基于线粒体COⅠ基因的齿小蠹属昆虫DNA条形码研究

齿小蠹属(鞘翅目:小蠹科)昆虫是植物检疫中经常截获的类群,为探讨线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的特定区段作为DNA条形码快速准确鉴定齿小蠹种类的可行性,以齿小蠹属昆虫为研究对象,测定分析了线粒体COⅠ基因462bp碱基序列。序列分析结果显示:变异位点为259个,保守位点203个,简约信息位点181个,自裔位点78个。所有位点中,A,G,C和T碱基平均含量分别为30.7%,16.5%,17.0%和35.8%。A+T含量较高,为66.5%,明显高于G+C含量,表现明显的A+T碱基偏嗜,且A与T含量相当,符合昆虫线粒体基因碱基组成的基本特征。转换与颠换结果显示:该段序列未达到饱和,可以得到准确的进化分析。利用Kimura2-parameter模型分析遗传距离得到,同物种间的遗传距离介于0.002～0.007之间,不同种间的遗传距离介于0.056～0.431间,平均遗传距离为0.199,说明该段序列能够区分不同物种。基于COⅠ基因序列构建的邻接法系统发育树(NJ树)显示,同一物种聚为同一小支,且分支自展值均为100%;近缘种能聚集在一起,且置信度很高(≥97%)。结果表明应用基于COⅠ基因片段的DNA条形码进行齿小蠹属昆虫分类鉴定具有可行性。

小蠹科昆虫基因组DNA提取方法的比较研究

为探讨小蠹科昆虫基因组DNA的提取方法,分别以单头削尾材小蠹、削尾材小蠹足部肌肉组织以及多年75%酒精浸渍标本为研究对象,采用经典的酚仿抽提法、改良的CTAB法、SDS法及动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒(即磁珠法)4种方法提取小蠹基因组DNA,对提取的基因组DNA进行分光光度值的测定以及COⅠ基因扩增。结果表明:4种方法均可从单头标本中提取总DNA;对于75%酒精浸渍2年的标本,4种方法均适用,大于2年的浸渍标本,仅磁珠法适用,且磁珠法适合微量组织总DNA的提取。

双棘长蠹属的检疫鉴定

长期以来,双棘长蠹的英文和中文资料不但收录的种类少,而且与莱纳的权威著述在有些形态描述上不一致。本文根据莱纳的法文原著,将双棘长蠹属害虫的主要形态特征和38种的检索表结合特征图编译如下,供口岸检疫鉴定和国内林木害虫调查时作参考。

聚合酶链反应及其在植物病毒鉴定中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Re-action 简称 PCR),又称无细胞分子克隆系统或特异性 DNA 序列体外引物定向酶促扩增法,是 Saiki 和 Mullis 等人于1985年首创的一种 DNA 体外扩增技术,被认为是基因扩增技术的一次重大革新。利用该方法可将极微量的靶 DNA 片段在4小时左右特异性地扩增上百万倍,从而大大提高对 DNA 分子的分析和检测能力。

聚合酶链反应(PCR)及其在植物病毒鉴定中的应用

1985年Saiki和Mullis等人首创的聚合酶链反应(PCR)是基因扩增技术的一次重大革新。本文介绍了PCR的基本原理和技术程序——设计引物,选择DNA聚合酶,在PCR仪上进行增扩反应;在植物病毒鉴定上的应用,并展望了该技术的应用前景。

用辐射的方法处理带有天门冬小管蚜的芦笋嫩茎

用感染了天门冬小管蚜 Brachycorynella asparagi(Mordvilko)的芦笋嫩茎来测定γ射线对蚜虫的作用效果。经试验,在温度为20℃条件下(相当于收获时的温度),2龄若虫在5戈瑞的辐射剂量下即可全部被杀死;当剂量大于10戈瑞时,成虫就不能繁殖出活的后代;当剂量达50戈瑞时,成虫大量死亡;剂量在80戈瑞以上,既能阻止4龄若虫蜕皮为成虫,也能阻止成虫繁殖后代。在温度为2.2℃(相当于低温保存温度)条件下,要达到上述效果,必须更大的处理剂量和处理时间(3～6倍)。检疫上,

RFLPs技术在线虫鉴定上的应用

传统的线虫鉴定主要是根据线虫的形态学特征,然而形态学特征受环境条件的影响比较大,有时很难进行判断。分子生物学的发展,为线虫的鉴定提供了很有效的新方法。RFLPs 技术即限制性片段长度多态性分析技术是一种 DNA 诊断技术,DNA 技术具有很高的灵敏度,在形态学鉴定的基础上鉴定线虫特别有价值。

出口饲料类货物中害虫种群及其发生规律研究

本实验从生物学和生态学角度研究了出口饲料中害虫种群构成及其发生规律。结果表明，在饲料货物上共发现了２５种害虫，构成了多层次的害虫种群结构。其中以赤拟谷盗、锈赤扁谷盗、药材甲为最常见种和优势种。害虫发生量随着季节变化而变化，一年的８～１０月为害虫发生高峰期。害虫在货垛不同方位上具有明显的空间分布趋势，害虫种群对品种资源表现了一定的偏爱选择。

溴甲烷与磷化铝混合熏蒸万吨散装粮船的效果

进口万吨散装小麦粮船,一旦感染害虫,繁殖则十分迅速,为从虫口夺粮,粮船抵岸后又不得不实施大轮熏蒸,但效果一直不理想,为攻破熏蒸技术关,笔者从1994～1997年进行了专题研究,连续3年熏蒸了6船24.8万吨粮食。通过试验,摸索出了一套切实可行的熏蒸新技术和新方法。其关键技术:1.溴甲烷与磷化铝分层投药,混合熏蒸;2.封闭埋在粮舱中的投药钢管的顶端,使溴甲烷气体渗透于粮舱深层;3.增压促环流。采用此方法,笔者分别对3万吨级和5万吨级的带虫粮船进行了实施,效果十分理想,3万吨级的粮船熏蒸后,上、中、下层多次取样检查,害虫死亡率为100％;5万吨级的粮船熏蒸后取样检查,上、中层害虫死亡率为100％;下层和底层有少量活虫,但死亡率仍达到90％～98％。本项试验的成功,解决了万吨散装小麦粮船熏蒸技术问题。

单克隆抗体的制备及其在黄化病毒检测中的应用

用甜菜西方黄化病毒(BWYV)免疫的鼠系RBF╱Dn得到了两个可分泌BWYV专化抗体的杂种瘤克隆;用BWYV和马铃薯卷叶病毒(PLRV)共同免疫的另一鼠系(BALB╱C)得到了17个与BWYV和PLRV表现阳性的种瘤以及1个对两种病毒都有表位反应的杂种瘤。用挑选出的对BWYV或PLRV有专化表现的单克隆抗体进行酶联免疫的吸附测试(ELISA法),从而检测黄化病毒株系和分离物。甜菜轻性黄化病毒(BMYV)、芜菁黄化病毒(TuMV)和大麦黄矮病毒(BYDV)的RPV株系等的分离物经检测与BWYV的血清关系很近;而茄黄化病毒(SYV)和其它4种来自马铃薯的分离物被鉴定为PLRV。本试验所有的单克隆抗体与健康植株样品呈阴性反应。

进口鱼粉几个问题的商讨

1989年4月底,我们检查了一条来自秘鲁的鱼粉船,因信用证有“不得带有活虫”的条款,故我植检科派员协同动检科一起检查。在检查中碰到几个有代表性的问题,解决的方法合适与否,现叙述如下,望同仁斧正:1.携带活虫处理方法问题这船鱼粉我们是到锚地检查的,了解情况时,船方出示了鱼粉熏蒸证书。而我们在表层检查时,发现了大量活虫,经室内鉴定为拟白腹皮蠹 Dermestes

储粮害虫对磷化铝的抗性问题

目前,全世界对储粮害虫的处理很大程度上依赖于熏蒸,并且使用的熏蒸剂多为磷化铝。但是,在磷化铝推广使用不久,昆虫对磷化铝的抗性问题就被提了出来。早在1979年,Borah 和 Chahal 报道了谷斑皮蠹 Trogoderma granarium 对磷化铝的抗性问题。

食用菌栽培原料出口检疫问题探讨

食用菌栽培原料出口检疫问题探讨谌运清肖荣堂姜良郎（连云港动植物检疫局２２２０４２）近年来，随着对外贸易的发展，食用菌栽培原料作为一类新的出口创汇商品，出口量迅速增加。以连云港口岸为例，１９９４～１９９６年３年累计出口栽培原料５０００多ｔ，主要品种有棉...

2011—2012年吴江通关点鼠形动物监测结果分析

目的通过对吴江通关点2011—2012年鼠形动物的监测,掌握鼠类的种群构成、密度、季节消长等情况,为制定通关点鼠类控制措施提供参考依据。方法2011—2012年在吴江通关点范围内,采用夹夜法定点、定时、定人、定方法进行密度监测。结果全年共捕获鼠形动物12只,经鉴定隶属2目2科2属2种。结论通过的监测,基本掌握了吴江通关点鼠类本底状况,并通过日常的防制,使其密度得到了有效控制,提高了吴江通关点鼠类监测和防控能力。

输澳木制品检疫处理模式改革与实践思考

根据澳大利亚政府的进境植物检疫法规,所有进境加工木制品均需进行检疫处理。由于传统的检疫处理模式存在一定的局限性,江苏吴江检验检疫部门在确保符合进口国法规的前提下对输澳木制品的检疫处理模式进行改革,在降低了出口贸易成本的同时提升了通关效率,促进了贸易的发展。