敲减PPARG对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长影响的研究

目的:探讨敲减过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法:体外培养MCF-7细胞,将PPARG-siRNA和NC-siRNA转染进入MCF-7细胞。分别采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。将转染后的细胞建立裸鼠移植瘤模型。28 d后处死裸鼠,分离瘤体并称重,计算抑瘤率。采用RT-PCR和蛋白印迹法分别检测瘤体中PPARG、β-catenin和MMP-9的mRNA表达和蛋白水平。结果:与空白对照组比较,NC-siRNA组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组和NC-siRNA组比较,PPARG-siRNA组MCF-7细胞增殖率降低、细胞凋亡率增加(P<0.05);与空白对照组和NC-siRNA组比较,PPARG-siRNA组移植瘤质量减少,PPARG、NF-κB和MMP-9的mRNA表达和蛋白水平均降低,抑瘤率增加(P<0.05)。结论:敲减PPARG能抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,促进MCF-7细胞凋亡,抑制裸鼠移植瘤生长,发生机制可能与PPARG调控能量代谢有关。

CYB5D2对乳腺癌皮下移植瘤模型大鼠肿瘤生长的影响

[目的]研究CYB5D2对乳腺癌皮下移植瘤模型大鼠肿瘤生长的影响。[方法]通过乳腺癌MCF-7细胞系建立乳腺癌裸鼠皮下移植瘤动物模型。将含有CYB5D2表达的质粒稳定转染MCF-7细胞,多点注射,将稳定转染的细胞注入裸鼠皮下,作为观察组,同时设置shRNA-CYB5D2阴性质粒为阴性对照组,PBS为空白对照组。测量各组大鼠肿瘤体积及质量;裸鼠转移瘤模型建立成功后处死小鼠,qRT-CPR法检测肿瘤组织内CYB5D2 mRNA表达水平;Western Blot法检测各组裸鼠转移瘤组织内上皮细胞间质转化(EMT)标志表白表达情况,酶联免疫吸附法检测裸鼠转移瘤细胞上清液中MMP-2及MMP-9水平。[结果]观察组转移瘤平均体积及质量显著低于阴性组与空白组(P<0.05),阴性组与空白组裸鼠转移瘤体积及质量无明显差异(P>0.05)。提取试验小鼠肿瘤组织总RNA,qRT-CPR法检测提示观察组肿瘤组织内CYB5D2 mRNA表达量显著高于阴性组及空白对照组(P<0.05),而阴性组与空白组间差异无显著性差异(P>0.05);Western Blot法检测结果显示,观察组转移瘤组织内E-cadherin、β-catenin蛋白表达水平显著高于与阴性组及空白组(P<0.05),而N-cadherin及Snail蛋白表达显著低于与阴性组及空白组(P<0.05)。阴性组与空白组转移瘤组织内E-cadherin、β-catenin、N-cadherin及Snail蛋白表达无显著性差异(P>0.05);观察组裸鼠转移瘤细胞上清液中MMP-2及MMP-9水平显著低于与阴性组及空白组(P<0.05),而阴性组与对照组MMP-2及MMP-9水平无显著性差异(P>0.05)。[结论]上调CYB5D2基因可有效抑制乳腺癌皮下移植模型大鼠瘤体生长,推测上调CYB5D2基因可能通过下调N-cadherin、Snail、MMP2及MMP9,上调E-cadherin、β-catenin,逆转EMT,发挥抗肿瘤功效。