蜂蜡防治急性酒精性胃溃疡的实验研究

目的:探讨蜂蜡对急性酒精性胃溃疡的保护作用。方法:大鼠灌胃给予绝对酒精获得急性胃溃疡模型,在造模前后给予三水平剂量蜂蜡药液进行干预,观察大鼠的胃黏液总量、溃疡范围,并进行病理检查。结果:蜂蜡能够明显减轻模型大鼠胃组织的病理损伤,降低胃黏膜溃疡面积,增加胃黏液分泌量,保护胃黏膜。结论:蜂蜡对急性酒精性胃溃疡有较好的保护作用。

温肾降浊散对大鼠阳离子化牛血清白蛋白肾小球肾炎模型的影响

目的:观察温肾降浊散对大鼠阳离子化牛血清白蛋白(Cationic bovine serum albumin,C-BSA)肾小球肾炎模型的影响。方法:随机选取10只为正常对照组,其余大鼠制备C-BSA肾小球肾炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型对照组9只、雷公藤多苷治疗组8只、温肾降浊散高剂量组7只和温肾降浊散低剂量组9只。温肾降浊散高剂量组给予3.3 g·(kg·d)-1混悬液灌胃,低剂量组给予0.33 g·(kg·d)-1混悬液灌胃,每日1次。雷公藤多苷治疗组给予10 g·(kg·d)-1混悬液灌胃,每日1次。正常对照组和模型对照组灌胃给予等量蒸馏水,至实验第63天。取大鼠全血和尿液标本,分别做24 h尿蛋白定量、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(serum creatinine,Scr)、三酰甘油(three acyl glycerin,TG)、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)及低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein,LDL-C)的测定。结果:与正常对照组比较,模型对照组24 h尿蛋白、Scr、TC、TG、BUN和LDL均升高,其中24 h尿蛋白、Scr、TC和TG具有显著性差异(P<0.05),BUN、LDL无显著性差异(P>0.05)。与模型对照组比较,雷公藤多苷治疗组、温肾降浊散高剂量组及低剂量组24 h尿蛋白、Scr、TC、TG、BUN、LDL均降低,其中24 h尿蛋白、Scr、TC、TG具有显著性差异(P<0.05),BUN、LDL无显著性差异(P>0.05)。与雷公藤多苷治疗组比较,温肾降浊散高剂量组及低剂量组各指标均无显著性差异(P>0.05),作用与雷公藤多苷相当。结论:温肾降浊散对大鼠C-BSA肾小球肾炎模型有较好的治疗作用。

普通高中音乐特长班的管理初探

高中音乐特长班是由高中音乐特长生组成的班级,是普通高中班级类型的一种,其学生专业、特点、班级文化建设与班级管理等内容与普通高中班级大不相同,考上音乐类高等院校或高等学府艺术专业是这一类学生的普遍追求。因此,高中教师在辅助管理音乐特长班时应及时转变自己的理念,致力于达到高中音乐特长生的统一管理,协同发展音乐特长生的文化水平与专业水平,促进音乐特长生的全面发展。本文以普通高中音乐特长班展开研究,简单分析了当前高中音乐特长班的管理现状,并就其管理策略展开阐述,以期为相关研究提供一些见解。

补骨脂素对人皮肤成纤维细胞衰老相关基因的调控作用

目的研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响。方法以雌二醇为阳性对照,采用MTT法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol·L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基因Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)mRNA表达水平的影响。结果补骨脂素中剂量组的作用与雌二醇相似,能使ESF-1细胞的增殖明显提高,同时使ColⅠ、ColⅢ、T I M P-1、TIMP-2 mRNA的表达水平显著增强,MMP-1 mRNA的表达水平显著降低。结论补骨脂素具有促E S F-1细胞增殖的作用,可促进胶原蛋白合成,提示其具有潜在的抗皮肤衰老作用。

补骨脂素对中波紫外线导致人皮肤HaCaT细胞光老化的保护作用

目的:研究补骨脂素对中波紫外线(UVB)导致人皮肤HaCaT细胞光老化的保护作用及其作用机制。方法:选择不同浓度的补骨脂素,MTT法筛选药物的浓度;使用中波紫外线(UVB)照射永生化的HaCaT细胞建立UVB光老化模型;使用三种不同浓度的补骨脂素处理光老化模型,MTT法检测细胞的增殖及氧化试剂盒检测细胞中氧化酶的活性。RT-PCR及Western Blot分别检测JNK和白介素-8(IL-8)mRNA及蛋白表达量。结果:与空白组相比,10^(-7)mol/L、10^(-6)mol/L、10^(-5)mol/L补骨脂素组对HaCaT具有无明显的增殖作用(P>0.05);与模型组相比,10^(-7)mol/L、10^(-6)mol/L、10^(-5)mol/L补骨脂素组对HaCaT具有无明显的增殖作用(P>0.05),但是10^(-7)mol/L、10^(-6)mol/L、10^(-5)mol/L补骨脂素组SOD、GSH、CAT活性升高(P<0.01),细胞JNK、IL-8 mRNA表达量均降低(P<0.01),细胞JNK、IL-8蛋白表达量均降低(P<0.05或P<0.01)。结论:补骨脂素能够显著的保护HaCaT细胞的光老化,其机制可能与增强抗氧化酶活性,及抑制JNK信号通路,减少炎症因子的分泌有关。

甘草次酸和甘草甜素雌激素样作用研究

目的探讨甘草次酸和甘草甜素两种三萜类成分的雌激素样作用,为开发新的活性植物雌激素成分奠定基础。方法采用溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法观察两种三萜成分对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖的影响,Western Blot法和半定量RT-PCR法测定两种三萜成分对MCF-7细胞ER亚型蛋白及mRNA表达的影响。实验数据(±s)采用SPSS 23.0进行统计分析,基于单因素方差分析的方法,组间比较用SNK法和LSD法。结果 100μmol/L和10μmol/L甘草甜素能够抑制MCF-7细胞的增殖;100μmol/L、1μmol/L和10-2μmol/L甘草次酸能够促进MCF-7细胞的增殖;10μmol/L的甘草次酸可诱导MCF-7细胞ERα、ERβ蛋白表达,mRNA表达均显著升高(P<0.05);加入1×10^(-7)μmol/L的雌激素受体拮抗剂ICI182780均能抑制甘草次酸的以上效应。结论甘草次酸具有促进MCF-7细胞增殖作用,其作用机制可能是上调MCF-7细胞ERα、ERβ基因和蛋白的表达,显示有雌激素样作用,且其雌激素样作用可能是ER介导产生的。抗雌激素样作用的甘草甜素的作用机制还有待于深入研究。

白桦脂醇对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及相关蛋白酶基因的调控机制研究

目的研究自桦脂醇对人皮肤成纤维细胞（ESF-1）相关抗衰老基因mRNA的调控作用，探讨白桦脂醇对皮肤皱纹的修复机制。方法将细胞分为空白对照组，雌二醇组，白桦脂醇高、中、低剂量组。采用MTT法测定各组细胞活力，RT-PCR法测定各组细胞中I型及Ⅲ型胶原蛋白（collagen，Col）、基质金属蛋白酶抑制剂（tissueinhibitors of matrix metalloproteinase，TIMP）1和2、基质金属蛋白酶1（matrix metallo Droteinase1，MMP-1）mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较，雌二醇组与白桦脂醇中剂量组细胞增殖率[（0．455±0．037）、（0．445±0．040）比（0．385±0．601）]增高（P〈0．05）；ColImRNA[（0．960±0．012）、（O．929±0．015）比（0．842±0．014）]，ColIIImRNA[（0．892±0．009）、（0．824±0．022）比（O．768±0．025）]、TIMP．1mRNA[（0．938±0．026）、（0．878±0．035）比（0．796±0．022）]、TIMP-2mRNAl（0．557±0．025）、（0．506±0．036）比（0．436±0．063）]表达水平均升高（P〈0．01）。结论白桦脂醇通过促进细胞增殖，提高Col合成及相关蛋白酶的表达等途径发挥对皱纹的修复作用。

松脂醇二葡萄糖苷对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白分泌机制的研究

目的观察松脂醇二葡萄糖苷（pinoresinol diglucoside，PDG）对人皮肤成纤维细胞ESF．1细胞胶原蛋白分泌的基因调控作用，探讨PDG对烧伤皮肤的修复机制。方法体外培养细胞按随机数字表法分为空白组，雌二醇组，PDG高、中、低剂量组。PDG高、中、低剂量组分别加入100、10、1μmol／L的PDG溶液，雌二醇组加入100μmol／L的雌二醇。采用MTT法检测细胞增殖活性。采用RT-PCR技术测定细胞中I型胶原蛋白（collagenI，ColI）、III型胶原蛋白（Col III）、组织金属蛋白酶抑制剂（tissueinhibitors of matrix metalloproteinase，TIMP）-1、TIMP-2、MMP．1mRNA表达水平。结果与空白组比较，雌二醇组、PDG中剂量组ESF-1细胞增殖率[（0．559±0．027）、（0．552±0．034）比（0．489±0．027）]升高护〈0．05）；雌二醇组与PDG中、低剂量组细胞ColI[（0．958±0．021）、（0．929±0．031）、（0．916±0．015）比（0．844±0．022）]、Col III[（0．783±0．038）、（0．918±0．021）、（0．855±0．017）比（0．678±0．024）]、TIMP-1[（0．939±0．025）、（0．889±0．036）、（0．853-0．015）比（0．780±0．023）]、TIMP-2[（0．507±0．024）、（0．655±0．037）、（0．572±0．025）比（0．405±0．062）]mRNA表达水平升高（P〈0．05或P〈0．01），MMP-1[（0．3434-0．038）、（0．4074-0．046）、（0．435±0．037）比（0．519±0．041）]mRNA表达水平下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论PDG可提高ESF-1细胞的增殖活性，促进相关胶原蛋白和TIMP的表达，抑制MMP的表达，减少胶原的降解，从而发挥修复烧伤皮肤的作用。

大黄酚及P38阻断剂对紫外线诱导人永生化表皮细胞光老化的影响及机制研究

目的 研究大黄酚及P38阻断剂SB203580抑制中波紫外线诱导的人永生化表皮细胞（HaCaT immortalizedhuman epidermal cells,HaCaT）光老化的作用及其作用机制.方法 采用MTT法检测不同浓度的大黄酚及SB203580对HaCaT细胞增殖的影响;将细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、大黄酚组、P38阻断剂组.培养24 h后,大黄酚组及P38阻断剂组分别加入10-6 mol/L大黄酚及10-7 mol/L SB203580溶液.继续培养24 h,除空白组外,其他各组细胞于紫外灯下照射,照射强度0.61 mW/cm2,照射时间7 min,照射距离10 cm.继续培养24 h后,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性;Western Blot检测各组细胞中P38、磷酸化P38（P-P38）、TNF-α 及IL-6蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组HaCaT细胞增殖率降低（P〈0.01）;与模型组比较,大黄酚组及P38阻断剂组HaCaT细胞增殖率升高（P〈0.01）;与模型组比较,大黄酚组及P38阻断剂组细胞P-P38[（0.419±0.029）、（0.398±0.015）比（0.497±0.051）]、TNF-α[（0.435±0.025）、（0.411±0.021）比（0.509±0.040）]及IL-6[（0.457±0.027）、（0.432±0.018）比（0.478±0.036）]蛋白表达降低（P〈0.01）.结论 大黄酚及SB203580可抑制紫外线诱导的HaCaT细胞光老化,其作用机制可能与抑制P38MAPK通路及炎症因子表达有关.

染料木素对人胚皮肤成纤维细胞胶原、基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制剂mRNA表达的影响

目的：探讨染料木素对人胚皮肤成纤维细胞（CCC-ESF-1）胶原（collagen, Col）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）和基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitors of matrix metalloproteinase, TIMP）mRNA表达的影响。方法体外培养的CCC-ESF-1细胞按随机数字表法分为空白对照组、雌二醇组以及染料木素小、中、大剂量组。采用MTT法检测细胞活力，RT-PCR技术检测ColⅠ、ColⅢ、MMP-1、TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达。结果与空白对照组比较，雌二醇组、染料木素中剂量组[（0.451±0.037）、（0.446±0.047）比（0.385±0.061）]均可促进CCC-ESF-1细胞增殖（P均＜0.05），且雌二醇组、染料木素中剂量组细胞 ColⅠ[（0.960±0.012）、（0.929±0.015）比（0.812±0.014）]，Col Ⅲ[（0.892±0.009）、（0.824±0.022）比（0.768±0.025）]、TIMP-1[（0.841±0.023）、（0.838±0.053）比（0.751±0.027）]、TIMP-2[（0.456±0.017）、（0.448±0.036）比（0.381±0.029）]mRNA 水平较空白组增高（P 均＜0.01），MMP-1[（0.398±0.043）、（0.402±0.044）比（0.525±0.006）]mRNA水平较空白组降低（P均＜0.01）。结论染料木素可促进 CCC-ESF-1细胞增殖，可能与上调 ColⅠ、Col Ⅲ、MMP-1、TIMP-1、TIMP-2以及下调MMP-1有关。

柚皮素对Aβ25-35损伤PC12细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响

目的:探讨柚皮素对β淀粉样蛋白(Aβ)25-35损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响及其与雌激素受体(ER)及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的关系。方法:采用Aβ25-35干预PC12细胞制备损伤模型。实验分为空白组、模型组、柚皮素(400,40,4,0.4,0.04,4×10-3,4×10-4,4×10-5μmol·L-1)组、阳性药雌二醇(E2)(1 nmol·L-1)+Aβ25-35组、柚皮素(0.4,0.04,4×10-3,4×10-4,4×10-5μmol·L-1)+Aβ25-35组,E2+Aβ25-35+ER拮抗剂(ICI182780)(1μmol·L-1)组,柚皮素+Aβ25-35+ICI182780组,E2+Aβ25-35+PI3K阻断剂(LY294002)(50μmol·L-1)组、柚皮素+Aβ25-35+LY294002组。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)作为荧光探针检测细胞中总活性氧(ROS)含量,硫代巴比妥酸(TBA)法和氧化酶法分别检测细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中磷酸化Tau蛋白/总Tau蛋白(p-Tau/t-Tau)的表达。结果:根据MTT实验结果,筛选0.4μmol·L-1为柚皮素最佳有效浓度;与空白组比较,模型组细胞增殖率显著降低(P<0.01),与模型组比较,柚皮素+Aβ25-35组细胞增殖率显著升高(P<0.01)。此外,与空白组比较,模型组细胞中ROS,MDA的含量及p-Tau/t-Tau表达显著升高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01),与模型组比较,柚皮素+Aβ25-35组细胞中ROS,MDA的含量及p-Tau/t-Tau表达显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.01),与柚皮素+Aβ25-35组比较,ICI182780,LY294002的加入显著逆转了柚皮素在上述指标中的作用(P<0.01)。柚皮素的作用效果与E2相似。结论:柚皮素可提高细胞增殖率,对Aβ25-35损伤PC12细胞有保护作用,其作用可能是通过激活ER及PI3K/Akt信号通路降低Aβ25-35损伤PC12细胞中ROS,MDA含量及p-Tau/t-Tau表达、促进SOD活性来实现的。