程序性细胞死亡因子-1在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨程序性细胞死亡因子-1(PD-1)在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用与机制。方法将30只SD大鼠随机分成对照组、再灌注2 h组、再灌注6 h组、再灌注24 h组、再灌注72 h组,每组6只。采用左肺门全夹闭法造肺缺血再灌注模型。各组取左肺组织。计算肺组织湿干重比值(W/D);用HE染色法和电镜观察肺组织病理学变化;采用ELISA法检测肺组织IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10水平;采用Western Blot法检测肺组织PD-1表达;采用免疫组化法检测肺组织CD11c、CD16、CD206、Arg1的表达。结果与对照组比,肺缺血再灌注2 h组开始有肺损伤,包括肺组织形态学和微结构的改变,肺损伤评分升高,再灌注6 h组损伤最严重,而后损伤程度逐渐减轻(P <0.05)。与对照组比,各实验组肺组织IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10水平升高(P <0.05);其中,IL-1、IL-6、IL-10于再灌注6 h组达到高峰;IL-4于再灌注24 h组达到高峰。Western Blot显示,与对照组比,各实验组PD-1表达增高(P <0.05);其中再灌注6 h组表达最高。免疫组化显示,与对照组比,肺组织CD11c、CD16、CD206、Arg1在再灌注6 h组表达增高(P <0.05);与再灌注6 h组比,再灌注72 h组表达降低(P <0.05)。结论 PD-1可能参与了大鼠肺缺血再灌注损伤的发生,其机制可能与PD-1介导的肺巨噬细胞极化导致的炎症反应有关。

乌司他丁调控P38 MAPK信号通路降低大鼠肺缺血再灌注损伤血气屏障通透性的作用及机制研究

目的:研究乌司他丁对肺缺血再灌注损伤(LIRI)大鼠的保护作用及作用机制。方法:将24只SD大鼠随机分为4组,即正常通气组、生理盐水组、LIRI组和乌司他丁+LIRI组,每组6只。采用苏木精—伊红(HE)染色法评价缺血再灌注后肺组织的损伤程度,通过检测肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白浓度、伊文思蓝漏出量及肺组织中紧密连接蛋白-1(ZO-1)表达评估肺血气屏障通透性,Western blotting法检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)的表达。结果:与正常通气组和生理盐水组比较,LIRI组肺组织形态学和微结构发生明显改变,肺损伤评分明显升高(P<0.05),肺血气屏障通透性明显增强(P<0.05),p-p38 MAPK的表达水平显著增高(P<0.05)。给予乌司他丁预处理后,肺组织形态学和微结构发生明显改善,肺损伤评分明显降低,肺血气屏障通透性明显减弱,p-p38 MAPK表达水平明显下降(P<0.05)。正常通气组与生理盐水组各指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:乌司他丁可减轻LIRI,降低肺血气屏障通透性,其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路有关。

颊针疗法对妇科腹腔镜手术患者术后内脏痛的影响及机制研究

目的本文旨在观察颊针疗法对妇科腹腔镜手术患者术后内脏痛的影响及机制。方法选取我院2020年1月至2022年3月收治妇科腹腔镜手术180例患者为研究对象,将患者依据随机数字表法分三组,A组纳入术后不做任何处理组、B组纳入术后立刻给予舒芬太尼镇痛组、C组纳入术后立刻取双侧“三焦穴”进行颊针疗法治疗组,观察三组患者疼痛情况、并发症发生率、干预前后血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、血浆5-羟色胺(5-HT)水平。结果术后即时患者疼痛(VAS)评分,A组、B组、C组比对,差异无统计学意义(P>0.05);镇痛干预后,B组、C组VAS评分明显下降,低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,C组、A组并发症发生率明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。麻醉手术前0.5 h、术后即时、术后干预1 h,A组、B组、C组NE、5-HT水平比对,差异无统计学意义(P>0.05);术后干预2 h、6 h、24 h后,B组、C组NE、5-HT水平低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论妇科腹腔镜手术患者术后内脏痛干预中,可以采用颊针疗法,以有效改善患者疼痛症状,确保患者安全,还可有效改善NE、5-HT水平,可推广应用。

地塞米松调控PI3K/AKT通路减轻肺缺血/再灌注损伤的作用及机制

目的:探讨地塞米松对大鼠肺缺血/再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其作用机制。方法:实验一:按随机数字表法将24只SD大鼠分成正常通气组(N组)、生理盐水组(NS组)、LIRI组和地塞米松+LIRI组(DEX组),每组6只。用血管夹夹闭左肺肺门1 h、再灌注2 h建立大鼠LIRI模型;DEX组于再灌注前5 min经尾静脉给予地塞米松3 mg/kg,NS组注射等量生理盐水;N组不予任何处理。各组于再灌注后2 h处死大鼠取左肺组织,测定肺湿/干重比值(W/D),苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变并评估损伤程度,电镜下观察肺组织超微结构改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6)水平,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)表达。实验二:应用磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路抑制剂LY294002进行干预,以进一步探讨地塞米松减轻LIRI导致肺组织损伤的作用机制。另取24只大鼠,按随机数字表法分为N组、LIRI组、DEX组、地塞米松+LY294002+LIRI组(LY组),每组6只。除LY组外,其他组均按实验一方法进行制模及干预,LY组于给予等量地塞米松后尾静脉注射LY2940020.3 mg/kg。采用免疫组化法检测肺组织中M1型巨噬细胞极化标志物CD11c、CD16以及M2型巨噬细胞极化标志物CD206、Arg1的表达。结果:①实验一:与N组比较,LIRI组肺组织形态学和超微结构发生明显改变,肺病理学评分、肺W/D比值及TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高,p-AKT表达明显下降。与LIRI组比较,DEX组肺组织形态学和超微结构改变明显改善,肺病理学评分降低(分:5.00±0.89比8.83±0.75),肺W/D比值及TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显下降〔肺W/D比值:6.25±0.56比8.27±0.72,TNF-α(ng/L):93.28±16.42比205.90±25.30,IL-1β(ng/L):130.10±10.81比209.10±19.20,IL-6(ng/L):195.80±21.17比310.50±20.77〕,p-AKT表达明显升高〔p-AKT/AKT:(57.58±8.80)%比(36.62±9.25)%〕,差异均有统计学意义(均P<0.05)。而NS组各指标与N组比较差异均无统计学意义。②实验二:与N组比较,LIRI组巨噬细胞极化标志物CD11c、CD16、CD206、Arg1表达均明显升高。与LIRI组相比,DEX组CD11c、CD16表达明显降低,CD206、Arg1表达明显增加。而给予PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002干预后可明显阻断地塞米松对LIRI介导的巨噬细胞极化的影响〔CD11c免疫组化评分(分):7.20±0.36比5.00±0.34,CD16免疫组化评分(分):8.20±0.48比7.40±0.64,CD206免疫组化评分(分):5.80±0.59比7.40±0.28,Arg1免疫组化评分(分):7.20±0.72比8.80±0.48,均P<0.05〕。结论:地塞米松预处理可减轻LIRI导致的大鼠肺内炎症反应和肺组织损伤,其作用机制与地塞米松激活PI3K/AKT通路进而改变肺巨噬细胞极化方向有关。