高产酸性糖化酶根霉与乙偶姻芽孢杆菌复合麸曲的研究

【目的】为提高食醋原料淀粉利用率及其风味品质。【方法】分别利用透明圈法、Voges Proskauer显色反应对醋曲中产酸性糖化酶霉菌和产乙偶姻芽孢杆菌进行初筛,并进一步测定菌株产糖化酶与产乙偶姻能力,利用响应面法对得到的目的复配菌株进行复合麸曲制备工艺优化。【结果】从醋曲中筛选得到一株高产酸性糖化酶霉菌和一株与前者无拮抗作用的产乙偶姻芽孢杆菌,经鉴定分别为米根霉(Rhizopus oryzae)SFM-1和贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)SAU-1,对SFM-1与SAU-1复合菌麸曲的制备工艺进行响应面优化,确定米根霉SFM-1与芽孢杆菌SAU-1接种比例为15∶1、间隔接种时间为24 h、培养温度为31℃、培养时间为72 h,麸曲的生物量与糖化力达到最佳水平,该培养条件下霉菌孢子数lg值、芽孢杆菌活菌数lg值、糖化力水平分别为:8.94个/g、9.81 CFU/g、3388.56 U/g干醅。【结论】获得一株高产酸性糖化酶米根霉和一株高产乙偶姻贝莱斯芽孢杆菌,并优化出复合麸曲最佳制备工艺,为麸曲的工业化制备和应用提供了数据参考。

油橄榄果渣综合利用研究进展

油橄榄果渣是油橄榄榨油后的固体副产物,含有大量水分和丰富的膳食纤维、果渣油、粗脂肪及少量蛋白质等营养成分,直接废弃不仅造成环境污染,也导致资源浪费。油橄榄果渣及其提取物中含有酚类、黄酮、三萜类、裂环烯醚萜类、植物甾醇类和维生素等多种生物活性成分,具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌以及降血糖血脂等功能,有广阔的开发应用前景。该文概述了油橄榄果渣主要营养成分和生物活性成分,详述了油橄榄果渣在动物养殖及发酵蛋白饲料、食品加工、医药与化妆品和环境领域中综合利用的研究现状,为油橄榄果渣这一副产物的综合利用与深入研究提供了参考。

市售原粮农药残留快速检测产品的质量评价与分析

本研究以稻谷、小麦、玉米及大豆为样品基质,采用空白加标制备盲样,对国内市售的5个品牌(A、B、C、D、E)16种原粮农药残留快检产品进行质量评价。结果显示:5个品牌中仅品牌A在满足试剂、耗材等完整清晰的条件下较为经济实惠;除品牌A中百草枯、克百威快检产品和品牌D中克百威快检产品的检测结果符合规范性要求(假阳性率≤15%,假阴性率≤5%,相对准确度≥93.06%)外,其余结果均超过规定值,且品牌A外的4个品牌均出现假阴性结果;不同评价人员对检测结果的影响不大;不同品牌单个产品检测时长有所差异,品牌D无法在30 min内完成单个样品的前处理与检测全过程;品牌A、品牌B及品牌C现场适用性高于另外2个品牌。通过本次评价,可以科学客观地筛选出质量较佳的农药残留快检产品品牌,为原粮收储现场农残快速检测提供参考。

粮油原料中农药使用与残留现状及快速检测技术研究进展

我国是粮油生产及消费大国,粮食高产量发展与农药等化学药剂息息相关。随着生活水平的提高,居民对食品的要求已从“产量安全”转变为“质量与产量并重”。为加强粮食质量安全管理,亟需全面了解粮食中农药污染情况,同时开发出更加高效便捷的快速检测技术。本文简要概述农药及残留特性,总结分析我国粮油原料中农药使用与残留现状,综述现有的应用于粮食中的农药残留快速检测方法与技术,分析比较各种快检方法及产品的优缺点,以期为原粮收购质量审查提供参考。

丝状真菌降解拟除虫菊酯类农药和3-苯氧基苯甲酸研究进展

拟除虫菊酯(pyrethroids,PYRs)类农药由于低毒、高效被广泛使用,其残留造成的环境和食品安全问题日益严重,3-苯氧基苯甲酸(3-phenoxybenzoic acid,3-PBA)是PYRs的主要中间降解产物之一,比母体农药更稳定,毒性更强,其残留进一步加重了环境和农产品污染。近年来,丝状真菌对PYRs和3-PBA降解的相关研究陆续被报道,其主要集中在降解菌株筛选、降解特性、降解途径及降解酶定位等方面,对于降解过程中涉及的关键酶及其编码基因少见报道。随着测序技术的发展,分子生物学技术为挖掘丝状真菌降解酶及编码基因提供了新途径。本文简述了PYRs和3-PBA的基本性质、残留现状及危害,综述了降解PYRs和3-PBA的丝状真菌、降解途径及降解酶,并对降解酶及其编码基因筛选和验证方法进行了展望,以期为揭示丝状真菌对PYRs及3-PBA的降解途径和降解机制提供理论依据,为消减环境及农产品中残留农药提供参考。

肉鸡胴体分割过程中污染微生物分析及不同冲淋条件对产品减菌影响

目的：为防制肉鸡屠宰分割环节产品的微生物污染。方法：调查肉鸡胴体分割车间环境的菌落总数和分割后鸡腿产品表面的菌落总数、假单胞菌、大肠菌群、肠球菌数量以及检测其金黄色葡萄球菌、沙门氏菌污染情况;通过正交实验优化淋洗条件。结果：在分割前、中、后期,分割车间的加工用水、空气中细菌数均未超过国家标准,但接触面污染较为严重,大多处于不可接受水平;分割后鸡腿产品表面污染的菌落总数、假单胞菌、大肠菌群和肠球菌数量分别为3.85～4.17、3.14～3.87、2.86～3.68、1.07～1.82lg（cfu/cm^2）,金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的检出率分别为46.67%、14.17%;减菌的最适宜条件为乳酸浓度0.5%（w/v）、柠檬酸浓度1.0%（w/v）、冲淋时间30s,可减少菌落总数1.97lg（cfu/cm^2）,且减菌处理对其色泽、气味以及加热后肉汤滋味几乎无影响,最终鸡腿产品中菌落总数为2.20lg（cfu/cm^2）。结论：肉鸡胴体分割车间环境以及分割后鸡腿细菌污染较严重,且存在致病菌污染;乳酸结合柠檬酸冲淋可明显减少分割后鸡腿表面的菌落总数。

液态发酵麸醋工艺优化及其风味品质研究

为提高液态发酵食醋品质,在其传统工艺基础上添加麸皮浸出液,以四川麸醋醋醅中筛选的优良巴氏醋酸菌为菌种,根据单因素实验确定影响醋酸发酵的显著因素,并通过BoxBehnken设计试验优化,其最优发酵条件为:麸曲添加质量分数1.11%、醋酸菌接种体积分数13.71%、醋酸发酵温度31.50℃,在此条件下产酸量为68.48 g/L。以四川某醋厂生产的液态发酵食醋为对照,对所得液态发酵麸醋进行感官评价、挥发性成分和游离氨基酸分析。液态发酵麸醋口感柔和、香味独特,检测出20种挥发性成分、17种游离氨基酸;游离氨基酸总量为805.29 mg/dL,各项指标均优于液态发酵食醋,品质明显提升。

地衣芽孢杆菌B-1降解西维因的环境条件

以地衣芽孢杆菌B-1(Bacillus licheniformis B-1)为材料,采用HPLC测定不同微生物培养体系中西维因(Carbaryl)残留量,并考察菌株B-1降解谱,探究其对西维因的降解特性。结果表明,菌株B-1对西维因的降解率与其生长呈正相关,在LB培养基中培养72 h对100 mg/L西维因的降解率为91.21%。较高的温度和碱性环境有利于西维因的降解,而较高底物质量浓度和盐质量浓度均对菌株B-1的生长及西维因的降解有负面影响;Ca^(2+)、Fe^(2+)、Mn^(2+)、Mg^(2+)对其降解西维因有不同程度的刺激作用,Cu^(2+)则有抑制作用。此外,菌株B-1对20 mg/L的丁硫克百威、叶蝉散和毒死蜱均有不同程度的降解作用。HPLC分析结果表明,初步确定1-萘酚是菌株B-1降解西维因的中间产物,且该菌株在LB培养基中培养72 h对20 mg/L 1-萘酚的降解率为48.70%。可见,菌株B-1能高效降解西维因和其他多类杀虫剂,具有一定的广谱性,可应用于环境修复。

耐二氧化硫乳酸菌的筛选鉴定及其在泡野山椒中的应用

筛选出2株源于泡蒜的耐SO2乳酸菌,对其形态学观察、生理生化测试及16S rDNA序列测定,菌株2-2被鉴定为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),菌株2-5为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。利用2株菌耐SO_2特性,将其应用于野山椒泡制中,对含SO_2的泡野山椒基础配方进行优化,结果表明:2株菌均在含SO_2 150mg/L的MRS培养基中能正常生长;将2菌株按1∶1的比例混合,以2%(v/w)的接种量接种至含SO_2 75 mg/L,盐含量4%,蔗糖含量2%的野山椒中,室温发酵,成熟的泡野山椒酸咸适宜,色泽金黄、味道鲜美,具有泡野山椒典型的香气,为其工业生产提供了数据参考。

HPLC-UV法检测微生物降解体系中西维因含量

采用高效液相色谱-紫外检测（HPLC-UV）法测定微生物降解体系中西维因含量。根据细菌和霉菌降解体系的不同性质选用适宜前处理方式,以Sepax GP-C_（18）柱（150 mm×4.6 mm,5.0μm）为色谱柱,V（乙腈）∶V（水）=（56∶44）为流动相,流速0.5 m L/min,用紫外检测器于220 nm处检测西维因。结果表明,西维因标准品保留时间为7.922 min,在0.5~100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数0.999 1。细菌培养液中西维因平均回收率为102.01%,RSD为0.29%;霉菌培养液中平均回收率为100.76%,RSD为1.22%;最低检测限为0.4mg/L。运用该法测得实验室保藏的细菌菌株A4和B-1在LB培养基中培养2 d对20 mg/L西维因降解率分别为35.72%、38.97%;霉菌菌株M-4和YAT在MM培养基中培养7 d对20 mg/L西维因降解率分别为38.69%、51.40%。该法简单,快速,回收率和精密度高,稳定性好。

米曲霉Aspergillus oryzae M-4降解己烯雌酚的特性研究

以1株分离自酱油曲的米曲霉（Aspergillus oryzae）M-4为材料,初步研究其降解己烯雌酚（diethylstilbestrol,DES）的特性。米曲霉M-4对DES的降解率与菌体生物量呈正相关,在基础盐培养基（mineral salt medium,MM）中培养9 d对100 mg/L的DES降解率为93%。动力学研究表明,该菌株降解DES的过程符合一级动力学方程,在所测试的培养温度、初始pH值、底物质量浓度范围内,DES半衰期为1.645-5.295 d。培养温度30℃和偏酸性环境有利于其对DES的降解;底物质量浓度越高,其半衰期越长。

不同处理方式对牛干巴贮藏期品质的影响

为延长干巴牛肉货架期,文中分别采用热力、化学、热力结合化学与超高压4种方式处理干巴牛肉,以真空包装干巴牛肉为对照,于37℃保温贮藏35天,通过对其理化、微生物及感官指标进行测定,分析其在贮藏过程中品质变化规律;结果显示:热力处理组干巴牛肉品质变化较小,微生物数量减少速度较快,35天后酸价(AV)和总挥发性盐基氮(TVBN)较低;化学处理组35天后亚硝酸盐含量较其他处理组低,为0.7 mg/kg,但AV和TVBN值偏高,为1.83 mg/g和59.6 mg/kg,对细菌和酵母菌抑制效果较差;热力结合化学处理组亚硝酸盐含量较低,AV和TVBN值均最低,为1.50 mg/g和52.5 mg/kg,与热力处理组感官评分接近,微生物减少较热力组快;超高压处理组杀菌效果较好,但色泽较差。对照组35天后亚硝酸盐含量、AV、TVBN值和微生物数量均高于各处理组。4个处理组在整个贮藏过程中亚硝酸盐含量、细菌总数与酵母菌数均下降,亚硝酸盐含量均低于1.5mg/kg,远低于国家标准30 mg/kg,且无过氧化值、霉菌检出。热力结合化学组为最优处理组。

酵素食品微生物指标与主要功效酶及有机酸分析

为了解不同原料自然发酵酵素食品中微生物组成,评价市售酵素食品的理化指标、微生物指标、主要功效酶活力和有机酸组成,对23份发酵期酵素样品进行酵母菌数、乳酸菌数和醋酸菌数测定,对4种市售酵素食品进行总酸、可溶性固形物含量、微生物指标及蛋白酶、脂肪酶、α-淀粉酶、超氧化物歧化酶活力测定,并采用高效液相色谱法对其有机酸的种类及含量进行分析。结果表明,发酵期酵素中广泛存在酵母菌、乳酸菌和醋酸菌;市售酵素食品的功效酶活力偏低,主要有机酸为草酸、苹果酸、乳酸和乙酸。结论:市售酵素食品质量参差不齐,功效酶活力较低,与其宣传功效不符。该研究为了解酵素食品品质、正确看待酵素食品提供了数据参考。

高效液相色谱—紫外检测法测定微生物降解体系中己烯雌酚含量

采用HPLC—UV法测定微生物降解体系中己烯雌酚（DES）的含量。根据霉菌和细菌发酵体系的不同性质选用不同的提取方法，以Sepax GP—C18柱（150mm×4．60mm，5．0μm）为色谱柱，甲醇：水（7：3，V／V）为流动相，流速0．7mL／min，用紫外检测器在242nm处检测。结果显示DES对照品的保留时间为7．714min，在0．5～50．0mg／L浓度范围内线性关系良好，相关系数为0．9963。细菌发酵液中DES平均回收率为94．04％，RSD为2．33％；霉菌发酵液中DES平均回收率为95．24％，RSD为1．05％。DES的检出限不大于0．30mg／L。运用该方法测得实验室保藏的4株菌5d内对25mg／L的DES降解率分别为62．38％，64．72％，53．38％，88．34％。该方法检测微生物降解体系中DES简单、快速、准确、分离度好，精密度高，稳定性好。

植物乳杆菌P158产细菌素培养基及培养条件的优化

为提高乳酸菌细菌素产量,以藤黄微球菌、铜绿假单胞杆菌为指示菌,通过单因素和正交试验优化植物乳杆菌P158产细菌素的培养基和培养条件。结果表明,5种乳酸菌培养基中MRS培养基为该菌株产细菌素的适宜培养基;最佳培养条件为种子液接种量3%(V/V)、培养基初始pH 6.0、34℃静置培养42 h;最佳培养基配方为葡萄糖添加量2 g/100 mL、酵母浸膏添加量2 g/100 mL、大豆蛋白胨添加量1.5 g/100 mL、MgSO_4添加量0.058 g/100 mL、MnSO_4添加量0.025 g/100 mL、FeSO_4添加量0.02 g/100 mL、Tween 80添加量0.08 g/100 mL、乙酸钠添加量0.5 g/100 mL、K_2HPO_4添加量0.2 g/100 mL。在此条件下,细菌素效价为1 145 IU/mL,较优化前(362 IU/mL)提高了216%

酵素中一株高产酸醋酸菌的鉴定及其产酸特性

以10种酵素样品为菌源,经分离纯化、产酸定性和定量试验,获得1株高产酸量醋酸菌LMY-1,对其形态学、生理生化指标测定及16SrDNA鉴定,确定其为芝庇侬醋酸杆菌（Acetobacter cibinongensis）;以苹果、梨、黄瓜作为果蔬培养基,研究菌株LMY-1的产酸特性。结果表明,菌株LMY-1的最适产酸温度为30℃;菌株LMY-1在乙醇含量为4mL/100mL时,产酸量最高（22.72 g/L）,比对照菌株CICC7015（Acetobacter pasteurianus subsp.pasteurianus）（19.05g/L）产酸量高;在底酸浓度为1~5 mL/100 mL时,菌株LMY-1和菌株CICC7015的产酸量随发酵时间的变化趋势均先减少后增加再减少;相同条件下,菌株LMY-1产酸速率优于菌株CICC7015;两菌株均产2种有机酸,分别是乙酸和草酸,且乙酸量远高于草酸量。菌株LMY-1更适宜于果蔬酵素的酿造。

茯砖茶中氯氰菊酯降解“金花菌”的降解特性及途径

以1株'金花菌'——冠突散囊菌(Eurotium cristatum)ET1为材料,研究了其降解氯氰菊酯(cypermethrin,CY)的特性及途径。冠突散囊菌ET1对CY降解的与其生长趋势是同步的,在PD培养基中8 d内对50mg/L CY降解率为57.93%。动力学研究表明,该菌株降解CY的过程符合一级动力学方程。在测试条件下菌株ET1可有效降解20~100 mg/L质量浓度范围内的CY,在测试的底物浓度、温度、p H范围内,CY半衰期(t1/2/d)为3.382~11.517 d;25°C、初始p H 6.0的条件下,菌株ET1降解50 mg/L CY的t1/2/d最短(6.104 d)。通过GC-MS结合菌株ET1对模式底物的利用情况研究了其降解CY的中间产物,并推导出菌株ET1降解CY途径为:首先分解CY为二氯菊酸(dichloro chrysanthemum acid,DCVA)和α-氰基-3-苯氧基苄醇,α-氰基-3-苯氧基苄醇自发转化为3-苯氧基苯甲醛,3-苯氧基苯甲醛在脱氢酶的作用下转化为3-苯氧基苯甲酸(3-PBA),其次,3-PBA的醚键断裂得到苯酚。

响应面法优化DBP降解菌降解条件的研究

本文以分离筛选自醋醅可高效降解邻苯二甲酸二丁酯的芽孢杆菌(Bacillus sp.)JX-1为研究对象,以芽孢杆菌JX-1对DBP的降解率为响应值,采用单因素和响应面法优化芽孢杆菌JX-1降解DBP的条件。单因素试验得到3个影响DBP降解的主要因素为时间、pH和温度。响应面法优化JX-1对DBP的最优降解条件为:培养时间24 h、pH 6.0、温度35℃,在此条件下芽孢杆菌JX-1对DBP降解率为99.87%。本结果为芽孢杆菌JX-1应用于生物修复提供了理论依据。

微生物来源酚酸脱羧酶的研究进展

酚酸脱羧酶(裂合酶类EC 4.1.1.102)可以催化植物中广泛存在的酚酸类物质如对香豆酸、阿魏酸、咖啡酸、芥子酸等转化为4-乙烯基衍生物。4-乙烯基衍生物不仅自身是高档香料,也是合成其他香料(如香兰素)的重要前体物质。同时,相比于目前市场中食品香料多采用的化学合成法,生物合成法前体物质单一、条件温和、环境友好,具有广阔的应用前景,而且生物技术制备的香料被视为天然产品。因此,利用酚酸脱羧酶生物合成4-乙烯基类衍生物补充这一类型香料的生产途径具有重要的意义。本文围绕微生物来源酚酸脱羧酶,对酚酸脱羧酶的来源、分子结构、催化机制及结构和功能的关联、催化特性以及提高酶催化效率的技术5个方面予以归纳总结。

米曲霉M-4降解己烯雌酚的条件优化

【目的】以米曲霉(Aspergillus oryzae)M-4对己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)的降解率为响应值,对其降解条件进行优化。【方法】采用Plackett-Burman法对培养基组分和降解条件筛选显著性影响因素,并通过Box-Bohnken设计试验优化降解条件。【结果】最优培养基配方为:蛋白胨1.3%,CaCl_2 0.045%,葡萄糖0.5%,K_2HPO_4 0.15%,KH_2PO_4 0.05%,NaCl 0.05%,Tween 80 0.2%,DES质量浓度44 mg/L;最优培养条件为:初始p H 7.5,种龄72 h,转速140 r/min,培养温度28°C,培养时间72 h。【结论】在最优条件下菌株M-4对DES降解率为83.89%,比优化前(60.98%)提高1.38倍,差异极显著(P<0.01)。