氧化三甲胺在阿尔兹海默病中的研究进展

阿尔兹海默症(alzheimer’s disease,AD)是一种影响记忆和认知功能的神经退行性疾病,是导致成年后痴呆的主要原因,该病与多种危险因素相关,其中肠道微生物代谢产物氧化三甲胺(TMAO)最近被确认为AD的潜在危险因素。已经证明TMAO通过各种病理生理途径与AD有关。由于分子拥挤效应,TMAO导致淀粉样β肽和tau蛋白这两种蛋白质聚集。这些蛋白的聚集是AD的关键病理特征。此外,已经发现TMAO可以激活星形胶质细胞和炎性反应。除了分子研究外,动物和人类的研究也支持TMAO与认知功能下降之间存在功能关系。本文对TMAO的产生、以及微生物-肠-脑轴系统进行了全面的讨论,全面总结TMAO与AD之间的关系,包括来自体外、体内和临床研究的新证据。希望这些知识能在不久的将来改善AD的预防和治疗。

基于PI3K/AKT/eNOS通路研究芪丹通脉片对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响

目的:基于磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)通路探索芪丹通脉片对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响。方法:从72只SPF级雄性ApoE^(-/-)小鼠中随机选取12只作为对照组,其余小鼠采用颈总动脉外置管术联合高脂饲料建立小鼠易损斑块模型。将造模成功的60只小鼠随机分为模型组、黄芪甲苷组(40 mg·kg^(-1))、丹参酮ⅡA组(90 mg·kg^(-1))、黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组(700 mg·kg^(-1)),每组12只,给予相应药物灌胃12周,每日1次,对照组和模型组给予等体积生理盐水。末次灌胃后,处死小鼠并分离右颈总动脉,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测CD68、α-actin蛋白表达水平,RT-PCR检测eNOS mRNA表达水平,Western Blot检测p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS、基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein-9,MMP-9)蛋白表达水平。结果:TUNEL结果显示:对照组平滑肌细胞几乎没有凋亡,模型组平滑肌细胞凋亡最多;与模型组比较,各给药组平滑肌细胞凋亡明显减少;黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组平滑肌细胞凋亡较黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组有所减少。CD68、α-actin免疫荧光结果显示:对照组几乎没有巨噬细胞,而平滑肌细胞数量最多;与对照组比较,模型组巨噬细胞数量明显增多,而平滑肌细胞数量显著减少;与模型组比较,各给药组巨噬细胞数量明显减少,而平滑肌细胞数量明显增多;与黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组比较,黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组巨噬细胞数量明显减少,而平滑肌细胞数量明显增多。RT-PCR结果显示:与对照组比较,模型组eNOS mRNA表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组eNOS mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组比较,黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组eNOS mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。Western Blot结果显示:与对照组比较,模型组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS蛋白表达水平显著降低,MMP-9蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS蛋白表达水平显著升高,MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组比较,黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS蛋白表达水平显著升高,MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:芪丹通脉片能够稳定动脉粥样硬化易损斑块,其机制可能与激活PI3K/AKT/eNOS信号通路有关。