D-半乳糖致衰老大鼠骨髓间充质干细胞的特性

目的:观察D-半乳糖致衰老大鼠骨髓来源的间充质干细胞的形态学及生物学改变。方法:选择SPF级雄性SD大鼠10只,随机分为2组:青年对照组和衰老模型组。衰老模型组大鼠每天用D-半乳糖颈背部皮下注射,剂量为400 mg/kg,连续注射4个月。分别从青年对照组和衰老模型大鼠的骨髓中培养出间充质干细胞(BMSCs)。倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况,流式细胞术(FCM)检测表面抗原,比较两组原代细胞集落形成数量和增殖情况,透射电镜下观察其形态和结构变化。结果:两组体外培养的原代和第3代骨髓间充质干细胞在形态上无差异,早期呈集落样生长。FCM检测显示,两组BMSCs的免疫表型一致,CD29和CD44为阳性表达,CD34和CD45为阴性表达。两组细胞都具有成骨诱导和成脂诱导能力。与青年对照组相比,衰老模型组BMSCs生长速度明显减慢,集落形成能力明显地降低(P<0.05)。透射电镜观察发现,衰老模型组BMSCs呈现衰老的形态和结构变化,核膜内折,细胞质内存在大量空泡,内质网和线粒体增大或肿胀。结论:大鼠骨髓间充质干细胞的增殖随年龄增长而降低;体外培养的衰老模型组骨髓间充质干细胞出现衰老征象。