9号染色体臂间倒位的遗传效应研究

目的研究人类9号染色体臂间倒位的遗传效应,分析9号染色体臂间倒位与流产、死胎、不孕和不育等的关系。方法采取患者外周血进行淋巴细胞培养,按常规方法制备染色体,应用G显带和C显带技术进行核型分析。结果在4 000例受检患者中,共检出9号染色体臂间倒位71例,发生率为1.78%,明显高于一般人群9号染色体臂间倒位的发生率。结论9号染色体臂间倒位可导致异常生育。

28例罕见的染色体异常核型遗传学研究

目的通过对3 858例不孕不育、自然流产和死胎、生育异常患儿的患者染色体分析,探讨平衡易位与相应临床效应的关系。方法取患者外周血进行淋巴细胞培养,按常规方法制备染色体,应用G显带和C显带技术进行核型分析。结果在3 858例中发现异常核型435例,其中平衡易位73例,包括世界首报染色体平衡易位异常核型28例,占平衡易位异常的38％(28／73)。结论染色体平衡易位是引起不孕不育、自然流产及死胎、生育异常儿的重要原因,对有相关临床症状的患者进行染色体检查是非常必要的。

遗传咨询者染色体多态性与临床效应的研究

目的 研究人类染色体多态性的遗传效应 ,分析染色体多态与生殖异常等临床效应之间的关系。方法 按常规技术方法制备外周血染色体 ,经G、C显带进行核型分析 ,对于小Y者进Y染色体AZF(azoospermiafactor,AZF)区微缺失检测。结果 2 0 0 1年至 2 0 0 3年 1738例患者中检出 9号染色体臂间倒位inv(9) 2 9例 (占 2 5 % ) ,小Y38例 (占 32 .8% ) ,大Y10例 (占 8.6 % ) ,D、G组短臂增长 33例 (占 2 8.4 % ) ,次缢痕增长 6例 (占 5 .1% )。结论 染色体多态造成流产、死胎、不孕不育等 ,导致生殖异常 。

男性不育患者的细胞遗传学和分子遗传学研究

目的 应用细胞遗传学和分子遗传学的检查 ,对男性不育患者的病因进行分析 ,探讨其遗传效应及其对生殖的影响。方法 采用外周血染色体G显带、C显带技术和多重聚合酶链反应技术 ,对 4例男性不育患者进行了细胞遗传学和分子遗传学检测。结果 4例男性不育患者中 3例染色体都发生明显的形态学改变 ,1例未见异常 ,核型分别为 :① 4 5 ,X ,-Y ,+der(Y) ,t(Y ;2 2 ) (q11.2 1;q11.2 ) ,- 2 2 ;② 4 6 ,X ,del(Y) (q11.2 1) ;③ 4 6 ,XY ,t(1;12 ) (p32 ;q2 4 ) ;④ 4 6 ,XY在所选择AZF的AZ Fa、AZFb、AZFd、AZFc区域的 15个序列标签位点 (STS)中 ,1例有 13个位点缺失 ,1例 12个位点缺失 ,1例 1个位点缺失 ,1例 5个位点缺失。结论 对男性不育患者进行细胞遗传学及Y染色体AZF区域微缺失检查是必要的 ,为不育症患者提供明确的遗传学诊断。

深圳市1526例遗传咨询者细胞遗传学分析

目的 本文对深圳市 15 2 6例遗传咨询患者进行了外周血染色体检查 ,发现异常核型 14 0例 ,占 9.17% ,其中常染色体异常 6 9例 ,性染色体异常 71例。在检出的 14 0例异常核型中以不良孕产史占多数 (5 2 .14 % ) ,不孕不育 (36 .4 2 % ) ,智力低下及发育异常 (11.4 4 % )。结论 不良孕产史、不孕不育及智力低下的主要原因是染色体数目或结构异常 ,并且与D、G组染色体短臂变异和Y染色体长度变异也有一定的相关性 ,临床上应引起高度重视。对有临床症状的患者进行染色体检查是非常必要的。

大鼠肺癌癌变过程中癌组织内微血管的定量研究

目的:研究大鼠肺癌癌变过程中癌组织内血管生成量的变化。方法:采用针对第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学方法,对56例大鼠肺癌组织内微血管进行染色,并用图像分析系统定量。结果:肺癌癌变过程中早期浸润癌及浸润癌组织内可见明显的血管形成,早期癌及浸润癌血管生成量分别为(256.1±81.7)μm2、(548.4±175.1)μm2,早期癌血管生成量明显低于浸润癌,差异有显著性(P<0.01)。结论:肿瘤血管化程度增高与肿瘤的浸润密切相关,图像分析系统进行肿瘤血管定量具有客观、快速、方便的优点。

性反转综合征患者SRY基因检测及病因分析

目的研究性反转综合征的发生与性别决定基因SRY(sex-determining region on the Y chromosome)之间的关系。方法应用聚合酶链反应(polymerase-chain reaction,PCR)对2例46,XX男性性反转及1例46,XY女性性反转患者进行SRY扩增,并将扩增产物在ABI-377测序仪上测序。结果2例46,XX男性性反转患者SRY检测1例阳性,1例阴性。46,XY女性性反转患者SRY阳性,2个SRY阳性病例DNA序列分析均未检测到突变。结论SRY是性别决定和分化的重要基因,SRY阴性XX男性性反转及SRY阳性但无突变的XY女性性反转的发生,可能与其它性别分化相关基因的异常有关。

应用间期荧光原位杂交技术检测骨髓增生异常综合征第5,7,8号染色体异常

背景:常规细胞遗传学分析只能分析中期细胞,且受染色体数量和质量的影响。近年来发展的荧光原位杂交技术能在染色体制片和骨髓涂片上分析大量的中期或间期细胞,从而检测染色体的数目及其结构异常。目的:应用荧光原位杂交技术对骨髓增生异常综合征常见染色体异常情况进行检测,并与常规细胞遗传学分析结果作比较。设计、时间及地点:病例分析,于2006-08/2007-09在北京大学深圳医院进行。对象:选取同期在北京大学深圳医院初诊及随访并进行染色体检查的48例骨髓增生异常综合征患者,诊断和分型参照FAB标准。以同期住院的5例缺铁性贫血患者作为对照。实验所用双色探针及CEP8 SpectumAqua探针均购于Vysis公司。方法:患者骨髓标本均采用R显带技术进行常规细胞遗传学分析,以直接法或短期培养法制片,平均每例至少分析20个核型。剩余染色体标本进行荧光原位杂交检测,采用气干法滴片,按探针:水:杂交缓冲液=1∶2∶7配成工作液,加至玻片杂交区域内,应用荧光显微镜在滤色镜激发下观察间期细胞的红/绿色荧光杂交信号,每例分析200个细胞。主要观察指标:两种技术对骨髓细胞染色体异常阳性率的检测。结果:48例骨髓增生异常综合征患者随访24个月,共38例存活。①细胞遗传学分析检出染色体异常18例(37.5%),其中复杂异常4例(8.3%)、5号染色体缺失或5号染色体长臂部分缺失5例(10.4%)、7号染色体缺失或7号染色体长臂部分缺失5例(10.4%)、8号染色体增加8例(16.6%)、20号染色体长臂部分缺失2例(4.6%)、不一致的易位3例(6.2%)。②荧光原位杂交检测除证实细胞遗传学分析发现的5号、7号染色体异常各5例,以及8号染色体异常8例外,还检出2例5号染色体长臂部分缺失、5例7号染色体长臂部分缺失、1例7号染色体缺失、12例8号染色体增加,5号、7号、8号染色体异常阳性率分别增至14.5%,22.9%和41.7%。结论:采用组合探针的荧光原位杂交技术对于骨髓增生异常综合征的5号、7号、8号染色体异常阳性检测率要高于细胞遗传学分析,但因其不能检出染色体易位而无法代替细胞遗传学分析。提示两种技术相结合可提高检测骨髓增生异常综合征染色体异常阳性率。

多重定量荧光PCR快速产前诊断常见染色体非整倍体疾病

目的建立适合中国人群特点的常见染色体非整倍体疾病快速产前诊断技术。方法收集89例妊娠16～21周,羊水穿刺进行胎儿细胞培养染色体核型分析孕妇的羊水,采用定量荧光PCR(quantitative fluorescence PCR,QF-PCR)技术对21、18、13、X/Y染色体上杂合度较高的短串联重复序列(short tandom repeat,STR)位标进行扩增检测,与染色体核型分析的结果进行对照分析;并分析正常核型胎儿21、18、13、X/Y染色体上的STR的多态信息含量(PIC)。结果89例未培养羊水标本经过QF-PCR检测,发现4例21三体,2例18三体,1例13三体,1例性染色体三体,与细胞培养染色体核型分析结果一致。1例21三体结果难以判定,染色体核型分析证实为嵌合体,嵌合比例为32%。其余80例正常,与染色体核型分析结果一致。中国人21、18、13、X/Y染色体上STR:D21S11、D21S1435、D21S1270、D21S1411、D18S391、D18S978、D18S386、D18S499、D13S742、D13S634、D13S628、D13S305、XHPRT和X22的PIC分别为0.761、0.845、0.952、0.893、0.721、0.848、0.926、0.904、0.912、0.787、0.918、0.946、0.890、0.826。结论本研究所选STR位标在中国人群中呈现较高的遗传多态性,符合Hardy-Weinberg平衡定律;多重定量荧光PCR技术适用于快速产前诊断常见染色体非整倍体疾病。

间期荧光原位杂交对骨髓增生异常综合征患者5号和7号染色体异常的检测

目的筛选经济、实用的探针组合提高MDS染色体异常的检出率;比较常规细胞遗传学分析(CCA)及荧光原位杂交(FISH)两种技术在MDS染色体异常检测中的灵敏度和特异性。方法采用CCA法和FISH法分析48例患者骨髓细胞的染色体异常情况。结果CCA检出染色体异常18例(37.5%),其中复杂异常4例(8.3%),+8异常8例(16.6%)、-5/5q-异常5例(10.4%),-7/7q-异常5例(10.4%)、20q-异常2例(4.6%)、不一致的易位3例(6.2%)。FISH除证实CCA发现的-5/5q-和-7/7q-各5例外,还检出2例有5q-,5例有7q-,1例有-7,从而使-5/5q-和-7/7q-的检出率分别增至14.5%和22.9%。平均随访12个月,38例存活,10例死亡,5例转变为急性白血病。结论CCA结合FISH能提高MDS染色体异常的检出率,与CCA相比,采用组合探针的FISH更为敏感和特异。

性分化异常患者SRY基因检测及病因分析

目的探讨SRY基因在性别分化和发育中的作用。方法应用染色体核型分析和聚合酶链式反应（PCR）对人类性别决定区域（SRY）基因进行特异性扩增。结果在18例患者中有5例为46，XY，SRY（＋）睾丸女性化综合征患者；4例为46，XX女性性反转患者，其中3例为SRY（＋），1例SRY（-）；2例为46，XX，SRY（＋）两性畸形患者；2例为47，XXY克氏征；其他5例患者SRY基因与染色体性别一致，但都伴有不同程度的性发育异常。结论SRY基因的缺失或易位是导致性分化异常的最主要原因，同时性别决定和分化还有其他相关基因参与。

545例NIPT筛查高风险孕妇的产前诊断结果分析

目的探讨无创产前基因检测(NIPT)技术在产前诊断中的分析效能和临床应用价值。方法回顾性分析2013年9月至2018年12月于北京大学深圳医院就诊的545例NIPT筛查高风险并接受羊水穿刺孕妇(不包括双胎孕妇)的产前诊断结果。结果545例NIPT高风险的孕妇中,21-三体165例、18-三体67例、13-三体41例、性染色体数目异常202例、常染色体数目异常49例、缺失或重复序列超过10Mb的结构异常病例21例,结合羊水细胞染色体核型分析发现21、18、13及性染色体NIPT假阳性率分别为11.5%、35.8%、78.0%和43.1%,而常染色体数目异常及染色体结构异常的假阳性率为91.8%和76.2%;另外,22例NIPT阳性病例的羊水核型分析结果提示为嵌合型,其中有13例性染色体嵌合体,占比最高;此外,还包括3例表现为+mar及+mar的嵌合型,2例为18-三体和1例性染色体数目异常,利用染色体微阵列分析(CMA)检测分析,确证了+mar为相应染色体的部分片段。结论无创产前基因检测具有较高的检测敏感性和特异性,但对产前筛查中常见的21、18、13-三体及性染色体异常仍存在一定程度的假阳性率,NIPT提示高风险的孕妇仍须进一步行有创产前诊断来确诊。

无精子症患者的遗传病因分析

目的 研究染色体异常及Y染色体AZF微缺失与无精子症的关系。方法 采用G显带、C显带技术及多重PCR技术对4 8例无精症患者分别进行了细胞遗传学检查和Y染色体AZF微缺失检测。结果 4 8例无精症患者中发现染色体异常13例;多态5例;AZF微缺失7例。遗传因素引起的无精子症占整个无子精症病因的34%。结论 染色体异常及Y染色体AZF微缺失是引起无精子症的重要原因,在进行无精子症的临床诊断时,遗传因素不可忽视。

应用间期荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征8号和20号染色体异常

目的筛选出经济、实用的探针组合提高细胞分子遗传学在MDS诊断中的应用;探讨常规细胞遗传学分析(CCA)及荧光原位杂交(FISH)两种技术在MDS检测中的灵敏度和特异性;探讨MDS患者的8、20号染色体改变及与预后的关系。方法采用常规细胞遗传学法和FISH法分析48例患者的骨髓细胞的染色体异常情况。用SPSS12.0统计软件,对患者的遗传学异常与疾病转归、预后之间关系进行相关性检验。结果检出染色体异常26例(54.2%),其中复杂异常5例(10.4%),单一+8异常13例(27.1%),20q-异常3例(6.3%)。平均随访12个月,38例存活,10例死亡,5例转变为急性白血病。复杂核型与MDS的急性白血病转化及死亡密切相关。结论CCA结合FISH能提高MDS的诊断率;探针组合简便、经济,能够检出MDS中+8,20q-核型异常,有较强的临床实用性;结合细胞分子遗传学改变能较准确判断MDS患者的预后。

急性白血病遗传学改变的预后意义和微小残留病检测

该研究涉及了一些最为常见的急性白血病中的基因改变。其中急性淋巴细胞白血病(ALL)中B前体细胞-ALL有t(12;21)、t(1;19)、t(9;22)和MLL基因重排;T前体ALL有SCL基因的重排、HOX11过表达及其他涉及TCR位点的重排有B与T-ALL的克隆分析;急性髓性白血病(AML)中常见t(15;17)、t(8;21)、inv(16)或t(16;16)、MLL易位、基因突变、MLL的部分串联重复和基因的异常表达。讨论了用于鉴别预后因子以及用敏感性高的PCR和其他一些新的定量技术能敏感地测出低水平微小残留病(MRD)检测的分子方法。针对每种疾病来论述其分子水平的改变。