线上线下混合教学模式在本科生毒理学教学中的践行与思考

目的探讨线上线下混合教学模式在本科生毒理学课程的教学改革效果。方法在中国医科大学公共卫生学院采用自制调查问卷与统一难度测试题普查2016级与2017级预防医学本科生,用满意度调查、成绩分析、学生能力培养等综合评价线上线下混合教学模式的教学效果,并进行统计分析。结果线上线下混合教学模式总体满意度高,对知识点的理解和掌握有帮助,总体成绩与线下教学模式相当(P>0.05),对学生综合素质能力有增强。结论线上线下混合教学模式是毒理学教学中有益的教育改革方向,但具体实施和教学效果的进一步优化有待深入研究和探讨。

应用转染细胞研究ERCC2/XPD基因多态与短波紫外线所致DNA损伤修复的关联

目的探讨ERCC2/XPD基因多态与短波紫外线(UVC)所致细胞DNA损伤与修复的关联。方法构建稳定表达ERCC2/XPD rs13181 AA(Lys751)和ERCC2/XPD rs13181 CC(Gln751)2种基因型的质粒,转染中国仓鼠卵巢细胞缺陷型UV5,获得稳定表达ERCC2转染细胞系。应用MTT法比较2种不同基因型转染细胞经不同照射强度UVC处理后细胞抑制率的差别;应用改良彗星试验检测各转染细胞经UVC处理后1、3、6、24 h DNA损伤修复能力的差异。结果与UV5ERCC2(AA)相比,突变型细胞UV5^(ERCC2(CC))对UVC所致DNA损伤更加敏感,细胞存活率降低(P<0.05)。改良彗星试验结果显示,UV5^(ERCC2(CC))细胞DNA损伤程度较UV5ERCC2(AA)严重,且修复UVC所致DNA损伤的能力降低,在20 J/m2UVC处理3、6 h时点的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ERCC2/XPD rs13181多态C等位基因与UVC所致DNA损伤修复能力下降相关,提示ERCC2/XPD rs13181基因多态性可能在UVC所致DNA损伤修复中具有一定意义。

ERCC1及其重叠基因3’端非编码区多态性与结直肠癌发病风险关联的病例对照研究

目的探讨切除修复交叉互补基因1(ERCC1)及其重叠基因CD3EAP、PPP1R13L的3’端非编码区(3’UTR)单核苷酸多态性(SNP)与结直肠癌(CRC)发病风险的关联性。方法根据最小等位基因频率(MAF)及样本量确定候选SNP位点。收集200例CRC患者(病例组)和200名健康对照受试者(对照组),利用非条件logistic回归模型分析靶基因候选SNP位点与CRC的关联。结果ERCC1基因SNP位点rs3212986与CRC发生风险相关,与rs3212986 CC基因型相比,AA基因型携带者患CRC的风险增高(P<0.05);将病例组和对照组按性别和年龄分层后,男性或年龄≥60岁人群中AA基因型会增加CRC的患病风险(P<0.05)。单体型分析结果表明,与其他单体型相比,ERCC1单体型AAG发生CRC的风险较高(P<0.05);携带rs3212986、rs2336219、rs735482、rs1007616区域单体型结构CCAC、AAGC、CAGT患CRC风险程度高于野生型(P<0.05)。结论ERCC1 rs3212986位点AA基因型在CRC病例中的出现频率高于对照,其A等位基因会增加CRC的患病风险。ERCC1单体型AAG与CRC的易感性相关。19q13区域单体型结构CCAC、AAGC、CAGT与CRC易感性相关,可能增加CRC的患病风险。

空气负离子对原发性高血压大鼠血压、氧化应激和炎症水平的影响及机制

目的探究空气负离子(negative air ions,NAIs)对原发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rat,SHR)血压、氧化应激及炎症状态的影响及可能机制。方法选择60只SHR(雌雄各半),根据干预时间随机分为1个月组和3个月组,每组30只;各组大鼠根据每日干预时间再进一步随机分为SHR对照组、2 h NAIs-SHR组和6 h NAIs-SHR组,每组10只。另将20只SHR同系正常血压成年大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)作为正常血压对照组,根据干预时间随机分为1个月WKY组和3个月WKY组,每组10只。2 h NAIs-SHR组和6 h NAIs-SHR组每天分别置于NAIs浓度为4.5×10^(4)~5×10^(4)个/cm^(3)的环境中2 h和6 h,WKY组和SHR对照组每天置于正常空气环境。各组大鼠每3天测一次血压,每周测一次体重,于饲养第1个月和第3个月后处死,称量脏器湿重;采用酶联免疫吸附法检测血清8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxylated deoxyguanosine,8-OHdG)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、一氧化氮(nitric oxide,NO)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平;活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒测定血清ROS水平;比色法检测血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和氧化型谷胱甘肽(glutathione disulfide,GSSG)水平。HE染色观察各组大鼠胸主动脉组织病理形态,Western blot检测各组大鼠胸主动脉p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、c-fos、c-jun蛋白及其磷酸化蛋白的表达水平。结果同周龄雄鼠WKY组体重较SHR对照组高,其他各组间体重差异无统计学意义。SHR组心脏脏器系数(4.66±0.48)较WKY组(3.73±0.15)高(P<0.05),其余大脑、肾脏、肝脏和脾脏脏器系数各组间差异无统计学意义。同周龄WKY组血压均较SHR对照组低,第2~5、8~11周SHR对照组血压均较2 h NAIs-SHR组和6 h NAIs-SHR组高(P<0.05)。HE染色发现2 h NAIs-SHR组和6 h NAIs-SHR组大鼠胸主动脉均较SHR对照组内膜结构紊乱、中膜增厚、外膜破裂等病理改变有不同程度的改善。氧化还原水平方面,与SHR对照组相比,6 h NAIs-SHR组ROS[0.66%±0.17%、0.49%±0.32%]、8-OHdG[(48.29±8.00)ng/mL、(33.13±14.67)ng/mL]水平均较低(P<0.05),1个月6 h NAIs-SHR组GSH/GSSG(10.08±4.93)较高;与2 h NAIs-SHR组相比,6 h NAIs-SHR组ROS水平[0.99%±0.19%]较低(P<0.05)。炎性因子水平方面,与SHR对照组相比,6 h NAIs-SHR组IL-8水平[(160.44±56.54)ng/L、(145.77±38.39)ng/L]均较低(P<0.05),1个月WKY组ET-1[(249.55±16.98)ng/L]较高,各组间NO水平差异无统计学意义。1个月SHR对照组大鼠胸主动脉p-p38蛋白相对表达量较WKY组低(P<0.05),3个月SHR对照组大鼠胸主动脉p-p38和p-c-fos蛋白相对表达量均较2 h NAIs-SHR组和6 h NAIs-SHR组高(P<0.05)。结论4.5×10^(4)~5×10^(4)个/cm^(3)浓度的NAIs干预可能通过ROS/MAPK/AP1信号通路调节SHR大鼠部分氧化及炎症状态,进而降低其血压水平。

核苷酸切除修复通路基因多态与慢性苯中毒关联性

目的 探讨核苷酸切除修复（NER）通路基因多态性、苯暴露水平和生活方式与慢性苯中毒（CBP）发病风险的关联,为筛选慢性苯中毒的易感性生物标志及其一级预防提供理论依据。方法 知情同意后以1：2配比原则选取100名慢性苯中毒患者和200名健康对照,问卷调查后,采集2 m L静脉血样,提取DNA。Taqman real time PCR检测ERCC1 rs11615、rs3212986、ERCC2 rs13181、rs1799793、rs238406基因型;引物延伸SNapshot法检测ERCC3 rs150441,ERCC4 rs4781560,XPC rs2228001、rs2279017位点SNP基因型。采用SPSS 19.0统计软件进行分析。结果 ERCC1 rs11615 TT基因型可使慢性苯中毒发生风险增高（ORadj=3.236,95%CI=1.353~7.740）,未发现ERCC1 rs3212986（χ2=0.125,P=0.939）,ERCC2 rs13181（χ2=3.315,P=0.191）、rs1799793（χ2=1.796,P=0.407）、rs238406（χ2=1.182,P=0.554）,ERCC3 rs150441（χ2=4.657,P=0.097）,ERCC4 rs4781560（χ2=1.116,P=0.572）,XPC rs2228001（χ2=1.180,P=0.554）、rs2279017（χ2=2.570,P=0.227）等基因位点与慢性苯中毒发生有关联。结论 在苯暴露情况下,携带ERCC1 rs11615 TT基因型的个体发生慢性苯中毒的风险增高,ERCC1rs11615多态可能成为慢性苯中毒易感人群筛选的生物学标志之一。

慢性苯中毒发病风险与XRCC1基因多态性关联的病例对照研究

采集病例组慢性苯中毒（CBP）患者102名、对照组204名人员静脉血,应用PCR探针法和引物延伸SNa Pshot法检测XRCC1 rs25487、rs25489、rs1799782 SNP位点基因型,分析基因多态位点和CBP易感性的关联,以比值比（odds ratio,OR）及其95%可信限（95%confidence interval,95%CI）表示关联强度。结果显示,XRCC1rs25487CT基因型（ORadj=5.146,95%CI=2.441-10.852,χ^2=21.098,P〈0.05）或TT基因型（ORadj=13.985,95%CI=6.440-30.371,χ^2=56.316,P〈0.05）、rs1799782 AA基因型（ORadj=2.012,95%CI=0.926-4.372,χ^2=5.100,P〈0.05）可使CBP发生风险增高,未发现XRCC1 rs25489位点与CBP发生的关联。提示XRCC1 rs25487 CT或TT基因型、rs1799782 AA基因型多态可能作为CPB发病危险性增加的生物学标志之一。

云南省边境县涉外婚姻家庭HIV感染现状

目的了解云南省边境县涉外婚姻人群规模,掌握该人群艾滋病病毒(HIV)感染状况。方法2014-2018年,以村为单位,采用统一下发的数据库收集辖区内所有涉外婚姻家庭的规模数据及人口学信息,逐级汇总上报,并对其开展HIV动员检测。结果全省涉外婚姻家庭规模有49903户,德宏州、保山市、文山州和普洱市占75.3%。外籍家庭成员中缅甸占75.7%,女性占96.5%,20~39岁占73.2%。对84113人开展了HIV检测,HIV抗体阳性794人,阳性率0.9%。不同县区该人群的HIV阳性率在0.1%~3.4%之间,不同年龄、性别和民族的中国籍家庭成员HIV阳性率差异有统计学意义(χ^2=144.2,P<0.001;χ^2=25.14,P<0.001;χ^2=231.74,P<0.001)。外籍家庭成员中,不同国籍、年龄、性别和结婚时长其HIV阳性率差异有统计学意义(χ^2=34.61,P<0.001;χ^2=120.48,P<0.001;χ^2=7.01,P=0.01;χ^2=18.21,P<0.001)。结论云南省边境县涉外婚姻家庭规模大,HIV感染率高,不同地区及人口学特征HIV感染率差异较大。建议将该人群纳入边境地区艾滋病防治常规工作。

19q13相邻基因多态性与慢性苯中毒发病风险关联的病例对照研究

目的探讨共同位于19q13基因ERCC1,ERCC2,XRCC1,PPP1R13L,CD3EAP的单核苷酸多态性(SNP)与慢性苯中毒(CBP)发病风险的关联,找寻慢性苯中毒易感人群的生物标志,并为CBP的早期防治提供科学理论依据。方法 CBP确诊患者100例,按照1∶2匹配同样接触苯的健康对照200例,采集血样2 ml,提取DNA,采用SNa Pshot检测XRCC1 rs25489,PPP1R13L rs1005165及rs1970764;Taq Man Real time PCR探针法检测ERCC1rs11615,ERCC2 rs13181、rs1799793、rs238406,XRCC1 rs25487、rs1799782及CD3EAP rs967591多态基因型。结果ERCC1 rs11615,XRCC1 rs1799782,XRCC1 rs25487多态性与慢性苯中毒发病风险相关,ERCC1 rs11615 TT和XRCC1rs25487 TT基因型均可使CBP发生风险增高(ORa=3.236,95%CI 1.353~7.740,χ~2=6.875,P=0.009;ORa=2.093,95%CI 0.966~4.533,χ~2=5.642,P=0.018),XRCC1 rs1799782 AA和AG基因型均可使CBP发生风险降低(ORa=0.074,95%CI 0.034~0.160,χ~2=45.128,P=0.000;ORa=0.357,95%CI 0.195~0.653,χ~2=12.168,P=0.000)。尚未发现其他基因多态与CBP发病风险的关联。结论在相同苯作业环境下,携带ERCC1 rs11615 TT、XRCC1 rs25487 TT基因型的个体发生慢性苯中毒的风险增高,上述基因多态可能成为预测慢性苯中毒的生物学标志。

你听,你听

“你们知道吗？我们班下午要和二班进行篮球比赛!”一听到这个消息，同学们都像被注入了兴奋剂，教室里顿时热闹起来。“我们班肯定赢。”“友谊第一，比赛第二，输赢在其次。”“对，对，对，重在参与。”“来，我们赶紧商量一下战略。”大家七嘴八舌地讨论起来。

玉米胚芽提取物干预对雄性大鼠生殖系统衰老影响的研究

目的研究采用氯化铝和D-半乳糖建立大鼠衰老模型,观察玉米胚芽提取物延缓雄性生殖系统衰老的作用,探讨其作用机制,为玉米胚芽提取物改善生殖系统衰老的研究提供理论依据。方法 SPF级雄性成年Wistar大鼠90只,体重180～220 g。D-半乳糖溶液(60 mg/kg·bw)腹腔注射,氯化铝溶液(200 mg/kg·bw)灌胃,连续8周,建立大鼠联合染毒衰老模型,设立空白对照组,玉米胚芽提取物(胚元胶囊)对照组,衰老模型组与低、中和高剂量的胚元胶囊干预组。采用苏木素-伊红(HE)染色观察睾丸形态学变化;免疫组化测定睾丸Bax和Bcl-2蛋白表达水平;生化法测定谷胱甘肽-S转移酶等氧化应激相关指标;ELISA方法测定睾酮等血清激素水平;实时定量PCR检测睾丸中Nrf2 mRNA表达量。结果与空白对照组相比,衰老模型组睾丸间质细胞,管腔内细胞少且分布紊乱;而低、中和高剂干预量组脱落溶解现象减少。衰老模型组Bax蛋白表达上调而Bcl-2蛋白表达下调,低、中和高剂量干预组Bax表达下调,Bcl-2表达上调。与空白对照组相比,衰老模型组的Nrf2 mRNA表达下调;低、中和高剂量干预组Nrf2基因表达上调。结论玉米胚芽提取物可改善复合衰老模型所致雄性大鼠睾丸细胞稀疏脱落的现象。复合衰老模型导致雄性大鼠睾丸组织细胞凋亡增加,玉米胚芽提取物干预降低细胞凋亡水平。玉米胚芽提取物干预影响生殖系统氧化应激水平。