西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达

【目的】克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG-1)编码区,并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究。【方法】提取西农萨能奶山羊总RNA,反转录cDNA后进行PCR反应,对克隆得到的INSIG-1序列进行生物信息学分析。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测INSIG-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况。【结果】获得西农萨能奶山羊INSIG-1基因1 014bp序列(Gen-Bank登录号JQ665439),其中编码区序列长度为831bp,编码276个氨基酸。西农萨能奶山羊INSIG-1编码区与牛(GenBank登录号NM_001077909)的亲缘关系最近,相似性达97%,编码氨基酸序列的相似性达90%,而与小鼠(GenBank登录号NM_025836)的亲缘关系较远。预测INSIG-1蛋白质分子量为29.70ku,理论等电点为8.99;IN-SIG-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构,且有较强的疏水性,不含信号肽。RT-qPCR检测结果表明,在西农萨能奶山羊10个组织中INSIG-1均有表达,其中在肝脏中的相对表达量最高,皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之,在心脏中的相对表达量最低。【结论】克隆得到了西农萨能奶山羊的INSIG-1基因,并探明了其组织表达规律。

奶山羊LXRα基因shRNA序列的筛选及腺病毒载体的构建与鉴定

【目的】构建针对奶山羊肝脏X受体α(Liver X receptorα,LXRα)基因的干扰腺病毒载体。【方法】根据奶山羊LXRα基因CDS区域设计小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),分别构建pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA及pDsRed1/C1-LXRα载体,共转染HEK 293细胞,48h后观察其荧光蛋白表达量,筛选出具有明显干扰效应的shRNA。将具有明显干扰效应的shRNA载体与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST在LR ClonaseTMⅡ重组酶的作用下进行重组,经氨苄青霉素及氯霉素抗性筛选后获得重组腺病毒载体。将构建好的重组腺病毒载体经PacⅠ酶切线性化并回收后,转染HEK 293细胞,培养7～10d后收集细胞并反复冻融,收集细胞裂解液,反复扩增3次后,获得高滴度的重组腺病毒,测定其病毒滴度。【结果】①设计出了shRNA-490、shRNA-496、shRNA-509和shRNA-923 4条shRNA序列;②得到shRNA-490和shRNA-923 2条具有明显干扰效应的shRNA;③获得pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-490和pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-923 2个重组腺病毒载体,ScaⅠ酶切及测序结果均正确,2个腺病毒重组载体滴度均为5×108 PFU/mL。【结论】奶山羊LXRα基因重组shRNA腺病毒载体构建成功,为利用RNA干扰技术研究LXRα基因在乳腺上皮细胞中的功能奠定了基础。

山羊Ets-1基因cDNA的克隆与序列分析

根据GenBank已收录的牛(Bos taurus)、人(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)等物种Ets-1基因序列的同源保守区域,设计特异性引物,采用RT-PCR和RACE技术,分离并克隆了西农萨能奶山羊(Capra hircus)Ets-1基因的cDNA序列。该序列全长2 263 bp(GenBank登录号HQ589338),包括5'UTR 331 bp,CDS 1 326bp和3'UTR 606 bp,编码441个氨基酸组成的蛋白质。核苷酸序列分析发现,山羊编码序列与牛、猪、人、小鼠等的相应序列同源性分别为98%、94%、92%和90%,3'UTR相应序列为96%、83%、81%和77%,5'UTR相应序列为98%、85%、82%和71%。氨基酸序列分析发现,山羊与牛、猪、人和小鼠的Ets-1的相似性较高,均在95%以上。蛋白质结构分析发现,其蛋白质分子量为50 340.8 D,等电点为5.08,具有典型的螺旋-转角-螺旋结构域,不存在跨膜结构,并且整个序列不含信号肽。

搞好衔接 实现“无缝”——谈中小学教育的衔接

在新课程改革理念的指导下，初中、小学在阶段培养目标、教学方法和评价手段等方面存在着一定的差异，特别是小学取消了升学考试后，暴露了部分小学生进入初中后，在接受新知识、自我管理、学习心态等方面出现了严重的问题。据一些家长、老师的反映，一些孩子在小学学习阶段学习积极性相当高，可是到了中学却出现了厌学情绪，有的孩子在小学的表现是顶呱呱的，可到了中学却时常违规受批评。不少在小学阶段成绩很不错的学生，在进入初中后的测试中暴露出种种问题，

公交战线一对好兄弟——记石河子城市客运交通行业“文明驾驶员”林伟 林辉

林伟、林辉哥俩是石河子市公共交通有限责任公司一公司9路1—141驾驶员和二公司5路线2-58车组驾驶员,提起他们俩,大家都会不约而同地伸出大拇指,夸他们是好党员、好驾驶员。林辉在营运生产上是模范。5路线全长20公里,线路长,站点多,

大西北的种棉大王——记兵团十六“种棉大王”冯立明

今年34岁的冯立明,是兵团农八师一五○团八连的一名普通农工。他坚持年年承包土地,科学种棉,为国家生产优质商品棉。从1992年至1997年的六年间,他办起了初具规模的种植业家庭农场,共为国家生产优质棉1067775公斤,创产值4807887.5元。特别是1997年,冯立明承包905亩棉花,科学种田创高产,亩产363公斤,总产329401公斤,创产值1522915.5元,纯收入527061.9元,上缴利润472953元。是新疆石河子垦区远近闻名的植棉状元和致富能手,1997年被兵团授予"种棉大王"。

石河子公交50辆新能源纯电动公交车上线运营

3月21日,石河子市利用援疆资金3000万元购买的50辆新能源纯电动车上线运营。新上线的50辆新能源纯电动公交车,最明显的优点就是无污染、无噪音、制动平稳等。这批新能源纯电动公交车是公共交通发展向低碳环保绿色节能迈出新的步伐,也为进一步完善公交线路,合理利用城区公共资源,满足群众的出行需求做出了贡献。这批新能源纯电动公交车,车长10.5米,核载73人,配备了投币机、乘车卡刷和微信扫码乘车仪。

石河子公交做好消防工作，迎接党的十九大召开

石河子公交为迎接党的十九大召开，自9月7日以来，组织专人对公司车辆设备设施及油路、气路、电路进行了拉网式调查，发现问题．立即整改，做到一辆车不落。目前．已经更换灭火器1000多个．进行天然气钢瓶检修、检验2860个．消除消防安全隐患6处，增加消防沙堆和蓄水池6处，解决油路、气路、电路问题23处．并对500多名驾驶员、乘务员、站调员进行了专题教育。

风雨四十载,谱写新华章——写在石河子市公共交通有限责任公司成立四十周年之际

四十年蹉跎岁月，四十年风雨同舟；四十年艰苦奋斗，四十年不懈追求。石河子公交从无到有．从小到大．从弱到强。如今．石河子公交已成为石河子垦区经营规模最大、网点分布最广、经营设施最完善的公交客运企业。

石河子公交开展环境卫生大扫除志愿服务活动

3月25～29日，石河子公交五个志愿者服务队和各分公司270多名志愿者开展了“志愿服务进线路、进车组，进停车场——环境卫生大扫除”志愿服务活动，义务打扫公交首末站、枢纽站、停车场和线路公交车辆环境卫生工作。

石河子公交开展安全生产检查活动

12月1～4日，石河子公交组织3个检查小组对533辆公交车，4个停车场，15个站调室，1800个灭火器，2300个天然气钢瓶等重点区域存在安全隐患开展了一次安全生产大排查。开展安全生产大检查工作，进一步增强了城市公共交通运营和驾驶员的安全防范意识，保证安全生产为市民提供安全，正点，方便，快捷的出行条件。

石河子公交开展《安全生产法规》考试

8月3日，石河子公交组织50余名生产技术人员开展《安全生产法规》考试。这次考试是石河子公交为巩固安全生产基础，增强职工掌握《安全生产法规》和专业技能的安全操作意识而举行的。

从细微之处擦亮流动的城市文明窗口

石河子市公交公司致力于城市文明窗口形象的塑造,始终坚持“满意服务、优质服务、文明服务”,在全市率先开展了“公交车文明礼让斑马线”活动,形成了石河子“文明礼让看公交”的文明交通风尚.

石河子公交实现2015年第一季度开门红

石河子公交2015年第一季度安全生产，运营服务和经济运营形势平稳正常。主要线路运营情况良好，租车业务和广告等业务稳中有升，行驶总里程和客运总人次完成计划任务，收入和支出总体平衡，

石河子市公交行业加速转型升级

2月12日，石河子市公交公司召开工作会议．认真落实城市公共交通工作。2014年石河子市交通运输工作要按照“八法工作制”和“交通运输质量效益管理年”活动的要求，积极推进由传统产业向现代服务业转型升级。

纵横石城的流动风景——石河子市公共交通有限责任公司纪略

2000年，通过改制后的石河子公交，旧貌换新颜，从此踏上快速发展的快车道。通过采取一系列措施，规模不断壮大，迈入到智能公交的行列，并以优质服务，大大提升了企业形象。

石河子公交开通两条清明专线

3月22～23日，石河子市南山陵园迎来祭祀小高峰。石河子公交公司为方便市民清明节扫墓、祭祀，正式开通了去往南山陵园、石河子殡仪馆的两条临时公交专线车。两条临时专线共配备了30辆公交车，并根据客流量发车，客流量大时3～5分钟一趟．客流量小时30～50分钟一趟。仅3月22日、23日两天．发往南山陵园的公交车共往返发车69趟，接送扫墓市民6000多人。

石河子公交新车上线

为进一步满足城市发展和市民群众出行需求，11月初，石河子公交本年度新车全部到位，并投入到19路、13路、11路、17路等线路运营。 新车的上线投运，实现了今年公司向市民做出的投入1000多万元购进新车满足今年新开、恢复、延伸、调整公交线路用车的承诺。

石河子市公交线路率先安装电子站牌

8月22日，石河子市北三路公交电子站牌正式投入使用。作为石河子市区主干道，北三路在进行全线改造时，也进行了道路电气化改造，对南北两侧共20个站点的站牌全部进行更换，使北三路成为兵团目前惟一一条全线安装电子站牌的道路。在该路段运行的12路、29路等多条线路的公交车也已经全部安装了车载定位系统，最近车辆距离、沿线各站点以及整条线路车辆分布情况等信息全部可以显示在电子站牌上。

石河子市优先发展公交方便市民出行

城市公共交通优先就是人民大众优先。八师石河子市人民政府在前年投资420万元改造、扩建10个标准港湾式停靠站的基础上，2012年又投入240万元对北三路的14个港湾式停靠站进行新建，还投资200多万元对原红旗商场、老街旺角市场内公交停车场进行改造，方便了市民群众出行乘车。