HPLC-DAD法同时检测镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的药物

目的建立HPLC-DAD法同时检测镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的9种安眠药物。方法样品分析采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为含0.1%三乙胺的0.05 mol/L磷酸二氢铵-甲醇溶液,梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温（35±5）℃;检测波长分别为210 nm（盐酸多塞平、苯妥英钠、司可巴比妥钠、盐酸羟嗪）、220 nm（阿普唑仑、艾司唑仑、劳拉西泮）、254 nm（氯氮卓、盐酸氯丙嗪）,DAD全波长扫描（190~400 nm）。结果在147批药物（镇静安神类中成药87批、保健食品60批）中,11批检出盐酸多塞平,3批检出艾司唑仑,各有1批检出劳拉西泮、阿普唑仑和氯氮卓。结论该方法简便、快速、准确、重复性好,适用于基层药检机构检测非法添加药物。

甘西鼠尾草对缺氧/复氧H9c2大鼠心肌细胞的保护作用

目的探究甘西鼠尾草对培养H9c2大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法采用体外细胞培养方法培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤心肌细胞模型,用甘西鼠尾草进行细胞给药,干预细胞生长过程。将培养的H9c2大鼠心肌细胞随机分为6组,分别为缺氧/复氧模型组(hypoxia/reoxygenation,H/R组);正常对照组(control,C组);缺氧/复氧模型+维拉帕米(verapamil)阳性对照组(H/R+V组);缺氧/复氧模型+甘西鼠尾草低、中和高剂量(0.01、0.1和1.0mg·L^(-1))干预组(H/R+L、M、H组)。使用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率;收集所培养的细胞上清液测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性;使用荧光酶标仪,测定能够反映细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平高低的荧光吸光度值。结果甘西鼠尾草可明显提高心肌细胞存活率,有效减少细胞内LDH漏出量和胞浆内MDA的含量,并降低细胞内ROS水平。结论甘西鼠尾草对缺氧/复氧损伤心肌细胞具有显著的保护作用,其作用机制可能与其增强细胞清除氧自由基能力、减少脂质过氧化物的产生有关。

纤维素键合手性固定相分离托吡卡胺等4种抗胆碱能药物对映体

目的在正相色谱条件下建立了托吡卡胺、氢溴酸后马托品、硫酸阿托品和山莨菪碱共4种阿托品类药物的对映体分离方法。方法使用Chiralpak IC[纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)共价键合硅胶]手性色谱柱,考察了不同流动相体系、烷醇体积比、酸碱添加剂、柱温以及流速对对映体分离的影响。结果 4种药物均可达到良好的分离度,通过不断优化色谱分离条件最终确定分离4种药物的最佳流动相条件:柱温为25℃,流速为1.0 m L·min-1,分离托吡卡胺对映体的流动相为正己烷-乙醇-二乙胺(体积比70∶30∶0.05),分离氢溴酸后马托品和硫酸阿托品对映体的流动相为正己烷-乙醇-二乙胺(体积比80∶20∶0.05),在最佳条件下3种药物对映体之间的分离度分别为7.73、2.36和2.67。分离山莨菪碱4个对映体的最佳流动相为正己烷-异丙醇-乙酸-二乙胺(体积比70∶30∶0.05∶0.025)。结论纤维素键合手性固定相对除山莨菪碱以外的3种抗胆碱能药物均能达到完全分离。

云南鼠尾草提取物对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:研究云南鼠尾草提取物对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤保护作用的机制。方法:建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,并采用云南鼠尾草提取物进行干预。将体外培养的H9c2大鼠心肌细胞随机分为6组:正常对照(C)组、缺氧/复氧模型(H/R)组、缺氧/复氧模型+维拉帕米阳性对照(H/R+V)组、缺氧/复氧模型+云南鼠尾草低(H/R+L,0.01 mg·L^(-1))、中(H/R+M,0.1 mg·L^(-1))、高(H/R+H,1.0 mg·L^(-1))剂量组。采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,利用检测试剂盒测定丙二醛(MDA)的含量和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,通过荧光酶标仪测定荧光吸光度(A)值反映细胞内活性氧(ROS)水平。结果:与模型组比较,云南鼠尾草低、中、高剂量组均能显著提高心肌细胞存活率(P<0.05或P<0.01),云南鼠尾草高剂量组显著减少细胞内LDH漏出量(P<0.05或P<0.01)、胞浆内MDA的含量(P<0.01)和细胞内ROS水平(P<0.05)。结论:云南鼠尾草提取物对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,其相关作用机制可能与其减少脂质过氧化物和清除细胞氧自由基有关。

高效液相色谱法同时测定丹参中10种水溶性和4种脂溶性成分的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定不同来源的丹参药材及饮片中丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、异阿魏酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹酚酸C、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA10种水溶性化合物和4种脂溶性化合物的含量。方法：采用Agilent Zorbax SB-aq（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.03%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱（0-60 min,10%A→68%A;60-70 min,68%A→80%A）,流速0.8 m L·min-1,柱温30℃,检测波长280 nm,进样量20μL。结果：在65 min内,丹参中的14种成分可实现完全分离,质量浓度在0.01-1 766.67μg·m L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r不低于0.999 5;平均回收率（n=6）为97.4%-102.5%,RSD〈2.6%。不同的产地来源、叶子大小、根茎粗细、生长年限及栽培方式等因素对丹参中指标性成分含量差异都有很大的影响。结论：该分析方法专属性好,灵敏度高,定量准确,经方法学验证可用于同时测定丹参中的10种水溶性和4种脂溶性化合物的含量,为丹参药材及饮片的质量评价标准提供参考。

RP-HPLC法同时测定甘西鼠尾草中12种成分的含量

目的:建立、丹酚RP酸-H PLC法同时测定甘西鼠尾草药材及饮片中的丹参素钠、咖啡酸、异阿魏酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸B、丹酚酸:采用A、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A 8种水溶性化合物和4种脂溶性化合物的含量。方法甲溶液,梯度洗脱,流速为Shim-pack XR-ODSⅡ(75 mm×2.0 mm,2.2μm)色谱柱,流动相为乙腈酸水-0.12%甘0.2 mL·min-1,柱温30钠℃,检测波长、咖啡酸、异阿27魏0酸nm,进样量、丹酚酸4μL。结果:在50 min内,西鼠尾草中的、丹酚酸12种成分可实现完全分离,丹参素D、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸BμA、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA质量浓度分别在0.22~22.3μg·mL-(1r=0.999 8,n=6)、0.05~4.91 g·mL-(1rμ=0.999 8,n=6)、0.18~18.25μg·mL-(1r=1μ.000,n=6)、0.28~28.40μg·mL-1(r=0.999 9,n=6)、(13.50~1 349.89 g·mL^(-1)(r=0.999 9,n=6)、0.23~23.22 g·mL^(-1)(r=0.999 7,n=6)、9.9、3~993.16μg·mL^(-1)r=0.999 8,n,n=6)、0.04~3.87μg·mL-1(r=1.000,n=6)、0.81~81.33μg·mL-1(r=0.999 8,n=6)0.87~86.85μg·mL-1(r积=0.999 9=6)、0.67~67.47μg·m回L-1(r收率=(0.9n99 4,n=6)和1.01~101.12μg·mL^(-1)(r=0.999 8,n=6)与峰面呈良好的线性关系,方法的平均(=6)分别为99.2%(RSD=1.7%)、99.7%(RSD=1.4%)、101.0%RSD=2.0%)、99.7%(RSD=2.1%)、99.5%(RSD=1.9%)、101.2%(RSD=1.9%)、100.8%(RSD=1.7%)、(100.7%(RSD=1.8%)、101.6%(R简SD便=、1准.5%)、确,灵1敏00度.7%(高,专RS属D=性1.好6%)、,经方10法0.学5%(验证R可SD同=1时.4测%)和定甘西1鼠00尾.0草%中R的SD=1.7%)。结论:该分析方法12种化学成分的含量,可用于甘西鼠尾草及其制剂的质量控制。