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circ_0007841靶向miR-513a-5p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
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作者 肖钟 李文静 王勇 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第7期521-526,共6页
目的:探讨circ_0007841靶向miR-513a-5p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:RT-qPCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞HGC-27以及人胃黏膜细胞GES-1中circ_0007841和miR-513a-5p表达。双荧光素酶报告实验确定circ_0007841和miR-513... 目的:探讨circ_0007841靶向miR-513a-5p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:RT-qPCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞HGC-27以及人胃黏膜细胞GES-1中circ_0007841和miR-513a-5p表达。双荧光素酶报告实验确定circ_0007841和miR-513a-5p相互作用。将HGC-27细胞分为si-NC组、si-circ_0007841组、miR-NC组、miR-513a-5p mimic组、si-circ_0007841+miR-513a-5p Inhibitor组。CCK-8法检测HGC-27细胞存活率;平板克隆实验检测HGC-27细胞克隆形成数;划痕愈合实验和Transwell实验检测HGC-27细胞迁移能力;Transwell实验检测HGC-27细胞侵袭能力。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中circ_0007841相对水平显著升高(P<0.05),miR-513a-5p相对水平显著降低(P<0.05)。与GES-1细胞比较,HGC-27细胞中circ_0007841相对水平显著升高(P<0.05),miR-513a-5p相对水平显著降低(P<0.05)。circ_0007841和miR-513a-5p直接特异性结合。与si-NC组比较,si-circ_0007841组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、迁移数、侵袭数显著降低(P<0.05),miR-513a-5p相对水平显著升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-513a-5p mimic组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、迁移数、侵袭数显著降低(P<0.05)。与si-circ_0007841组比较,si-circ_0007841+miR-513a-5p Inhibitor组HGC-27细胞存活率、克隆形成数、划痕愈合率、迁移数、侵袭数显著升高(P<0.05)。结论:干扰circ_0007841通过靶向上调miR-513a-5p表达来抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 胃肿瘤 circ_0007841 miR-513a-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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沉默circ_0000218靶向miR-140-3p影响皮肤鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为 被引量:2
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作者 李文静 肖钟 +1 位作者 王新 何艳 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2023年第1期1-7,共7页
目的探讨circ_0000218对皮肤鳞状细胞癌(cSCC)细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法收集21例cSCC组织和21例正常皮肤组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测组织中circ_0000218和微小RNA-140-3p(miR-140-3p)表达。体外培养c... 目的探讨circ_0000218对皮肤鳞状细胞癌(cSCC)细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法收集21例cSCC组织和21例正常皮肤组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测组织中circ_0000218和微小RNA-140-3p(miR-140-3p)表达。体外培养cSCC SCL-1细胞,分别转染si-circ_0000218、miR-140-3p mimics、共转染si-circ_0000218与anti-miR-140-3p后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中活化的胱天蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000218和miR-140-3p调控关系。结果cSCC组织中circ_0000218表达量高于正常皮肤组织(P<0.05),而miR-140-3p表达量低于正常皮肤组织(P<0.05);转染si-circ_0000218或miR-140-3p mimics后,cSCC SCL-1细胞光密度(OD)值、集落形成数及划痕愈合率降低(P<0.05),而凋亡率和细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达量升高(P<0.05)。circ_0000218靶向负调控miR-140-3p。与转染si-circ_0000218的SCL-1细胞比较,共转染si-circ_0000218与anti-miR-140-3p的SCL-1细胞OD值、集落形成数及划痕愈合率升高(P<0.05),而凋亡率和细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达量降低(P<0.05)。结论circ_0000218在cSCC组织中呈高表达,其可能通过靶向抑制miR-140-3p促进cSCC细胞增殖和迁移,而阻碍细胞凋亡,有可能成为cSCC治疗的分子靶点。 展开更多
关键词 皮肤鳞状细胞癌 circ_0000218 微小RNA-140-3p 细胞增殖 凋亡 迁移
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两种人工肛门括约肌节制排便效果的比较 被引量:3
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作者 肖钟 黄宗海 +2 位作者 史福军 陈飞 郭雄波 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第4期431-433,共3页
通过新西兰兔结肠实验,比较圆柱形和L形人工肛门括约肌节制排便的效果。分别向套囊内注入0.5、1.0、1.5、2.0 ml水,然后向肠管内注入生理盐水直至远端出现渗漏,记录渗漏时的套囊压力和肠管压力。结果显示,相同注水量下L形括约肌压力低... 通过新西兰兔结肠实验,比较圆柱形和L形人工肛门括约肌节制排便的效果。分别向套囊内注入0.5、1.0、1.5、2.0 ml水,然后向肠管内注入生理盐水直至远端出现渗漏,记录渗漏时的套囊压力和肠管压力。结果显示,相同注水量下L形括约肌压力低于圆柱形括约肌,其节制肠管的渗漏压高于圆柱形括约肌,差异有统计学意义(P<0.05)。表明两种人工肛门括约肌均能有效地节制排便,L形人工肛门括约肌节制排便效果优于圆柱形人工肛门括约肌。 展开更多
关键词 人工肛门括约肌 节制排便 肠管约束压 压力换能 人体工程学
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生物反馈式人工肛门感知系统的研制及效果 被引量:1
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作者 肖钟 黄宗海 +3 位作者 史福军 陈飞 郭雄波 林晓华 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第5期894-901,共8页
背景:人工肛门为治疗肛门失禁开辟了一条新的思路,然而现有的人工肛门没有感知和反馈功能。患者只能通过习惯而不是肠内容物的实际情况排便。因此人工肛门感知和反馈系统的研制是亟待解决的问题。目的:研制能感知和反馈肠内容物量和压... 背景:人工肛门为治疗肛门失禁开辟了一条新的思路,然而现有的人工肛门没有感知和反馈功能。患者只能通过习惯而不是肠内容物的实际情况排便。因此人工肛门感知和反馈系统的研制是亟待解决的问题。目的:研制能感知和反馈肠内容物量和压力变化的人工肛门感知系统。方法:通过实验分别向20只新西兰兔近结肠远端10cm肠管内注入不同体积的模拟气体、液体、半流体、固体肠内容物,并测量肠管和压力感应套囊的压力变化,分析4种状态肠内容物体积与肠管压力和压力感应套囊压力的关系。结果与结论:实验结果表明,肠管内压力和套囊压力随肠内容物体积的增加而增大,套囊压力与肠内容物体积和肠管压力在一定范围内成正相关。通过实验证实,该生物反馈式人工肛门感知系统能有效的反映肠内容物的多少和肠内压的变化,是解决人工肛门感知和反馈的有效策略,为生物反馈式智能人工肛门的研制打下基础。 展开更多
关键词 器官移植 移植与免疫 肛门失禁 人工肛门括约肌 压力感应套囊 压力传感器 生物反馈 智能人工肛门 肠内容物 肠管压力 组织构建 组织工程 省级基金 器官移植图片文章
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外科手术机器人的研究进展及临床应用 被引量:13
5
作者 肖钟 黄宗海 《中国现代普通外科进展》 CAS 2011年第11期880-884,共5页
手术机器人是近年发展起来的计算机辅助内窥镜手术器械控制系统。手术机器人的出现使外科手术模式发生了革命性的变化。由于其突出的优越性,受到越来越多的关注,现已逐渐推广应用于临床各科疾病的诊治,并取得了良好的社会和经济效益。... 手术机器人是近年发展起来的计算机辅助内窥镜手术器械控制系统。手术机器人的出现使外科手术模式发生了革命性的变化。由于其突出的优越性,受到越来越多的关注,现已逐渐推广应用于临床各科疾病的诊治,并取得了良好的社会和经济效益。本文就近年来国内外手术机器人系统的研究进展和临床应用现状作一简要综述,对外科手术机器人的优势、局限性和存在的缺陷进行总结,并对未来外科手术机器人的发展方向进行预测。 展开更多
关键词 外科手术 机器人 计算机辅助外科 微创外科
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原位智能人工肛门的研制及其作用观察
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作者 肖钟 黄宗海 +3 位作者 史福军 陈飞 郭雄波 林晓华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1362-1365,共4页
目的:研制一种具有生物反馈功能并符合人体工程学原理的原位人工肛门并观察其节制排便的效果。方法:通过新西兰兔结肠离体和在体实验,向肠管内注入生理盐水模拟大便的形成,观察人工肛门括约肌压力反馈和节制排便的效果。结果:反馈套囊... 目的:研制一种具有生物反馈功能并符合人体工程学原理的原位人工肛门并观察其节制排便的效果。方法:通过新西兰兔结肠离体和在体实验,向肠管内注入生理盐水模拟大便的形成,观察人工肛门括约肌压力反馈和节制排便的效果。结果:反馈套囊的压力与肠内容物体积和肠管压力在一定范围内成正相关,人工肛门压力反馈系统能有效地反映肠内压的变化;L形人工肛门括约肌在单片机的调控下可以有效地节制排便。结论:该原位智能人工肛门能有效节制排便并准确地反馈肠内压。 展开更多
关键词 人工肛门括约肌 节制排便 肠管约束压 压力传感 人体工程学
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新型复合生物抗菌敷料的抗菌强度、吸湿能力及细胞毒性 被引量:13
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作者 林晓华 黎志超 +5 位作者 俞金龙 肖钟 邹兆伟 黄宗海 王晓东 莫小慧 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第16期2905-2912,共8页
背景:细菌感染是影响伤口愈合的主要因素之一,伤口渗出液里含有的大量炎症因子、蛋白酶和自由基都会减缓伤口的愈合速度。新型复合生物抗菌敷料的研发对治疗外科感染伤口有重要的意义,是创伤敷料发展的必然趋势。目的:观察添加纳米银的... 背景:细菌感染是影响伤口愈合的主要因素之一,伤口渗出液里含有的大量炎症因子、蛋白酶和自由基都会减缓伤口的愈合速度。新型复合生物抗菌敷料的研发对治疗外科感染伤口有重要的意义,是创伤敷料发展的必然趋势。目的:观察添加纳米银的海藻酸钙敷料的抗菌活性、吸湿能力及细胞毒性。方法:将纳米银材料添加到海藻酸钙中制备新型复合生物抗菌敷料,并通过使用平板计数法、MTT法、电子显微镜观察法观察敷料的抗菌活性、吸湿能力及细胞毒性,再与银离子海藻酸钙敷料和海藻酸钙敷料进行对比,以期显示出新型复合生物抗菌敷料的具有强抗菌性及低细胞毒性的优势。结果与结论:与银离子海藻酸钙敷料和海藻酸钙敷料相比,添加纳米银的新型复合生物抗菌敷料对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌均有更强的抑菌作用(P<0.01),细胞毒性较低(P<0.01);3种敷料的吸湿能力差异无显著性意义。证实此添加纳米银的海藻酸钙敷料的具有强抗菌性及低细胞毒性。 展开更多
关键词 生物材料 生物材料与药物控释 新型生物敷料 纳米银 海藻酸纤维 抗菌 吸湿 细胞毒性 扫描电子显微镜
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高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在胃癌中的表达及其与E-cadherin、Galectin-3的关系 被引量:9
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作者 杨雅莹 李艳青 +2 位作者 易永芬 何婷婷 肖钟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1313-1317,共5页
目的:探讨胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)、E-cadherin、Galectin-3的表达及其与胃癌发生发展的关系。方法:应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃黏膜组织中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的表达情况。结... 目的:探讨胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)、E-cadherin、Galectin-3的表达及其与胃癌发生发展的关系。方法:应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃黏膜组织中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的表达情况。结果:65例胃癌中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为85%(55/65)、40%(26/65)、74%(48/65)。20例胃正常切缘中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为50%(10/20)、100%(20/20)、40%(8/20)。GMⅡ、Galectin-3在浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显高于浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。而E-cadherin则在分化程度低,浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显低于分化程度高,浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。统计学分析GMⅡ与E-cadherin之间呈负相关(P<0.05),与Galectin-3无相关性(P>0.05)。结论:GMⅡ、Galectin-3在胃癌中高表达,且与癌组织的浸润和转移明显相关。同时GMⅡ与E-cadherin呈负相关,提示GMⅡ可能通过下调E-cadherin的表达来促进胃癌的发展。 展开更多
关键词 胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ E-CADHERIN GALECTIN-3 胃癌 免疫组化
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穴位注射治疗胃手术后胃瘫综合征疗效观察 被引量:8
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作者 李艳 范晓萍 +3 位作者 郭雄波 魏杨辉 肖钟 余璟玮 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期113-114,共2页
目的了解穴位注射对胃手术后胃瘫综合征的疗效。方法将33例胃手术后胃瘫综合征患者按随机数字表随机分成对照组16例和治疗组17例,对照组接受常规治疗和肌肉注射,治疗组在常规治疗基础上行穴位注射,比较两组的恢复情况。结果治疗组肠鸣... 目的了解穴位注射对胃手术后胃瘫综合征的疗效。方法将33例胃手术后胃瘫综合征患者按随机数字表随机分成对照组16例和治疗组17例,对照组接受常规治疗和肌肉注射,治疗组在常规治疗基础上行穴位注射,比较两组的恢复情况。结果治疗组肠鸣音恢复时间〔(9.06±3.61)d比(16.94±5.27)d〕和胃功能恢复时间〔(10.12±3.89)d比(17.69±5.76)d〕均短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在常规治疗的基础上采用穴位注射治疗胃瘫综合征操作简单,效果良好。 展开更多
关键词 胃瘫综合征 穴位注射 治疗效果
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“三镜”联合保胆取石及胆囊切除术治疗胆囊结石合并胆总管结石疗效比较 被引量:24
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作者 陈勇 肖钟 +2 位作者 邓如兵 吴寻 巫全伟 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第25期2812-2814,共3页
目的 比较“三镜”(十二指肠镜、腹腔镜及术中胆道镜)联合保胆取石术(LRCL)及胆囊切除术(LC)治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床效果。方法 将86例确诊为胆囊结石合并胆总管结石患者按患者治疗意愿及病情分为保胆组40例及胆囊切除... 目的 比较“三镜”(十二指肠镜、腹腔镜及术中胆道镜)联合保胆取石术(LRCL)及胆囊切除术(LC)治疗胆囊结石合并胆总管结石的临床效果。方法 将86例确诊为胆囊结石合并胆总管结石患者按患者治疗意愿及病情分为保胆组40例及胆囊切除组46例,2组均先进行内镜下胰胆管造影术(ERCP)治疗,放置鼻胆管引流(ENBD),然后进行腹腔镜下胆总管切开、胆道镜取石、胆总管Ⅰ期缝合术,之后保胆组行LRCL,胆囊切除组行LC术。比较2组手术时间、术中出血量、手术并发症及住院时间和近远期生存质量。结果 保胆组手术成功率95%(38/40),结石取净率100%;术后未发生胆漏、出血、急性胆囊炎、急性胰腺炎、继发性胆总管结石及切口感染等并发症;术后随访3-40个月,超声检查与正常胆囊超声相吻合,无结石复发,未发现腹胀腹泻等消化道症状,无胆囊癌、结肠癌发生。胆囊切除组手术成功率100%,无中转开腹手术者,无严重手术并发症发生;术后随访3-40个月,出现不同程度腹胀腹泻等消化道症状。结论 “三镜”联合LRCL是腔镜技术较成熟的医院治疗胆囊结石并胆总管结石的优选方法,既能清除胆囊及胆总管的结石,又能保留胆囊及其功能,是一种值得推荐的安全有效的手术方式。 展开更多
关键词 ERCP 胆囊结石 胆总管结石 腹腔镜 胆道镜 保胆取石术
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反射型超声传感器对肠内容物判断的初步研究 被引量:1
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作者 郭雄波 黄宗海 +3 位作者 蔡肯 李建国 肖钟 李艳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第11期1374-1376,共3页
利用TCT40-18FS-1.2B探测仪改装的超声传感器分别测量20只新西兰兔结肠远端肠管内气体、固体、流体和空虚状态4种情况,分析不同状态肠内容物所测得的电压值是否存在差异。结果显示,结肠内气体、固体、流体和空虚状态所测得的电压信号变... 利用TCT40-18FS-1.2B探测仪改装的超声传感器分别测量20只新西兰兔结肠远端肠管内气体、固体、流体和空虚状态4种情况,分析不同状态肠内容物所测得的电压值是否存在差异。结果显示,结肠内气体、固体、流体和空虚状态所测得的电压信号变化差异有统计学意义(P<0.01);两两比较各不同状态之间电压值差异有统计学意义(P<0.01);4种不同状态所测得信号强度之间存在"空白区域"。 展开更多
关键词 超声波 肠内容物 传感器
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基于OMI卫星遥感数据的中国对流层NO2时空分布 被引量:56
12
作者 王跃启 江洪 +3 位作者 张秀英 周国模 余树全 肖钟 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期932-937,共6页
基于2004年11月—2008年1月OMI卫星对流层NO2的垂直柱浓度数据,对我国8个自然地理分区对流层NO2垂直柱浓度的年均值、月均值的分布进行了分析,依据月均值变化建立正弦曲线拟合模型,依据该模型定量分析了各自然区对流层NO2垂直柱浓度的... 基于2004年11月—2008年1月OMI卫星对流层NO2的垂直柱浓度数据,对我国8个自然地理分区对流层NO2垂直柱浓度的年均值、月均值的分布进行了分析,依据月均值变化建立正弦曲线拟合模型,依据该模型定量分析了各自然区对流层NO2垂直柱浓度的变化趋势、变化周期和变化幅度等特征.结果表明:拟合模型可较好地反映我国8个自然区对流层NO2垂直柱浓度的变化特征;证明了人类活动影响了对流层NO2垂直柱浓度的分布及其变化,这种影响主要体现在对流层NO2垂直柱浓度的高低、变化的周期性以及增长趋势等方面. 展开更多
关键词 OMI NO2垂直柱浓度 变化趋势 周期 幅度 自然区
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擎起一片音乐天空——记青年词曲作者吕磊
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作者 肖钟 《北方音乐》 1998年第1期30-30,共1页
跟吕磊通采访电话的时候,他刚从长影回到哈尔滨的家中,他的坦诚和热情富于感染力,即使身处严冬也能让人感受到一种阳春三月的和煦。善交挚友的他从小生长在一个艺术氛围浓郁的家庭,儿少时代可以说是用琴、书、笔、纸堆砌成的。三岁画马... 跟吕磊通采访电话的时候,他刚从长影回到哈尔滨的家中,他的坦诚和热情富于感染力,即使身处严冬也能让人感受到一种阳春三月的和煦。善交挚友的他从小生长在一个艺术氛围浓郁的家庭,儿少时代可以说是用琴、书、笔、纸堆砌成的。三岁画马无师自通,七岁做诗开始发表于报纸杂志,而从小到大登台放歌更是他习以为常的展现自我的方式,上进心激励着他成长。 展开更多
关键词 艺术氛围 报纸杂志 天空 家庭 歌手 电视剧音乐 青年 感染力 习以为常 晚会
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有碍人类健康的习惯
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作者 肖钟 《生命与灾害》 2003年第2期16-17,共2页
在日常生活中,人们往往忽视了这些不良习惯,久而久之,对人的健康十分不利。你看:起床先叠被人体本身也是一个污染源。在一夜的睡眠中,人体的皮肤会排出大量的水蒸气,使被子不同程度地受潮。人的呼吸和分布全身的毛孔所排出的化学物质有... 在日常生活中,人们往往忽视了这些不良习惯,久而久之,对人的健康十分不利。你看:起床先叠被人体本身也是一个污染源。在一夜的睡眠中,人体的皮肤会排出大量的水蒸气,使被子不同程度地受潮。人的呼吸和分布全身的毛孔所排出的化学物质有145种,从汗液中蒸发的化学物质有151种。被子吸收或吸附水分和气体,如不让其散发出去, 展开更多
关键词 化学物质 皮肤 有害物质 不良习惯 污染源 吸附水分 水蒸气 日常生活 人体 新陈代谢
全文增补中
一个神甫的间谍生涯
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作者 肖钟 《国家安全通讯》 1999年第11期28-35,共2页
关键词 联邦调查局 神甫 罗马天主教 战略情报 间谍活动 北平和平解放 通用汽车公司 帝国主义 解放战争 调查员
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生意模式的抉择
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作者 肖钟 《新营销》 2011年第7期42-43,共2页
德鲁克说,管理者首先要确认的是生意的方向,其次才是工作方法。那么,企业该如何确定自己的生意方向呢?又该选择什么样的生意模式呢? 做海参、鲍鱼生意,很容易让人误以为赚取的是暴利。事实上是怎样一种情景呢?如果你是餐饮供货... 德鲁克说,管理者首先要确认的是生意的方向,其次才是工作方法。那么,企业该如何确定自己的生意方向呢?又该选择什么样的生意模式呢? 做海参、鲍鱼生意,很容易让人误以为赚取的是暴利。事实上是怎样一种情景呢?如果你是餐饮供货商,养殖商和酒店的上下游双重挤压会让你的毛利空间最多达到300%,除去给酒店总厨的回扣,再除去自己的人员及运费等开支,你所剩无几。 展开更多
关键词 生意模式 德鲁克 管理者 供货商 酒店 企业 暴利 餐饮
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肝癌及癌旁肝组织的高尔基体差异蛋白质分析 被引量:1
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作者 肖钟 易永芬 +1 位作者 何婷婷 李艳青 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期23-26,共4页
目的 筛选并鉴定肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组中差异表达的蛋白质,从高尔基体层面解释肝癌的发生和发展机制,为早期诊断和抗癌药物的研发提供线索。方法应用亚细胞比较蛋白质组学研究方法,比较分析肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋... 目的 筛选并鉴定肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组中差异表达的蛋白质,从高尔基体层面解释肝癌的发生和发展机制,为早期诊断和抗癌药物的研发提供线索。方法应用亚细胞比较蛋白质组学研究方法,比较分析肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组。收集肝癌患者手术切除的癌组织和癌旁肝组织标本,蔗糖密度梯度离心法分离高尔基体。建立并优化两种组织高尔基体的双向电泳方法,用PDQuest软件分析差异表达的蛋白质点,然后用质谱仪获取相应蛋白点的肽质指纹图谱,联网到SwissProt蛋白质组数据库鉴定获得的差异蛋白质点,最后用Westernblot验证双向电泳结果。蛋白质相对表达量的比较采用配对t检验。结果获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳银染图谱。与癌旁肝组织相比,肝癌高尔基体蛋白质组有包括膜联蛋白5在内的27个蛋白质位点表达上调,包括染色体修饰蛋白2b在内的20个蛋白质位点表达下调,初步鉴定出了其中17个蛋白质,并用Westernblot从蛋白质水平上验证了双向凝胶电泳结果。结论肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组具有不同的蛋白质位点,这些差异表达的蛋白质涉及到细胞的能量代谢、肿瘤的侵袭和转移,细胞周期调控等方面,为进一步阐释高尔基体在肿瘤的发生和发展中所起的作用提供了有价值的信息。 展开更多
关键词 高尔基器 肝细胞 蛋白质组 电泳 凝胶 双向 光谱法 质量 基质辅 助激光解析电离
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胃癌细胞高尔基体的蛋白质组学技术平台的建立 被引量:3
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作者 何婷婷 易永芬 +1 位作者 李艳青 肖钟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期27-31,共5页
采用蔗糖密度梯度超速离心法分离纯化高尔基体,双向凝胶电泳(2-DE)分离高尔基体蛋白质,用ImageMaster 2D软件分析所得图谱,基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI—TOF MS)鉴定蛋白质点等一系列亚细胞器蛋白质组学方法建立胃癌细胞... 采用蔗糖密度梯度超速离心法分离纯化高尔基体,双向凝胶电泳(2-DE)分离高尔基体蛋白质,用ImageMaster 2D软件分析所得图谱,基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI—TOF MS)鉴定蛋白质点等一系列亚细胞器蛋白质组学方法建立胃癌细胞内高尔基体的蛋白图谱。结果显示分离出的纯度较高的高尔基体建立了分辨率和重复性均较好的双向电泳图谱,运用质谱技术鉴定出12个蛋白质,包括蛋白合成相关蛋白、膜融合蛋白、调节蛋白、凋亡相关蛋白、运输蛋白、细胞增殖分化相关蛋白。通过亚细胞器分离纯化,双向电泳的蛋白分离及MALDI-TOF MS蛋白鉴定分析,首次成功建立了胃癌细胞SGC7901中高尔基体的蛋白质组学技术路线,为胃癌细胞内高尔基体功能的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胃癌细胞 高尔基体 亚细胞器蛋白质组学 亚细胞器分离
原文传递
SGC7901胃癌细胞株中高尔基体的分离及鉴定
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作者 何婷婷 易永芬 +1 位作者 李艳青 肖钟 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1085-1088,共4页
高尔基体作为主要的分泌细胞器,其功能复杂。从细胞内分离出纯度较高的高尔基体有利于对其功能的深入研究。通过胃癌细胞SGC7901的大量体外培养,差速离心结合蔗糖密度梯度离心法纯化分离出高尔基体后,电镜及中性红超活染色进行形态学鉴... 高尔基体作为主要的分泌细胞器,其功能复杂。从细胞内分离出纯度较高的高尔基体有利于对其功能的深入研究。通过胃癌细胞SGC7901的大量体外培养,差速离心结合蔗糖密度梯度离心法纯化分离出高尔基体后,电镜及中性红超活染色进行形态学鉴定,高尔基体标志酶半乳糖基转移酶Galse及硫胺素焦磷酸酶TPPase活性测定进行纯度分析,首次从胃癌细胞SGC7901内成功分离出纯度较高的高尔基体,为对高尔基体功能的深入研究奠定基础。 展开更多
关键词 高尔基体 胃癌细胞 亚细胞器分离 蔗糖密度梯度离心
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鼠肝高尔基体双向凝胶电泳的建立
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作者 李艳青 易永芬 +1 位作者 何婷婷 肖钟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期310-312,共3页
目的分离纯化鼠肝高尔基体,初步建立一套相对完善、分辨率和重复性均较高的高尔基体双向凝胶电泳技术。方法应用蔗糖密度梯度超离心法分离纯化高尔基体,通过电镜观察和标志酶分析鉴定其形态及纯度,双向凝胶电泳分离高尔基体蛋白质,用PDQ... 目的分离纯化鼠肝高尔基体,初步建立一套相对完善、分辨率和重复性均较高的高尔基体双向凝胶电泳技术。方法应用蔗糖密度梯度超离心法分离纯化高尔基体,通过电镜观察和标志酶分析鉴定其形态及纯度,双向凝胶电泳分离高尔基体蛋白质,用PDQuest8.0软件分析电泳图谱。结果电镜观察显示大部分为高尔基体,纯化高尔基体标志酶TPP酶比活力提高了120倍,得到了分辨率和重复性均较好的双向凝胶电泳图谱。结论已成功建立了鼠肝高尔基体双向凝胶电泳技术。 展开更多
关键词 鼠肝 高尔基体 双向凝胶电泳
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