热敏灸对脑缺血再灌注损伤大鼠SOD、MDA的影响

目的观察热敏灸对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠超氧化物歧化酶(SOD)的活性、表达和丙二醛(MDA)含量的影响,以阐明热敏灸减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠36只,分为假手术组、模型组、艾灸组和热敏灸组。采用线栓法闭塞大脑中动脉2 h后进行再灌注,制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型;比色法测定SOD活性和MDA含量;Western blot技术检测大鼠大脑皮质SOD2蛋白的表达。结果热敏灸组大鼠血清和大脑皮质SOD活性(22.78±1.31)U/mL、(4 909.6±1 345.6)U/g均高于模型组(20.17±1.12)U/mL、(2 602.0±1 515.5)U/g,血清和大脑皮质MDA含量(3.78±2.00)μmol/L、(1 226.5±38.4)nmol/g均低于模型组(16.82±6.70)μmol/L、(1 905.6±478.6)nmol/g;大脑皮质SOD2蛋白表达量(0.974±0.166)高于模型组的(0.702±0.040)。结论热敏灸具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,提高SOD活性和表达、降低氧自由基含量可能是其作用机制之一。

抑郁症模型大鼠血清雌激素水平与海马5-HT含量之间的关系

目的:观察抑郁症模型大鼠血清雌二醇(E2)水平、海马5-羟色胺(5-HT)含量及其中缝核雌激素受体β(ERβ)和色氨酸羟化酶2(TPH2)表达的变化,探讨抑郁症发生的可能机制。方法:雌性SD大鼠20只,随机平均分为正常组和模型组,模型组给予孤养和21d慢性不可预见性的温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型。采用放射免疫分析法(RIA)测定血清雌二醇(E2)水平、高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定海马5-羟色胺(5-HT)含量、RT-PCR技术检测中缝核ERβmRNA和TPH2mRNA表达以及荧光免疫组化双重染色法检测中缝核ERβ蛋白和TPH2蛋白表达。结果:21d应激后,模型组大鼠血清E2水平下降、海马5-HT含量减少、中缝核ERβmRNA和TPH2mRNA相对表达量下降及ERβ阳性细胞数和TPH2阳性细胞数明显减少。结论:E2与海马5-HT之间可能存在E2→中缝核5-HT能神经元ERβ→TPH2→海马5-HT的功能作用链。

艾灸预处理对脑缺血再灌注损伤模型大鼠大脑皮质caspase-3蛋白表达的影响

目的观察艾灸预处理对脑缺血再灌注损伤模型大鼠大脑皮质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3蛋白表达的影响,探讨艾灸预处理减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠21只,分为假手术组(6只)、模型组(8只)和艾灸预处理组(7只)。采用线栓法闭塞大脑中动脉2 h后进行再灌注,制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型。采用TTC染色检查脑组织梗死情况;HE染色检查大脑皮质的形态结构;电子显微镜观察大脑皮质神经细胞的超微结构;荧光免疫组织化学技术检测大脑皮质caspase-3蛋白的表达。结果艾灸预处理组大鼠患侧脑组织梗死体积百分比[(24.9±4.7)%]低于模型组[(45.8±4.6)%],大脑皮质神经细胞形态结构变化较模型组轻,caspase-3阳性细胞数(39.17±7.28)低于模型组(58.17±16.53)。结论艾灸预处理具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,降低大脑皮质caspase-3蛋白的表达可能是其作用机制之一。

新生小鼠缺氧缺血性脑病脑组织caspase-3表达的变化

目的观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3在新生儿缺氧缺血性脑病(NHIE)小鼠模型脑组织中表达的变化。方法选取7 d CD1新生小鼠30只,按随机数字表法分为假手术组(9只)和NHIE模型组(21只),后者制备NHIE动物模型。用TTC染色法检查2组的脑组织梗死面积;DAPI染色观察脑组织病理变化;原位末端标记技术检测脑组织细胞凋亡;荧光免疫组化法检测脑组织中caspase-3表达水平。结果假手术组小鼠脑组织未见梗死灶,脑组织细胞排列致密整齐,TUNEL阳性细胞数[(18.57±4.98)个]和caspase-3阳性细胞数[(9.17±2.14)个]明显低于NHIE模型组的TUNEL阳性细胞数[(209.57±41.27)个]和caspase-3阳性细胞数[(63.33±16.22)个];与假手术组相比,NHIE模型组小鼠的右侧半球可见梗死灶,脑组织细胞大量坏死脱落、周围组织间隙变大。结论 NHIE模型鼠出现的脑组织损伤可能与caspase-3表达增加、脑组织细胞凋亡增加有关。

艾灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织炎症细胞浸润和CD11b表达的影响

目的观察艾灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织炎症细胞浸润和CD11b表达的影响。方法出生7 d新生ICR小鼠,随机分为3组:假手术组(n=20)、模型组(n=24)和艾灸组(n=20)。假手术组只做颈部手术,不闭合颈总动脉,不缺氧;模型组行颈总动脉闭合术,并给予缺氧处理;艾灸组在模型组的基础上给予艾灸治疗,每日1次,35min/次。采用TTC染色检测小鼠脑梗死的面积;HE染色观察小鼠脑组织形态结构和炎症细胞浸润;组织免疫荧光染色检测脑组织CD11b表达。结果与假手术组相比,模型组小鼠的脑梗死面积增大,患侧脑组织大量细胞坏死脱落,并伴有大量炎症细胞浸润,CD11b阳性细胞数明显增多;与模型组相比,艾灸组小鼠的脑梗死面积缩小,患侧脑组织细胞排列较致密、整齐,炎症细胞较少,CD11b阳性细胞数明显减少。结论艾灸具有减轻新生小鼠缺氧缺血性脑损伤的作用,这可能与其减少脑组织小胶质细胞浸润、减轻炎症反应有关。

艾灸对新生小鼠脑卒中后抑郁模型色氨酸羟化酶2和单胺氧化酶A表达的影响

目的:观察艾灸对新生小鼠脑卒中后抑郁模型中缝核色氨酸羟化酶2(TPH2)以及大脑皮质单胺氧化酶A(MAO-A)蛋白表达的影响,研究艾灸治疗新生小鼠脑卒中后抑郁的作用机制。方法:7 d新生小鼠,随机分为假手术组、脑卒中后抑郁模型组和艾灸组。采用复合刺激制备新生小鼠脑卒中后抑郁模型,即于出生后7 d给予新生小鼠脑缺血缺氧刺激,并于术后3w始给予21d慢性不可预见性温和应激。采用荧光免疫组织化学法检测小鼠中缝核TPH2蛋白表达和大脑皮质MAO-A蛋白表达。结果:脑卒中后抑郁模型组小鼠中缝核TPH2阳性细胞数[(7.43±2.44)个]低于假手术组[(29.43±9.50)个],大脑皮质MAO-A阳性细胞数[(16.57±3.21)个]高于假手术组[(2.14±0.90)个];与模型组相比,艾灸组小鼠中缝核TPH2阳性细胞数[(23.29±8.71)个]增多,大脑皮质MAO-A阳性细胞数[(7.43±3.26)个]减少。结论:艾灸改善新生小鼠脑卒中后抑郁的效果,可能与其提高中缝核TPH2表达、降低大脑皮质MAO-A表达有关。

热敏灸对抑郁症模型大鼠内分泌激素的调节作用

目的制备抑郁症大鼠模型,研究热敏灸对抑郁症模型大鼠血清内分泌激素水平的影响,阐明热敏灸治疗抑郁症的机理。方法采用雌性SD大鼠,联合孤养和慢性不可预见性温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型。用Open-Field测试大鼠的直立活动和水平活动得分;1h内大鼠摄入饮用水和蔗糖水量计算糖水消耗百分比;大鼠阴道细胞涂片观察大鼠动情周期规律;放射免疫分析法(RIA)测定大鼠血清雌二醇(E2)、甲状腺素(T4)水平,酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定大鼠血清皮质酮水平。结果 21d CUMS可使大鼠的水平活动得分和直立活动得分减少、糖水消耗百分比降低,动情周期紊乱,血清E2水平降低、皮质酮水平增高,但T4水平无明显变化;而热敏灸具有提高大鼠的水平活动得分和直立活动得分、增加大鼠糖水消耗百分比,调整动情周期以及提高血清E2水平和降低血清皮质酮水平。结论热敏灸可能通过调整体内内分泌激素水平而达到改善抑郁症。

热敏灸对脑缺血再灌注损伤模型大鼠甩尾潜伏期的影响

目的制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型,观察热敏灸对脑缺血再灌注损伤模型大鼠甩尾潜伏期的影响,以了解热敏灸治疗脑缺血再灌注损伤的效果。方法雄性SD大鼠36只,分为假手术组、模型组、艾灸组和热敏灸组。采用线栓法闭塞大脑中动脉2 h后进行再灌注,制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。采用TTC染色检查脑组织梗死情况;用鼠尾光照测痛仪测定大鼠的甩尾潜伏期。结果与模型组相比,热敏灸组大鼠的脑梗死面积缩小;甩尾潜伏期缩短。结论热敏灸具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的效果;甩尾潜伏期可随着病情的好转而缩短。

脑缺血再灌注损伤模型大鼠大脑皮质细胞色素C与Bax蛋白的表达

目的制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,并观察大脑皮质细胞色素C(CytC)与Bax蛋白表达的变化。方法采用随机数字表法将22只雄性SD大鼠分为正常组(6只)、假手术组(6只)和模型组(10只)。采用线栓法闭塞大脑中动脉2h后进行再灌注3d,制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。采用神经缺失评分观察大鼠的行为学表现;TTC染色检查脑组织梗死情况;HE染色观察大鼠脑组织形态结构;Western blot技术检测大鼠大脑皮质CytC与Bax蛋白的表达。结果假手术组大鼠无神经功能障碍表现,脑组织未见梗死灶,脑组织神经细胞形态规则;大脑皮质CytC与Bax蛋白的相对表达量,与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠出现神经功能障碍,左侧半球可见梗死灶,梗死侧脑组织形态学观察可见神经细胞大量坏死脱落,胞质呈空泡变性、疏松,胞核浓缩深染;大脑皮质CytC与Bax蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论大脑中动脉闭塞2h后进行再灌注3d可造成脑缺血再灌注损伤,可能与大脑皮质CytC与Bax蛋白的表达增加有关。

补益肝肾中药对更年期抑郁症大鼠模型行为学的影响

目的制备更年期抑郁症大鼠模型,观察补益肝肾中药对大鼠模型行为学测试结果的影响,了解补益肝肾中药防治更年期抑郁症的效果。方法采用雌性SD大鼠,在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d慢性不可预见性的温和刺激(CUMS)制备更年期抑郁症大鼠模型。以Open-Field测试大鼠的直立活动和水平活动得分;以1 h内大鼠摄入饮用水及蔗糖水量计算糖水消耗百分比;以Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆力。结果行为学测试方面:中药组大鼠水平活动得分和直立活动得分均有所上升;糖水消耗百分比升高;学习记忆力有所增强。结论补益肝肾中药具有防治更年期抑郁症的效果。

围绝经期抑郁症的研究进展

目的:综述围绝经期抑郁症的研究进展。方法:从围绝经期抑郁症的发病机制研究、围绝经期抑郁症的治疗以及围绝经期抑郁症的疗效评价指标等方面综述围绝经抑郁症近年来国内外的研究情况。结果:围绝经期抑郁症的发生与性激素(尤其是雌激素)、脑内单胺类神经递质的水平下降有关;围绝经期抑郁症可从西医和中医两方面进行治疗,西医主要是通过激素替代和抗抑郁药着手提高体内激素的水平和脑内单胺类神经递质的水平,中医则从整体出发,通过辨证论证采用疏肝解郁、调补肝肾法进行治疗,此外也有采用中西医结合进行治疗的;在诊断和疗效评价指标方面,可以通过HAMD量表(或Zung SDS量表)、KMI评分表、垂体-内分泌功能测定以及进年来发展起来的事件相关电位评定患者的情感障碍、绝经期症状、体内内分泌激素情况以及认知障碍的程度。结论:围绝经期抑郁症的研究已取得了一定的成果,但确切的机制和有效的防治还有待于今后进一步的研究。

针刺对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织细胞凋亡的影响

目的观察针刺对缺氧缺血性脑病(HIE)新生小鼠脑组织细胞凋亡及caspase-3表达的影响。方法将129只出生7 d的新生小鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组43例。采用颈总动脉结扎,并给予8%缺氧100 min制备HIE新生小鼠模型。采用TTC染色检测小鼠脑梗死面积;DAPI染色检测脑组织形态结构;原位末端标记技术检测脑组织细胞凋亡;免疫组织化学法检测脑组织caspase-3表达。结果与假手术组相比,模型鼠脑梗死面积增大,患侧脑组织大量细胞坏死脱落,排列疏松,凋亡细胞数和caspase-3阳性细胞数明显增加;与模型组相比,针刺组小鼠脑梗死面积缩小,患侧脑组织排列较致密整齐,凋亡细胞数和caspase-3阳性细胞数明显减少。结论针刺具有减轻HIE小鼠脑组织损伤的作用,这可能与其降低脑组织caspase-3表达、减少细胞凋亡有关。

色氨酸羟化酶2在去卵巢抑郁症模型大鼠中缝核中表达减少

目的观察去卵巢抑郁症大鼠模型海马5-羟色胺(5-HT)含量及其合成限速酶-色氨酸羟化酶2(TPH2)表达的变化。方法雌性SD大鼠,在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d慢性不可预见性温和刺激(CUMS)制备去卵巢抑郁症大鼠模型,以行为学测试进行评价。用高效液相色谱-电化学法((HPLC-ECD)测定海马5-HT含量;用RT-PCR技术检测中缝核TPH2 mRNA表达量;用荧光免疫组化检测中缝核TPH2蛋白表达。结果 21 d应激后,模型组大鼠直立活动得分及水平活动得分均减少,糖水消耗百分比下降;海马5-HT含量下降;中缝核TPH2 mRNA表达量及TPH2阳性神经元数量减少。结论在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d CUMS可造成去卵巢抑郁症大鼠模型;模型大鼠海马5-HT含量下降,可能是中缝核TPH2的表达减少所致。

热敏灸对抑郁症模型大鼠痛反应时间的影响

目的制备抑郁症大鼠模型,观察热敏灸对抑郁模型大鼠痛反应时间的影响,以了解热敏灸治疗抑郁症的效果。方法用雌性SD大鼠,联合孤养和慢性不可预见性温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型。以Open-Field测试大鼠的直立活动和水平活动得分;以1 h内大鼠摄入饮用水和蔗糖水量计算糖水消耗百分比;用鼠尾光照测痛法测定大鼠的痛反应时间。结果与模型组相比,热敏灸组大鼠的水平活动得分和直立活动得分均增加;糖水消耗百分比升高;痛反应时间缩短。结论热敏灸具有缓解或减轻抑郁症的疗效。

c-myb对人绒毛膜促性腺激素诱导的大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响

采用离体细胞体外孵育法,观察反义c-myb寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletides,ODN)对人绒毛膜促性腺激素(human chori-onic-gonadotropin hormone,hCG)诱导的大鼠间质细胞睾酮分泌的影响,并进一步探讨了外源性二丁酰c-AMP(dbcAMP)、Ca^(2+)以及蛋白质抑制剂放线菌酮(cycloheximide,CYX)对间质细胞中c-Myb蛋白表达和睾酮分泌的作用。结果表明,反义c-myb ODN呈剂量依赖性地抑制hCG诱导的离体间质细胞的睾酮分泌,同时使间质细胞中c-Myb蛋白免疫组化染色下降;而无义tat ODN没有相应的作用。100μmol/L的dbcAMP可进一步促使hCG诱导的间质细胞分泌睾酮,并且使间质细胞中c-Myb蛋白免疫组化染色IOD值升高,与hCG组相比,具有统计学意义。钙离子通道阻断剂维拉帕米(10μmol/L)和蛋白质抑制剂放线菌酮(50μg/ml)可使hCG诱导的大鼠间质细胞的睾酮分泌下降,并使间质细胞的C-Myb蛋白兔疫组化染色降低。该结果说明c-myb参与hCG诱导的大鼠间质细胞睾酮分泌作用。

热敏灸对PCPA致失眠大鼠SOD、MDA的影响

目的:观察热敏灸对失眠大鼠血清和脑干超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响,了解热敏灸治疗失眠的机制。方法:雄性SD大鼠32只,随机分为4组:正常对照组、模型组、艾灸组和热敏灸组,每组8只。采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)制备失眠大鼠模型;用Ethovision XT视频跟踪系统录制大鼠活动、观察大鼠的行为学表现;用Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆力;用分光光度计检测SOD活性和MDA含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠昼夜节律消失;逃避潜伏期延长;SOD活性降低,而MDA含量增加。与模型组相比,热敏灸组大鼠昼夜活动节律基本恢复正常;逃避潜伏期缩短;SOD活性增高,而MDA含量下降。结论:热敏灸具有缓解失眠大鼠症状的作用,可能与其提高机体SOD活性、降低MDA含量有关;热敏灸的效果在某种程度上优于传统悬灸。

热敏灸对失眠大鼠模型血清内分泌激素水平的影响

目的:观察热敏灸对失眠大鼠模型血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、甲状腺素(T4)、生长激素(GH)和褪黑素(MT)水平的影响,了解热敏灸治疗失眠的机制。方法:雄性SD大鼠32只,随机分为4组:正常组、模型组、艾灸组和热敏灸组,每组8只。采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)制备失眠大鼠模型,用Ethovision XT视频跟踪系统录制大鼠活动观察大鼠的行为学表现,用放射免疫分析法检测大鼠血清中ACTH、CORT、T4、GH和MT的水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠昼夜节律消失;血清CORT、T4、GH和MT含量均升高,而血清中ACTH含量下降。与模型组相比,热敏灸组大鼠昼夜活动节律基本恢复正常;血清CORT、T4、GH和MT含量均下降,而血清中ACTH含量有所升高。结论:热敏灸能缓解失眠大鼠症状,可能与调节体内激素水平有关。

抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化

目的观察抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化。方法雌性SD大鼠20只,随机分为正常组和模型组,每组10只。正常组不给予任何处理,模型组给予孤养加21 d慢性不可预见性的温和应激(CUMS)。采用Open-Field、糖水消耗量及Morris水迷宫测试大鼠的行为学表现;光镜以及透射电镜观察大鼠海马组织结构。结果与正常组相比,模型组大鼠行为学测试显示其直立活动得分及水平活动得分均减少、糖水摄入百分比减少及学习记忆力下降;HE染色显示模型组大鼠海马锥体细胞层变薄,细胞间隙增大,排列紊乱,疏松,细胞结构不完整,甚至有大量细胞缺失;透射电镜下,模型组海马神经元较少,细胞核呈现皱缩改变,核膜凹凸不整模糊不清,并有局部断裂;胞质内线粒体肿胀变性,嵴消失。结论孤养加21 d CUMS可造成大鼠抑郁症模型;模型组大鼠学习记忆力下降可能与应激造成海马形态结构改变有关。

热敏灸对抑郁症模型大鼠行为学的影响

目的:制备抑郁症大鼠模型,观察热敏灸"百会"对抑郁症大鼠模型行为学结果的影响,了解热敏灸"百会"治疗抑郁症的效果。方法:用雌性SD大鼠,采用孤养和慢性不可预见性温和应激(CUMS)制备抑郁症大鼠模型。以Open-Field测试大鼠的直立活动和水平活动得分;以1h内大鼠摄入饮用水和蔗糖水量计算糖水消耗百分比;以Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆力。结果:与模型组相比,热敏灸组大鼠的水平活动得分和直立活动得分均增加;糖水消耗百分比升高;逃避潜伏期缩短。结论:热敏灸"百会"具有改善抑郁症的效果。