多黏菌素耐药mcr基因的研究进展

多黏菌素是治疗多重耐药革兰氏阴性菌感染的“最后一道防线”,然而质粒介导的多黏菌素抗性基因mcr-1及其变异体在全球传播,给畜牧业健康发展和人类公共卫生安全带来了严重挑战。文章综述了mcr-1基因的发现、结构和流行情况,mcr-1基因变异体、流行特征以及防治策略等的研究进展,以期为相关科研人员和临床工作者提供参考,共同应对抗生素耐药日益严峻的局面。

一株奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌短尾噬菌体的分离及其生物学特性分析

以实验室保存的奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌为宿主菌,从新疆石河子地区奶牛场粪便和污水中分离纯化裂解性噬菌体,并对其生物学特性进行分析,为奶牛乳房炎的噬菌体防治提供材料,并通过噬菌斑、透射电子显微镜观察,测定其最佳感染复数、噬菌谱、热稳定性、pH稳定性、生长曲线等特性进行分析。结果显示:分离到1株裂解性噬菌体P42,噬菌斑呈透亮无晕环的圆形,透射电镜观察形态为短尾噬菌体;目前此噬菌体只能裂解其宿主菌,最佳感染复数为0.001;60℃20 min时活性丧失,且在pH4.0~9.0时,噬菌体P42的活性没有明显的变化;感染宿主菌的潜伏期是10 min,暴发期为140 min,裂解量约为126 PFU/cell。本研究分离筛选到的噬菌体P42是一株裂解性短尾科噬菌体,其裂解效果较好,繁殖迅速,为奶牛乳房炎的噬菌体防治及其制剂的研发提供了参考。

禽流感的防治

禽流感是威胁家禽养殖的重要病毒之一,主要由A型流感病毒感染所引发;病原主要通过消化道、呼吸道、体表伤口、密切接触和医用媒介传播,传播速度快,病死率高;防治本病必须加强动物群的管理和人员的管理,做好疫病监测和防控工作,防止疫情扩散而遭受更大损失。

动物传染病课程实践教学改革的探索与思考

本文提出构建课程实验、生产实习、科研训练为一体的＂三段式＂教学体系,推动动物传染病课程实践教学改革,并就具体的改革措施展开探讨,希望对动物传染病学实践教学有所帮助。

牛病毒性腹泻病毒E^rns多表位蛋白的设计及验证

利用生物信息学方法分析牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E^rns蛋白,筛选出优势B淋巴细胞(简称B细胞)和T淋巴细胞(简称T细胞)表位组装成多表位蛋白,并在大肠埃希菌中进行表达和验证。首先从NCBI GenBank数据库获得E^rns蛋白的氨基酸序列,将所得到的序列进行理化性质、跨膜结构域、亚细胞定位、磷酸化、酰基化位点分析,预测二级结构及二硫键的位置,使用4种B细胞和2种T细胞软件预测其抗原表位,将预测的表位进行筛选并组装成多表位疫苗,进行密码子优化确保其在大肠埃希菌中高效表达,最后进行蛋白的纯化和Western blot验证。结果显示,E^rns蛋白由227个氨基酸残基组成,分子质量约为26 ku,理论等电点8.62,化学式为C1131H1768N326O335S14,不稳定系数为29.98,亲水性平均值(GRAVY)和脂肪指数分别-0.529和71.37,在大肠埃希菌体内半衰期大于10 h,不具有跨膜结构域,主要定位在细胞质中,有21个翻译后修饰(PTM)位点;在E^rns蛋白的二级结构中,α螺旋占约36.12%,β折叠占约18.06%,β转角占约7.93%,无规卷曲占约37.89%,而且具有4个二硫键。将筛选出的5个B细胞和6个T细胞优势表位用柔性linker组装成多表位疫苗,Western blot结果显示多表位蛋白对BVDV阳性血清具有良好的反应原性,为牛病毒性腹泻病毒E^rns多表位蛋白后续的研究奠定了基础。

鸡新城疫病的防治

鸡新城疫病是养鸡临床常见的病毒性疾病,主要通过消化道、呼吸道和密切接触方式传染,也能通过种蛋垂直传播;病毒毒株种类较多,不同毒株毒力表现不同,但血清型目前只有一种,鸡日龄越小,发病后临床表现越严重;生产过程中可采取控制传染源、切断传播途径和免疫易感鸡群的措施来防治本病。

新疆部分地区牛病毒性腹泻的流行病学调查

为调查新疆部分地区规模化牛养殖场牛病毒(BVDV)性腹泻病毒的感染情况,本试验采用RT-PCR方法对640份牛全血进行牛病毒性腹泻病毒检测,并对检测基因序列进行分析及同源性比较。结果表明:各地区牛养殖场BVDV阳性检出率为22.5%~62.5%,平均总阳性率为40.0%(256/640),不同年龄段牛群感染BVDV的平均阳性率为22.5%(27/120)。将目的片段克隆至T载体,经测序获得5株BVDV部分基因序列,与预期的大小一致为288 bp。根据同源性分析表明,本研究的5株克隆毒株序列之间的同源性为98.3%~99.7%。遗传演化分析可知,本研究获得的毒株在同一簇,与中国北京株BVDV1a亚型归为同一簇,亲缘关系比较接近,但与BVDV2型、BVDV3型的遗传关系较远。研究结果表明,新疆地区BVDV普遍存在,经测序核苷酸序列之间的同源性较高,遗传关系较接近,该结果为新疆地区牛病毒性腹泻病毒病的防控工作奠定基础。

新疆艾比湖野鸟H1N2亚型禽流感病毒的分离鉴定及全基因组序列分析

旨在调查野鸟中存在的禽流感病毒,并为禽流感的防制提供依据。采集新疆艾比湖自然保护区野鸟的粪便棉拭子进行禽流感病毒的分离与鉴定,将PCR产物进行纯化后用T载体连接并转化到DH5α细胞中;菌液PCR鉴定后将目的菌液送至上海生工测序并比对测序结果,在NCBI上进行基因序列分析。结果显示,从新疆艾比湖自然保护区野鸟的粪便棉拭子分离得到1株H1N2亚型禽流感病毒;经序列分析得知,该毒株为1株低致病性禽流感病毒,且存在与多种亚型病毒的重配现象。