实验性脑出血大鼠脑组织NF-κB的表达及意义

目的 探讨大鼠实验性脑出血后脑组织NF -κB (nuclearfactor-kappaB)的表达规律及意义。 方法 成年雄性SD大鼠随机分为脑出血组 (4 2只 )和假手术组 (6只 )。脑出血组又分为 1h、 3h、 6h、 2 4h、 4 8h、 72h、7d 7个亚组 ,每亚组 6只。应用干 -湿重法观察脑水肿规律、HE染色观察血肿周围炎性细胞浸润 ,免疫组化方法观察NF -κB表达。结果 脑出血组血肿周围炎细胞浸润在 6h出现 ,4 8h达高峰 ,并持续到 7d。NF -κB阳性细胞于术后 1h开始增多 ,4 8h达高峰 ,并持续到 7d。假手术组未见血肿及明显炎细胞浸润 ,可见少量NF -κB阳性细胞。结论 脑出血大鼠脑内NF

NF-κB与脑血管疾病

脑血管疾病(cerebrovascular diseases,CVD)是神经系统常见病和多发病,核转录因子(Nuclear factor-κB,NF-κB)广泛存在于真核细胞内,有资料表明核转录因子NF-κB可通过调控多种基因的转录而参与脑血管病的病理生理过程.现综述如下:

脑出血后的神经细胞凋亡机制及治疗策略

脑出血后神经细胞死亡的机制复杂。最近的研究表明 ,凋亡机制参与了脑出血后神经细胞的死亡。血液凝固时凝血酶的释放、血肿成分及其降解产物的毒性作用 ,以及血肿周围的炎症反应等是引起神经细胞凋亡的主要原因。探讨细胞凋亡的始动因素 ,可为脑出血寻找新的治疗策略。

IL-6表达在实验性大鼠脑出血继发性神经元损伤及脑水肿中的作用

目的 探讨IL- 6表达在大鼠脑出血后继发性脑损伤及脑水肿中的作用。方法 将 2 4只SD大鼠随机分为脑出血组和假手术组 ,利用立体定向技术建立大鼠不抗凝自体尾动脉血脑出血模型 (5 0 μl中等量脑出血 ) ,于脑出血后 6h、 2 4h、 4 8h、 72h处死大鼠 ,进行脑含水量测定、免疫组化染色及Nissl染色 ,并对结果进行统计学处理。结果 大鼠脑出血后脑水肿于 4 8h达到高峰 ,与对照组比较有统计学意义 (P <0 0 5 )。大鼠脑组织表达IL - 6也于 4 8h达到高峰 ,明显高于对照组 (P <0 0 1) ;血肿周围及海马的未受损神经元数在 72h时最少 ,明显低于对照组 (P <0 0 1)。结论 大鼠脑出血后脑组织高表达IL - 6参与了脑水肿形成和继发性神经元损伤。

实验性脑出血大鼠脑组织血管内皮生长因子的表达及意义

目的 探讨实验性脑出血大鼠脑组织血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及其意义。方法 应用立体定向技术于大鼠尾壳核注射自体尾动脉血建立大鼠脑出血模型 ,动态观察组织病理学改变 ,动态观察脑组织含水量 ,免疫组织化学染色显示脑出血后VEGF在脑组织内的表达。结果 大鼠脑出血后脑含水量于 2 4h开始明显升高 ,4 8h达高峰并持续到 72h ,与病灶对侧及假手术组比较有统计学意义 ;脑出血后脑内VEGF阳性细胞数随时间逐渐增多 ,以2 4h ,4 8h,72h最为显著 ,7d时呈现血管样结构。结论 脑出血后脑内VEGF的表达与脑水肿相关 ,且VEGF可促进血肿周围组织的血管增生 。

实验性脑出血大鼠脑水肿变化规律及其行为学改变

目的 研究大鼠脑出血后脑水肿的变化规律和脑水肿对行为学的影响。方法 应用立体定向技术 ,用大鼠自体尾动脉不抗凝动脉血液 5 0 μl缓慢注入大鼠尾壳核 ,制成中等量脑出血 ,动态观察脑水肿的变化规律和脑水肿对其行为学的影响 ,脑水肿的测定应用干 /湿重法 ,行为学评分采用Longa评分法、肢体对称试验评分法、Berderson评分法和平衡木评分法。结果 脑出血血肿周围组织含水量与对照组间差别有显著性意义 ,出血侧脑组织含水量与出血对侧脑组织含水量间差别有显著性意义 ,以出血后 4 8～ 72h最明显 ,至脑出血后第 7d大致恢复正常。 4 8h出血侧脑组织含水量为 (79 4 9± 0 2 5 ) %,出血对侧为 (78 33± 0 0 3) %;72h出血侧为 (78 4 7± 0 2 7) %,出血对侧为(77 97± 0 2 5 ) %;假手术组手术侧为 (77 6 9± 0 38) %,手术对侧为 (77 11%± 1 12 ) %。大鼠脑出血后其行为学改变以出血后 72h内最明显 ,至脑出血后第 7d大致恢复正常 ,与脑水肿的规律一致。结论 大鼠脑出血后脑水肿规律和行为学改变一致 ,提示脑出血后脑水肿是导致病情加重的主要原因之一。

大鼠自体动脉血脑出血动物模型的建立

目的:建立大鼠自体动脉血液脑出血模型,研究脑出血后大鼠行为学改变、脑水肿的变化规律。方法:参照Yang、Lee及Hua等方法,应用立体定向技术,用大鼠自体尾动脉不抗凝动脉血液50μl缓慢注入大鼠尾状核,制成中等量脑出血,通过动脉观察其行为学改变和脑水肿的变化规律建立稳定的脑出血动物模型。结果:对32只大鼠脑出血动物模型采用Longa评分法、肢体对称试验评分法、Berderson评分法和平衡木评分法进行评分,结果显示,大鼠脑出血后其行为学改变与对照组有显著性差异。脑出血周围组织含水量明显高于对照组,病变侧高于病变对侧脑组织,以出血后48～72h最明显。结论:大鼠自体动脉血脑出血后有一系列的行为学改变,其行为学改变能够反映脑血肿对神经功能影响的严重程度和病情的轻重,大鼠自体动脉血脑出血动物模型是比较理想的实验性脑出血模型。

实验性大鼠脑梗死后脑组织环氧合酶-2的表达及意义

目的探讨实验性大鼠大脑中动脉梗死(MACO)后脑组织环氧合酶-2(COX-2)的表达及其意义。方法参照一定方法制成MCAO模型,动态观察组织病理学改变及脑组织含水量的变化,免疫组织化学染色显示脑梗死后COX-2在脑组织内的表达。结果大鼠脑梗死后24 h脑含水量升高,48 h达高峰并持续到72 h,与病变对侧及假手术组间差别有显著性意义(P<0.05);脑组织COX-2阳性细胞数于脑梗死后6 h增多,以梗死后24 h最为显著,梗死后7 d阳性细胞明显减少。阳性细胞见于病变侧额、顶部大脑皮质、扣带回皮质中细胞形态完整的神经元、海马区神经元及血管内皮细胞,而胶质细胞无表达。结论COX-2主要由缺血半暗带的神经元和血管内皮细胞表达,其高表达可能与脑梗死后继发性神经元损伤及脑水肿有关。

实验性脑出血大鼠血肿周围补体C_3表达的动态观察

目的 探讨补体激活在脑出血后脑水肿形成中的作用。方法 雄性SD大鼠 4 8只 ,随机分为假手术组和脑出血组。立体定向注血制作脑出血动物模型 ,在手术后 6h、 12h、 2 4h、 4 8h、 72h、 7d分别处死动物 ,干湿重法测量脑含水量 ,免疫组化法测量血肿周围补体C3 阳性细胞数 ,观察血肿周围炎细胞浸润情况。结果 血肿周围补体C3 表达于 6h开始增多 ,72h达到高峰 ,7d仍高于假手术组 ,血肿周围炎细胞浸润和脑水肿也于出血后 4 8～ 72h达到高峰 ,提示补体C3 表达与炎细胞浸润及脑水肿有关。结论 补体C3 参与了脑出血后脑水肿的形成。

脑心通对大鼠局灶性脑缺血脑组织补体C3的影响

目的:探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后脑组织补体C3表达的影响。方法:参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组、生理盐水组、大剂量脑心通组、中剂量脑心通组、小剂量脑心通组,分别给予不同剂量药物,于术后6h,24h,48h,72h和7d进行神经功能评分(NDS),处死后取脑组织观察脑含水量的变化,病理切片HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定补体C3的动态变化。结果:脑心通治疗组的神经功能评分均降低,病理损伤均减轻,大、中剂量脑心通组治疗后脑水肿明显减轻(P<0.05),补体C3的表达明显减少(P<0.05)。结论:脑心通可能通过减轻脑水肿,降低脑内补体C3的表达对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。

实验性大鼠脑梗死后脑水肿规律及行为学改变

目的:探讨实验性脑梗死(cerebralinfarction,CI)后脑水肿规律和大鼠行为学改变,以指导临床脱水降颅压药物的应用。方法:参照Langa等方法制成大脑中动脉梗死模型,于术后6h、24h、48h、72h和7d采用Longa评分法、肢体对称试验评分法、Berderson评分法和平衡木评分法等4种方法进行行为学评分,并动态观察其脑含水量的变化规律。结果:对60只大鼠的研究结果显示,CI后脑组织含水量明显高于对照组,病变侧高于病变对侧,脑水肿以CI后24-72h最明显,高峰时间在CI后48h,第7d基本恢复正常。大鼠行为学改变与脑水肿的变化趋势相一致,也以CI后48h最明显。结论:大鼠CI后脑水肿规律为24-72h最明显,高峰时间在梗死后48h,7d基本恢复正常,CI后脑水肿规律与神经功能缺损的严重程度一致。

脑心通对实验性脑梗死大鼠脑组织IL-6的影响

目的:探讨脑心通对实验性脑梗死大鼠脑组织中IL一6水平的影响。方法:参照Longa等方法制成大脑中动脉梗死(MCAO)模型,应用干一湿重法观察脑含水量变化、HE染色观察梗死周围炎性细胞浸润、免疫组化方法观察脑组织中lL一6的表达。研究不同剂量脑心通对脑梗死后大鼠行为学评分.脑含水量及脑组织中炎性细胞因子lL一6表达的影响。结果:脑梗死组织周围炎细胞浸润和IL一6阳性细胞表达于梗死后6h开始增多,48h达高峰,并持续到7d。脑心通治疗组大鼠脑梗死后脑水肿减轻,行为学评分降低,脑组织中IL一6阳性细胞减少,大、中剂量脑心通治疗组效果较为显著。结论:脑心通有抑制炎性细胞因子IL_6的过度表达,保护神经元,减轻脑水肿的作用。

实验性脑出血血肿周围MMP-9的表达与脑水肿的关系

目的 动态观察MMP- 9在脑出血动物模型脑组织中的表达 ,探讨MMP - 9与脑水肿的关系。方法 应用脑立体定向技术 ,建立大鼠脑出血模型 ,假手术作为对照组。分别测定脑组织含水量 ,观察血肿周围MMP - 9的表达规律。结果 术后 2 4～ 72h脑水肿形成和MMP - 9表达高峰 ,与假手术组比较差别有显著性意义。结论 脑出血后大鼠脑水肿形成和MMP - 9高表达在时间同步。MMP- 9高表达是致脑水肿的关键物质。

脑心通对实验性脑梗死大鼠行为学和脑组织NF-κB影响的量效分析

目的:研究不同剂量脑心通对实验性脑梗死大鼠神经功能障碍、脑水肿及脑组织中炎性细胞因子NF-κB表达的影响。方法:实验于2004-03/11在河北医科大学神经内科实验室进行,取成年健康雄性SD大鼠150只,制备大脑中动脉梗死模型,造模手术完毕后,将大鼠随机分为5组,即脑心通大剂量(4g/kg)组、中剂量(2g/kg)组、小剂量(1g/kg)组、生理盐水和假手术组(假手术组为4k造模组),各组又分为6,24,48,72h,7d5个亚组,每亚组均为6只大鼠。脑心通各剂量组均为灌胃给药,生理盐水组给同体积的生理盐水,于相应时间点进行行为学评分后处死动物快速取脑,应用干-湿重法观察脑含水量变化、苏木精-伊红染色观察梗死周围炎性细胞浸润、免疫组织化学方法观察脑组织中NF-κB表达。结果:150只大鼠经补充进入结果分析。①造模后大鼠手术对侧肢体存在不同程度瘫痪,术后48和72h时神经功能缺损最为明显,7d时神经功能基本恢复正常。②除假手术组外,其余各组在脑梗死后6h局部可见少量散在炎性细胞浸润;梗死后48h,炎性细胞浸润明显增多;并持续到7d。③与假手术组相比,其他各组NF-κB阳性细胞表达在各时间段均增加,梗死后6h开始增多,48h达高峰。脑心通大剂量组术后24,48h脑组织中NF-κB阳性细胞[(13.8±2.49)个,(21.0±3.16)个],比脑心通中剂量组[(21.0±3.54)个,(29.2±3.11)个]、脑心通小剂量组[(21.0±3.99),(31.2±2.59)个]和生理盐水组减少[(21.4±3.97)个,(33.8±1.30)]个表达明显(P<0.05)]。④与假手术组相比,其他各组脑组织含水量在各时间段均增加。术后24,48h脑含水量脑心通大剂量组[(78.95±1.36)%,(79.44±1.01)%]与脑心通中剂量组[(79.03±0.87)%,(80.46±1.54)%],明显低于同期的脑心通小剂量组[(79.21±0.68)%,(82.02±1.76)%]和生理盐水组[(79.30±1.11)%,(82.68±0.91)%P<0.05]。结论:脑心通干预可改善脑梗死大鼠的神经功能抑制炎性细胞因子NF-κB的表达,减轻脑水肿,保护神经元,其功能改善程度与脑心通剂量成正相关。

甘油果糖对人RBC、大鼠RBC的作用及输液安全性的研究

目的:探讨甘油果糖注射液(Glycerol and Fructose Injection)对人红细胞(Red blood cell,RBC),大鼠RBC的作用及对大鼠输液安全性的研究,以指导临床应用。方法:以40例健康成人RBC、32只sD大鼠RBC为研究对象,进行体外溶血试验;以72只SD大鼠为研究对象,进行输液安全性研究,研究组为甘油果糖注射液,对照组为生理盐水注射液,应用改良酸化甘油溶解实验测定甘油果糖注射液对人RBC和大鼠RBC的溶解程度,应用邻-甲联苯胺氧化显色法测定甘油果糖注射液对上清液游离血红蛋白(Hemoglbin,HB)含量的影响。同时测定研究组和对照组大鼠血浆游离HB、蛋白非结合胆红素(间接胆红素)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肌酐的含量,以对甘油果糖注射液安全性进行研究。结果:体外试验为甘油果糖注射液对人RBC和大鼠RBC的溶解程度与生理盐水相似,对上清液游离HB含量无明显影响。对大鼠给予甘油果糖注射液和生理盐水,最快输液速度6ml/min和最大输液量30ml/kg/d,24小时后测定大鼠血浆游离HB、蛋白非结合胆红素、BUN、肌酐的含量,两组结果相似。结论:甘油果糖注射液在体外对人RBC和大鼠RBC无明显溶解作用。在大鼠体内也没有发现有溶血作用,对肾脏功能影响与生理盐水相似。

实验性脑梗死后脑组织单核细胞趋化蛋白-1的表达及意义

目的探讨实验性脑梗死大鼠脑组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及其意义。方法将健康雄性SD大鼠42只随机分为假手术组和脑梗死组。参照longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,于术后6 h、24 h、48 h、72 h、7 d分别处死动物,检测脑组织的含水量,病理切片HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定MCP-1的阳性细胞数。结果脑梗死后脑组织MCP-1表达于6 h开始增多,24 h达到高峰,48 h仍高于假手术组,7 d明显减少,与梗死灶周围单核/小胶质细胞浸润及脑水肿变化规律基本一致。结论脑梗死后脑内MCP-1的表达与脑水肿形成有关,且促进了单核巨噬细胞的聚集和小胶质细胞的活化,其参与了脑缺血损伤后的炎症免疫反应。

大鼠脑出血继发性脑损伤及脑水肿中补体受体2型的作用

目的:探讨补体受体2型在实验性大鼠脑出血后继发性脑损伤及脑水肿中的作用。方法:实验于2003-07/2004-10在河北医科大学第二医院神经内科实验室进行。60只SD大鼠随机分为脑出血后6,24,48,72h,7d及假手术6组。应用脑立体定向技术建立大鼠中等量(50μL)自体动脉血脑出血模型,分别对脑出血组及假手术组大鼠进行动态行为学评分,观察脑损伤程度;用干-湿重法行脑含水量测定;用免疫组织化学染色观察炎性细胞浸润;用单克隆补体受体2型抗体检测病灶周围脑组织补体受体2型表达。结果:大鼠脑出血后脑水肿、炎性细胞浸润均于48h达到高峰,补体受体2型的表达高峰为24～48h,即补体受体2型表达与脑水肿及脑损伤存在时间上相关,且与假手术组相比有显著性差异。结论:补体受体2型在脑出血后脑组织损伤和脑水肿的形成中起到了一定的作用,为脑细胞功能保护早期干预措施提供了实验学数据。

实验性脑出血大鼠血肿周围不同时间点组织形态学的动态变化

目的:研究大鼠实验性脑出血各病变期间炎症、水肿、神经元改变及胶质增生等因素的动态变化特征。方法:实验于2003-06/2004-06在河北医科大学第二医院神经内科实验室完成。用24只SD大鼠,实验组将自体血注入右尾状核,假手术组做对照。取血肿周围脑组织进行光学显微镜观察。结果:血肿周围脑组织内部分神经元变性坏死;出血后6h即可见少数单个散在炎性细胞浸润,48h达高峰,以中性粒细胞为主;72h后可见血肿周围及血肿内胶质细胞、血管增生;7d时血肿明显缩小,胶质细胞及血管增生明显。结论:脑出血后血肿周围炎性细胞浸润,神经元变性、坏死,胶质细胞和血管增生可能是脑水肿加重和病情加重的主要原因之一。

脑心通对局灶性脑缺血大鼠行为学和脑组织肿瘤坏死因子α的影响

目的:探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后行为学及脑组织肿瘤坏死因子α表达的影响。方法:实验于2004-03/11在河北医科大学第二医院神经内科实验室进行。取成年健康雄性SD大鼠150只,制造大鼠局灶性大脑中动脉阻断造模手术后,将大鼠随机分为5组,即脑心通4g/kg组、2g/kg组、1g/kg组、生理盐水和假手术组,各组又分为6,24,48,72h,7d5个亚组,每亚组均为6只大鼠。脑心通各剂量组均为灌胃给药,生理盐水组给同体积的生理盐水,于相应时间点进行行为学评分后处死动物快速取脑,观察脑含水量的变化,病理切片苏木精-伊红染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定肿瘤坏死因子α的动态变化。结果:实验中有8只大鼠死亡,后随机补充,进入结果分析仍为150只大鼠。①行为学评分:大鼠在大脑中动脉阻断后手术对侧肢体存在不同程度瘫痪,在术后48和72h时神经功能缺损最为明显,7d时神经功能基本恢复正常。②病理观察:除假手术组外,其余各组在脑梗死后6h局部可见少量散在炎性细胞浸润;梗死后48h,炎性细胞浸润明显增多;并持续到7d。③脑组织含水量:与假手术组相比,其他各组在各时间段均增加。术后24,48h脑心通4g/kg组为(78.95±1.36)%,(79.44±1.01)%,脑心通2g/kg组为(79.03±0.87)%,(80.46±1.54)%,低于同期的脑心通1g/kg组和生理盐水组[(79.21±0.68)%,(82.02±1.76)%,(79.30±1.11)%,(82.68±0.91)%,P<0.05]。④肿瘤坏死因子α阳性细胞表达:与假手术组相比,其他各组在各时间段均增加,梗死后6h开始增多,48h达高峰。术后24,48h脑心通4g/kg组为(27.6±2.1),(18.4±1.5)个,脑心通2g/kg组为(38.4±2.1),(23.2±3.3)个,低于同期的脑心通1g/kg组和生理盐水组[(50.4±5.6),(30.8±5.3),(52.8±3.7),(33.0±4.7)个,P<0.05]。结论:脑心通可能通过减轻脑水肿,降低脑内肿瘤坏死因子α的表达减少炎性细胞的浸润,从而对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。

脑心通对大鼠局灶性脑缺血脑组织补体C_3的影响

目的探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后脑组织补体C3表达的影响。方法参照Longa等方法制成大鼠局灶性大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组、生理盐水组、大剂量脑心通组、中剂量脑心通组、小剂量脑心通组,分别给予不同剂量药物,于术后6h、24h、48h、72h和7d进行神经功能评分(NDS),处死后取脑组织观察脑含水量的变化,病理切片HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定补体C3的动态变化。结果脑心通治疗组的神经功能评分均降低,病理损伤均减轻,脑心通大、中剂量组治疗后脑水肿明显减轻(P<0.05),补体C3的表达明显减少(P<0.05)。结论脑心通可能通过减轻脑水肿,降低脑内补体C3的表达,对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。