长时间活体成像的小动物固定解决方案

为解决双光子活体显微成像试验中样本固定的问题,研制了一套适用于多种不同模式的小动物固定装置,能根据动物的大小进行灵活调整适配,可对小动物不同感兴趣区域(如脑部、腹部、四肢等)进行固定,确保成像过程中焦面的稳定,并可以对成像的位置进行定位,保证长时间、多时间节点的稳定成像.装置简单易加工、成本低,能广泛适用,为活体成像提供了一种多功能的活体小动物固定方法,能够帮助研究人员完成大部分麻醉状态下小动物活体试验.

全内反射荧光显微术在G蛋白偶联受体研究中的应用

G蛋白偶联受体是最大的细胞膜受体超家族,是许多临床治疗药物的靶点。放射性配体结合、酶联免疫吸附和免疫共沉淀是研究它们结构和功能的主要技术,但这些属于群体平均(ensemble average)研究,无法得到单个分子图像和动态变化。全内反射荧光显微镜利用隐逝波激发临界面下200 nm范围内荧光物质成像,具有信噪比高、Z轴分辨率高、速度快和对生物样本损伤小等优点,是常用的单分子荧光成像技术。本文在介绍全内反射荧光显微镜发展历史、原理、组成和成像优势的基础上,详细阐述全内反射荧光显微镜在研究G蛋白偶联受体构象变化、寡聚化、内吞和再循环以及信号转导等方面的应用,并提出未来展望。

全内反射荧光显微镜的使用研究

全内反射荧光显微镜利用隐逝波激发临界面下200纳米范围内荧光物质成像,具有信噪比高、速度快和对生物样本损伤小等优点,是常用的单分子荧光成像技术。本文在介绍全内反射荧光显微镜原理、组成、类型和优劣势的基础上,充分挖掘本单位在全内反射荧光显微镜使用方面的经验,以荧光蛋白标记的网格蛋白(Clathrin)为研究对象,阐述了全内反射荧光显微镜在细胞膜相关分子检测中的应用,讨论了仪器的最新进展,并对未来发展提出展望,希望为全内反射荧光显微镜的管理者和使用者提供借鉴和参考。

冷冻电镜平台3+X运行模式的探索与思考

冷冻电镜技术已成为生命科学领域研究结构和功能的重要技术手段,冷冻电镜平台的建设给高校和科研院所的学科发展带来新的突破口。现以浙江大学冷冻电镜中心的建设与运行为例,阐述了冷冻电镜平台的仪器架构和3+X创新运行模式,剖析了运行中存在的问题,提出了相应对策,旨在探索冷冻电镜平台高效、良性的运行机制和管理模式。

科研论文中显微图像的获取和处理

显微成像是科学研究中重要且直观的方法,插图是科研论文的重要组成部分,对于成像技术的初学者而言,在显微图像获取和处理过程中容易面临各种问题及误区,该文围绕显微图像的获取和处理过程,详细阐述了样本制备、显微镜选择和图像处理与分析的各个步骤及其注意事项,为成像技术的初学者提供重要的参考依据,以便能合理利用显微成像技术获得可靠的实验数据,科学地展示论文插图。

葛根素对培养人脐静脉内皮细胞钙超载的影响

目的探讨葛根素对培养人脐静脉内皮细胞钙超载的影响。方法采用钙荧光探针F luo-3/AM标记培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察H2O2、ATP和高K+刺激作用下葛根素对培养的HUVECs中钙超载的影响。结果葛根素能抑制H2O2、ATP和高K+引起的[Ca2+]i升高,抑制率分别为72.2%、56.5%和78.2%;葛根素对高K+引起的钙超载的抑制作用与L-型电压依赖型钙通道的特异性拮抗剂Verapam il相似。结论葛根素可以缓解培养人脐静脉内皮细胞内钙超载,其作用机制可能与拮抗膜上电压依赖型钙通道和抑制内质网钙库释放有关。

AMPA受体的磷酸化与突触可塑性

突触可塑性在学习记忆中发挥了重要作用,AMPA(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid,AMPA)受体功能和运输的调节是突触可塑性机制研究的重要环节。在突触可塑性发生过程中,激酶和磷酸酶能够调节AMPA受体C末端的磷酸化水平,进而影响AMPA受体运输。对于AMPA受体磷酸化的研究能够加深我们对突触可塑性机制的理解。

基于ANSYS的霍普金森拉杆装置设计研究

分离式霍普金森拉杆(Split Hopkinson Tension Bar,SHTB)装置被广泛用于研究材料的动态抗拉力学性能,对SHTB来说,入射拉伸波的峰值大小、脉冲时长及脉冲升时等直接关系拉伸实验结果的准确性。目前尚无系统性地对入射拉伸波的产生尤其是实验装置中各部件的尺寸对入射波波形影响的研究。采用ANSYS/LS-DYNA有限元分析软件对SHTB实验装置中入射波产生过程的波形叠加、幅值等问题进行数值分析,为改进SHTB实验装置提供了设计依据。

工程图学教学中融入美学的探索实践

结合教学实践,提出在工程图学教学中融入美学的"三个有利于"的意义作用,详细论述了工程图学中的规范美、线条美、对称美、布局美和变化美、奇异美,并从教学观念美学化、教学内容审美化、教学方法艺术化和教学手段技术化等四个方面进行探索实践,提高了教学质量,有利于学生的自我发展。

基于认知—行为的心理护理在青年抑郁症患者中的应用

目的探讨基于认知—行为的心理护理在青年抑郁症患者中的应用效果。方法选取2018年10月—2020年10月在上饶市第三人民医院确诊的60例青年抑郁症患者,采用简单随机分组法分为观察组和对照组,每组30例。对照组患者接受常规护理干预,观察组患者接受基于认知—行为的心理护理干预,分别于干预前后,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估2组患者焦虑、抑郁情况,采用症状自评量表(SGL-90)评估2组患者症状改善情况。结果干预前,2组HAMD和HAMA评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组低于对照组(P<0.05)。干预前,2组SGL-90评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组低于对照组(P<0.05)。结论基于认知—行为的心理护理可以改善青年抑郁症患者的临床症状,有助于缓解焦虑和抑郁等不良情绪。

氮化硅陶瓷层裂强度的研究

用一级轻气炮冲击加载装置,对氮化硅陶瓷进行了冲击性能实验研究.发展了一种新的方法用于研究层裂特性,即通过在样品中埋设电磁粒子速度计来记录氮化硅陶瓷内部的层裂特性.该方法不同于常用的VISAR激光干涉法和锰铜计法,记录的是样品内部粒子速度的变化特征,位于层裂面后方的粒子速度计能清晰地表征材料的层裂特性.通过实验,得到了密度为3.12 g/cm3的氮化硅陶瓷的层裂强度为0.73 GPa,和Nahme等得到的强度较为接近,对称碰撞得到的裂片厚度与该次实验的飞片厚度相当.实验表明,电磁粒子速度计的方法可以用于研究非磁屏蔽材料的层裂特性.由于采用多个计进行记录,还得到了材料在弹性区内(1.8～3.6 GPa)的Hugoniot冲击绝热线.

利用多模式培训提高大型仪器使用效益的探索

大型仪器在高校实验教学以及科研测试服务中发挥着重要的作用。强化培训与服务是提高仪器使用效率的有效方法。针对目前医学院公共技术平台中大型仪器培训中存在的问题,对培训工作进行了多模式的探索,建立了分类培训、传统现场培训与线上视频培训相结合及统一开放培训与定制专场培训相结合等方法,优化了相关培训管理制度。实践表明,这些措施使仪器培训高效可行,培训成效显著,有利于充分挖掘大型仪器的最大使用潜能,发挥最大使用效益,促进科研发展。

构建一流公共仪器平台的关键与对策

构建大型仪器设备共享平台是当前各高校提高仪器设备使用率的主流趋势,也是确保教学和科研工作的重要物质保障。医学院结合公共技术平台近3年来仪器共享管理工作的探索与实践,就有效管理组织和机构、信息化开放预约管理系统、开展培训工作、实验队伍建设等,对构建一流大型公共仪器平台的关键环节进行了分析和探讨。并针对存在的问题,从争取稳定的投入资金及项目支持、完善效益评价体系、加强高层次人才队伍建设、加强大型仪器设备维修管理等方面提出了发展建议,对全国公共技术平台的建设可供参考。

点阵CO_2激光联合液氮冷冻治疗跖疣45例临床观察

目的评价点阵CO2激光联合液氮冷冻治疗跖疣的临床疗效和安全性。方法将入选的85例跖疣患者随机分为两组,治疗组(45例)予点阵CO2激光联合液氮冷冻治疗;对照组(40例)予液氮冷冻治疗,均10d为1疗程,共治疗3个疗程。在治疗前及治疗第10d记录各观察指标,随访6个月观察其复发率。结果治疗组与对照组痊愈率分别为93.33%和52.50%,复发率为2.38%和23.81%,症状评分为(0.67±0.31)和(2.25±1.48),两组的差异均有统计学意义(P均<0.05),且不良反应轻微。结论点阵CO2激光联合液氮冷冻治疗跖疣安全而有效。

双光子显微镜检测活体小鼠脑内微循环技术的建立

目的:利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,观察活体小鼠脑内血管的三维立体分布,建立测量单根毛细血管血流速度的新方法。方法:麻醉小鼠,制作活体小鼠颅骨开窗样本,尾静脉注射血浆标记物Texas-Red dextran,利用双光子显微镜z序列扫描检测脑内微循环系统的三维分布;利用线扫描测量毛细血管的血流速度。结果:通过双光子显微镜可以探测到脑内500μm处的血管分布和走向,图像清晰且信噪比高;通过计算单位时间内红细胞的运动距离测得毛细血管(直径≤6μm)的血流速度为(0.59±0.12)mm/s。结论:利用双光子显微镜观察脑内微循环系统技术平台初步建立,为基础研究和医药应用提供了在体实验依据。

基于双光子显微镜技术的脑微血栓动物模型的建立与评价

利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,构建脑深部微血管血栓动物模型。麻醉小鼠,制作活体小鼠颅骨开窗样本,尾静脉注射血浆标记物fluorescein isothiocyanate-dextran(FITC-dextran),通过z序列扫描检测脑内血管系统的三维分布;通过飞秒激光定点照射脑内目标血管建立微血栓动物模型;利用线扫描测量目标血管形成血栓后的血流速度,评价微血栓形成的效果。通过双光子显微镜可以探测到脑内500μm处的血管分布和走向,图像清晰且信噪比高;通过光刺激能够在脑内形成稳定的微血栓;微血栓形成后血流速度明显变慢。利用双光子显微镜诱导微血栓技术初步建立,为基础研究和医药应用提供了微血栓动物模型。

Curative observation and the influence on the mental status of the patients with acne scars treated with pixe12940 laser

目的：了解痤疮凹陷性瘢痕患者的心理健康状况，观察Pixel 2940激光治疗痤疮凹陷性瘢痕的疗效及对患者心理健康的影响。方法：2010年10月～2012年8月，笔者科室采用Pixel 2940激光治疗痤疮瘢痕患者39例，并在治疗前和治疗结束后1月用Cardiff痤疮心理评估量表评估患者心理状况。结果：Pixel 2940激光治疗痤疮凹陷性瘢痕有效率达94．9％，副反应少而轻；痤疮影响了患者的心理健康，患者常常感到焦虑、愤怒和自信心下降等，但治疗后心理明显好转。结论：用Pixel 2940激光治疗痤疮凹陷性瘢痕疗效稳定、副反应少，可改善患者心理健康状况。

利用双光子显微镜检测活体动物脑内Ca^(2+)动态变化

利用正置双光子显微镜系统和荧光探针标记技术,观察脑内Ca2+分布,建立测量活体动物脑内Ca2+动态变化的实验方法。制作活体动物颅骨开窗样本,脑内负载Ca2+标记物Oregon Green 488 BAPTA-1和星型胶质细胞标记物Sulforhodamine 101,利用双光子显微镜分别检测神经元和星型胶质细胞内Ca2+分布和动作电位引起的Ca2+瞬变。结果显示双光子显微镜可探测到脑内250μm处荧光信号,图像清晰且信噪比高,并能实时检测神经元和星型胶质细胞内Ca2+信号的动态变化。活体脑内Ca2+检测技术平台的建立为基础研究和医药应用提供了在体实验依据。

用于测量材料高温动态力学性能的SHPB技术

分离式Hopkinson杆技术已广泛应用于测量材料的动态力学性能,但在测量材料高温动态力学性能方面还存在一些问题。论述了目前采用Hopkinson杆测量材料高温动态力学性能的一些技术方法和实验装置,重点讨论了单独加热试件并快速对杆的实验方法,并提出一些需要解决的问题和发展方向。

倒置激光共聚焦显微镜的共享使用与维护

为给科研人员和仪器管理者提供系统、直观的激光共聚焦显微镜的使用与维护方法,介绍了Olympus倒置激光共聚焦显微镜与活细胞工作站(IX81-FV1000)的配置、软硬件组成和技术参数,样品制备要求,单光子、活细胞图像采集常用操作规程,共享成效、日常维护和管理等方面。浙江大学医学院公共技术平台的倒置激光共聚焦显微镜实行开放共享,近三年来使用率高,共享效果好。根据仪器使用经验总结出了一些获得高分辨率图像的方法,供大家探讨。