基于香豆酮并色酮生物硫醇荧光探针的合成及应用研究

为监测具有高度生物学活性的谷胱甘肽(GSH),半胱氨酸(Cys)和高半胱氨酸(Hcy)等生物硫醇的生物功能,基于丙烯酸酯对生物硫醇的识别,通过三步反应设计合成香豆酮并色酮的荧光探针JA检测生物硫醇。探针JA具有反应快(10 min响应Cys)、抗干扰性强(Stokes位移150 nm)、毒性低和生物相容性好等特点,能对活细胞内外源性的生物硫醇进行荧光成像。探针JA为生物硫醇的灵敏检测提供了一种简单有效的方法。

二肽基肽酶-Ⅳ有机小分子荧光探针的研究进展

二肽基肽酶-IV(DPP-IV)是一种重要的跨膜糖蛋白水解酶,与各种生理过程和疾病密切相关,检测DPP-IV的有机小分子荧光探针被相继报道,是当前研究生物酶检测的热点。首次综述了用于DPP-IV体外和体内检测及成像的3类有机小分子荧光探针,分别是非近红外荧光探针(λ_(em)<650nm)、近红外荧光探针(λ_(em)>650nm)和双光子荧光探针,对比并总结了三种探针的设计原理、结构特点、生物应用情况及其在DPP-IV相关疾病诊断中的应用,并探讨了DPP-IV活性检测在未来发展方向上所面临的挑战。

有氧运动对CAP大鼠前列腺组织miR-155表达、TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨有氧运动对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠前列腺组织miR-155表达、Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路的影响。方法雄性健康SD大鼠随机分为正常对照组(正常组)、CAP模型对照组(模型组)、游泳运动观察组(运动组),每组10只,注射消痔灵进行大鼠造模,模型形成期7 d,后运动组进行50 min/(次·d)的游泳运动,每周运动6 d,持续28 d,正常组和模型组不进行任何运动,自由活动取食;末次运动结束后2 h处死大鼠,采用ELISA检测前列腺组织白细胞介素(IL)-8、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达,Western印迹检测TLR4、NF-κB P65蛋白相对表达,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-155表达,观察各组前列腺组织病理学改变。结果28 d游泳运动结束后,与正常组比较,模型组和运动组前列腺组织内IL-8、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB P65和miR-155表达均显著升高(P<0.05);与模型组比较,运动组上述各项观察指标均显著降低(P<0.05);相关分析显示,TLR4、NF-κB P65与IL-8、IL-6、TNF-α表达呈正相关,miR-155与TLR4、NF-κB P65、IL-8、IL-6、TNF-α表达呈正相关(均P<0.01);病理观察显示,正常组前列腺组织学观察未见异常改变,模型组前列腺组织内可见腺体上皮细胞及纤维组织明显增生,间质中淋巴细胞等慢性炎症细胞浸润;与模型组比较,运动组前列腺腺体上皮细胞轻度增生,间质轻度纤维化,慢性炎症细胞浸润现象明显好转。结论有氧运动能够对CAP大鼠炎症起到缓解作用,其作用机制可能与miR-155调控TLR4/NF-κB信号通路有关。

有氧运动对慢性非细菌性前列腺炎大鼠血清环氧化酶-2和前列腺素E2表达的影响

目的 探讨有氧运动对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠血清环氧化酶-2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)表达的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠随机分为正常对照大鼠(正常组)、CAP模型对照大鼠(模型组)、有氧运动大鼠(运动组),每组10只大鼠。采用酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清内COX-2、PGE2表达和白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,比较各组大鼠前列腺组织内白细胞计数和卵磷脂小体计数,观察其病理学改变并进行病理评分。结果 与正常组比较,运动组和模型组大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,运动组大鼠血清COX-2、PGE2表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,CAP大鼠血清内COX-2、PGE2表达与IL-6、IL-8、TNF-α水平呈正相关(P<0.01),COX-2与PGE2也呈正相关(P<0.01)。与模型组比较,运动组白细胞计数降低,卵磷脂小体计数上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 有氧运动对CAP大鼠炎症的缓解作用可能与降低细胞因子水平、抑制COX-2、PGE2表达有关。

伴生栽培小麦灌浆后期光合特性分析

以伴生栽培小麦和栽培小麦旗叶为实验材料,对其部分光合特性进行了研究,试验表明,叶室内空气温度(TA)、光合有效辐射(PAR)对伴生栽培小麦有较强的限制性作用,而细胞间隙CO2浓度对伴生小麦有限制作用。伴生栽培小麦的色素含量、丙二醛含量均高于栽培小麦;,而SOD酶活性则低于栽培小麦。这可能与伴生栽培小麦生物产量较高而经济产量较低有着密切关系。

碳点-核酸/氧化石墨烯荧光探针用于miRNA-21的细胞成像

通过生物偶联方式,将无毒的碳点(Carbon Dots,CD)表面功能化上核酸,以核酸功能化的碳点(CD-DNA)为荧光团,氧化石墨烯(GO)为猝灭剂,二者组装成CD-DNA/GO纳米荧光探针,CD与GO之间产生长程共振能量转移(long-range resonance energy transfer,LrRET),CD荧光猝灭。当miRNA-21存在时,DNA与其杂交,CD从GO表面分离,二者之间的荧光共振能量转移被打断,碳点荧光恢复,通过荧光"开"方式检测miRNA-21,检测限为0.2nmol/L,线性范围为1~500nmol/L。该探针成功应用于血癌K562细胞中miRNA-21的原位成像,为血癌的原位诊断和治疗提供了研究依据。

花脸香蘑及袋料栽培试验研究

试验优选出适用于花脸香蘑栽培种培养基配方:木屑78%,白砂糖3%,玉米粉10%,豆饼粉5%,轻质CaCO32%,石灰1%,KH2PO40.5%,石膏0.5%,在袋料栽培过程中,施基肥钙镁磷肥250g/m2,尿素50g/m2,KH2PO420g/m2,能明显增加花脸香蘑产量。

基于InP@ZnS QDs/Dured纳米荧光探针的DNA检测

利用巯基丙酸包覆的In P@Zn S量子点(QDs)与Dured构建了一种检测DNA的荧光探针。在该探针中,以环境友好型带负电的In P@Zn S量子点为荧光团,与带正电的Dured通过静电结合,构建了In P@Zn S QDs/Dured纳米荧光探针。通过荧光共振能量转移(FRET)机理,量子点荧光被猝灭;当DNA存在时,Dured与DNA的特异性结合使Dured从In P@Zn S QDs表面脱附,FRET过程被打断,In P@Zn S QDs荧光恢复,以荧光"关-开"方式检测DNA。该探针检测DNA的线性范围为2.0~275.0 ng·L-1,检测限为1.0 ng·L-1,并可用于模拟生物生理条件下的DNA检测。

花脸香蘑菌丝体氨基酸分析

以花脸香蘑菌丝体为实验材料,用美国戴安AAA型氨基酸分析仪测定了18种氨基酸的组成及含量,得出花脸香蘑菌丝体18种氨基酸质量分数为259.7 g.kg-1干样,其中100 g干样中谷氨酸2.84 g,天冬氨酸2.56 g,亮氨酸2.24 g,赖氨酸1.79 g,苯丙氨酸1.76 g,蛋氨酸0.47 g,人体必需氨基酸质量分数为133.7 g.kg-1干样,占所测氨基酸的51.49%,因此花脸香蘑菌丝体具有很高的营养价值。

花脸香蘑Lepista sordida (Fr) Sing的研究进展

详细论述了花脸香蘑的生物学特性、培养基、营养评价,探讨了花脸香蘑的生物活性成分及其研究趋势。

量子点-卟啉纳米复合体系在肿瘤细胞成像中的应用

本文合成了高荧光量子产率、单分散性好的水溶性CdTe量子点(quantum dots,QDs),并与α,β,γ,δ-四(1-甲基吡啶嗡-4-基)卟吩对甲苯磺酸盐(TMPyP)组装成QDs-TMPyP纳米复合物,研究了该复合物检测DNA的机理以及肿瘤细胞成像。结果显示,QDs-TMPyP纳米复合物通过光致电子转移机制检测DNA,当CdTe QDs和CdTe QDs-TMPyP浓度低于1.0μmol/L时,HeLa肿瘤细胞存活率达92%以上,表现出低的细胞毒性。0.2μmol/L CdTe QDs-TMPyP作用于肿瘤细胞时,细胞生长状态良好,对细胞内能谱分析发现细胞内含有Cd和Te原子。CdTe QDs-TMPyP复合物比CdTe QDs更易被HeLa细胞摄取,利用量子点荧光成功实现了细胞核内成像,为宫颈癌细胞药物输送和细胞成像的深入研究打下基础。

花脸香蘑子实体蛋白质营养评价

采用国际上通用的营养价值评价方法,利用人工栽培花脸香蘑(Lepista sordida(Fr)Sing)子实体粗蛋白含量和氨基酸组成,对花脸香蘑(Lepista sordida(Fr)Sing)子实体的蛋白质进行营养评价及氨基酸评分和化学评分,评价结果:氨基酸评分中花脸香蘑限制氨基酸为缬氨酸Val 68.0高于蛋白质含量均高的糙皮侧耳P.ostreatus 54.3,双孢蘑菇A.bisporus50.0,略低于香菇L.edodes 69.1,化学评分CS中花脸香蘑限制氨基酸为蛋氨酸Met82.8,均高于香菇(限制氨基酸为蛋氨酸Met70.6),糙皮侧耳(限制氨基酸为胱氨酸Cys24.5),双孢蘑菇(限制氨基酸蛋氨酸Met37.0)因此花脸香蘑更接近于标准鸡蛋模式的食用菌。

花脸香蘑菌丝体液体发酵研究

对花脸香蘑液体发酵培养基进行优化,以菌丝体生物量为指标,采用单因素分析,优化培养基中碳源、氮源、p H值、无机盐以及菌龄。结果表明,液体发酵培养基中,最佳碳源为土豆粉;最佳氮源为NH_4Cl;最佳p H值为7;无机盐为Cu SO_4和Fe SO_4;菌龄对菌丝体生物量没有影响。采用正交试验的方法,筛选出适合于花脸香蘑深层发酵培养配方为:碳源为土豆粉;氮源为NH_4Cl;p H值为7;无机盐为Fe SO_4;菌龄12 d。

花脸香蘑海藻糖多糖及营养成分分析

以人工栽培花脸香蘑子实体为材料,采用高压液相色谱法(HPLC),测定其海藻糖,最佳提取条件为提取温度:100℃、水的体积:100mL、时间:60min,花脸香蘑子实体海藻糖含量为8.34%。同时测定了常见的几种食用菌子实体海藻糖,大球盖菇含量为7.66%、茶树菇含量为7.66%、平菇含量为3.98%、香菇含量为2.40%、金针菇含量为1.61%、蘑菇含量为0.93%,花脸香蘑子实体海藻糖含量高于其他常见食用菌;多糖含量为10.31%。水分为91.58%;脂肪含量为3.15%。

开展生物化学实验竞赛 提高实验教学质量

生物化学为医学院校重要的基础课程之一,开展生物化学实验竞赛,合理安排实验竞赛内容和评价指标,对积极培养学生的学习积极性、动手能力、团队合作精神,提高实验教学质量效果显著。

花脸香蘑酯酶同工酶分析

[目的]对花脸香蘑酯酶同工酶进行分析,以期为花脸香蘑酶谱分析奠定基础。[方法]采用聚丙酰胺凝胶电泳方法,对7种不同提取液提取的酯酶进行分析,探讨不同提取液对酯酶同工酶提取效果的影响,找出最优提取液,并分析不同培养方法和组织对同工酶的影响。[结果]7种不同提取液提取的酯酶酶带保持一致,但提取效果各异,用pH 8.0、0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液提取时效果较好。液体菌丝体、试管种、驯化花脸香蘑菌盖酶带均有5条;野生花脸香蘑菌盖和菌柄只有3条酯酶同工酶谱带;野生花脸香蘑菌盖与驯化花脸香蘑菌盖的酯酶谱带条数不同。因此在选用酯酶同工酶作为遗传指标,用作花脸香蘑液体菌种鉴定时,必须注意保持培养基、培养条件以及取材部位的一致性。[结论]该研究结果为花脸香蘑酶谱分析奠定了基础。

民族地区生物技术专业设置及改革初探

在新形势下,探讨民族地区生物技术专业课程设置、知识结构、素质能力、职业取向以及培养目标定位,提出生物技术专业课程设置改革,为民族地区院校生物技术专业教育教学改革提供参考。

花脸香蘑液体发酵次生代谢产物中挥发性物质的化学成分研究

采用GC-MS联用技术,结合质谱信息经计算机检索NIST147标准质谱图库与人工解析,分析了花脸香蘑Lepista sordida(Fr)Sing菌株发酵液CH2Cl2提取物的挥发性成分,发酵液中气相色谱共分离了19个峰,经解析确定了16个成分,在培养基(对照组)中CH2Cl2提取物气相色谱共分离了16个峰,经解析确定了14个成分,主要次生代谢产物为1-Decanol,1,2-Benzendicarboxylic acid,2,6-Dichlorophenylisothiocyanate,Benzenemethanol,1-H-3α,7-Methanazulen-5ol,2-Chloro-4,5-dimethoxybenzaldehyde,5-Chloro-2-methoxybenzoic acid,Geranic acid,Pyrrolo[1,2-α]pyrazine-1,4-dione,Cyclo-(1-leucyl-1-phenylalanyl)。

植物形态生物质材料的制备与力学性能

发展绿色环保新材料是当今生物质研究的一项重大任务。本研究分析了一年生黑麦草(Lolium multiflo-rum)、高羊茅(Festuca arundinacea)和白三叶(Trifolium repens)经自然反复倒置生长,根茎交联成型后用高分子溶液浸泡制备生物质材料的过程以及种子添加量与力学性能之间的关系,初步探索了生物质经不同浓度的高分子溶液处理后,材料的力学性能。其中用浓度为10%的聚乙烯醇处理的生物质力学性能最佳。3种草坪芽苗中,一年生黑麦草制备的生物质材料优于其余两种草坪品种,经浓度为10%聚乙烯醇处理后的生物质力学性能各参数值分别为最大力191.959N、最大变形23.581mm、拉伸强度0.512MPa、伸长率58.95%、弹性模量0.87MPa,这能为生物材料的开发提供了新的思路。

植物蛋白激酶的研究进展

蛋白激酶是酶中的一个大家族,在诸如发育、自交不亲和、雄性不育、抗逆和抗病反应中起重要作用。为了促进蛋白激酶的研究,本文对植物蛋白激酶如:钙依赖蛋白激酶(Calcium-dependent calmodulin-independent protein kinases,CDPKs)、钙/钙调素依赖蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent protein kinase,Ca MK)、类受体蛋白激酶(Receptor-like kinases,RLKs)、促分裂原蛋白激酶(MAPK)、核糖体蛋白激酶(ribosomal-protein kinas)、转录调控蛋白激酶(transcription-regulation protein)的研究现状进行了综述。