉再灌注有关,是预测微冠状动脉再灌注的早期独立因子.

基于体重的肝素负荷剂量下体重指数对活化凝血时间的影响

目的 探讨在经皮冠状动脉介入（PCI）治疗中，基于体重的肝素负荷剂量下体重指数（BMI）对全血活化凝血时间（ACT）的影响。方法前瞻性入选男性冠心病患者78例，年龄45～77（63．86±6．89）岁，以BMI为依据将患者分为4组：A组20例（15．57≤BMI〈23．03）。B组20例（23．03≤BMI〈25．35），C组18例（25．35≤BMI〈27．68），D组20例（BMI≥27．68）。所有患者给予100U／kg负荷全量肝素，并于术前、肝素负荷剂量后5min、10min、30min、60min抽血，采用Hemotec法检测ACT值，以术前ACT（ACT0）为基线，其余ACT值与其差值分别标记为△ACTs，MATLAB软件计算△ACT一时间曲线下面积。结果负荷肝素后ACT达峰时间各不相同：33．33％位于ACT5时间点，51．33％位于ACT10时间点，15．34％位于ACT30时间点，各组间差异有统计学意义（P〈0．05）。△ACT-时间曲线下面积随着BMI增大而增大，各组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论相对于低BMI患者，基于实际体重给予负荷量肝素对于大BMI患者是过量的。

奥普力农治疗充血性心力衰竭的临床观察

目的 评价奥普力农对心力衰竭治疗的有效性与安全性.方法 将30例心力衰竭患者随机分为奥普力农组（n=14）与米力农组（n=16）,观察两组治疗前后临床心功能、血流动力学、脉冲多普勒超声心动描记术检查和治疗安全性等指标变化.结果 奥普力农和米力农均改善心功能,差异无统计学意义（P＜0.05）.用药后5min奥普力农组除右心房压、平均肺动脉楔压外,其他指标和米力农组各指标均较用药前改善,差异均有统计学意义;1h后奥普力农组上述指标及米力农组肺动脉楔压较用药后5min进一步改善,差异有统计学意义;之后药效稳定持续至用药结束后1h.奥普力农组用药后脉冲多普勒超声心动描记术检查指标均较用药前明显改善,米力农组则无明显改善;奥普力农对血压心率的影响更小.结论 奥普力农短期应用可有效缓解心力衰竭的临床症状,改善血流动力学指标,作用与米力农相当;并可对心脏结构和功能产生更有利的影响,且对血压、心率的影响更小而较安全.

方钢管混凝土剪力墙和叠合圆钢管混凝土剪力墙对比分析

方钢管混凝土剪力墙和叠合圆钢管混凝土剪力墙是两种新的组合剪力墙体。二者在达到相应最大轴压比限值时的造价非常接近,经济性差别不大。采用有限元进行数值模拟,对比二者的受力性能,方钢管混凝土剪力墙的受力性能优于叠合圆钢管混凝土剪力墙。在施工上,方钢管混凝土剪力墙较叠合圆钢管混凝土剪力墙更方便快捷。