宇佐美曲霉L336酸性蛋白酶的动力学性质

L336酸性蛋白酶的分子量为54000，等电点为3．8±0．2。在pH2．5，40℃条件下，酶对酪蛋白、牛血清白蛋白和牛血红蛋白的Km值分别为0．263g／L、0．278g／L和0．415g／L，Vmax分别为2075、1550和2793μgTyr／min、mL，酪蛋白为最适底物。在pH2．0～5．0、40℃以下时酶的稳定性最好。此外，还研究了金属离子对酶活性的影响。

宇佐美曲霉酸性蛋白酶发酵工艺研究

宇佐美曲霉Ｌ３３５是一株分泌高单位酸性蛋白酶的生产菌，本研究采用单因素搜索和正交试验，通过摇瓶发酵和２Ｌ搅拌罐发酵，对其发酵工艺进行优化。结果表明，较适宜的发酵培养基（ｇ／１００ｍＬ）为黄豆粉５．０、玉米粉１．２、鱼粉０．８、ＣａＣｌ２０．５、Ｎａ２ＨＰＯ４０．２、ＮＨ４Ｃｌ１．０、蚕蛹水解液１０．０；通气量控制２５ｈ前为１∶０．４ｖ／ｖ／ｍ、２５－５０ｈ１∶１．０ｖ／ｖ／ｍ、５０ｈ后１∶１．３ｖ／ｖ／ｍ；孢子接种，３１±１℃培养８８ｈ。在上述较优发酵条件下，酸性蛋白酶活力在６１００ｕ／ｍＬ以上，发酵单位居国内领先地位。

宇佐美曲霉L-336酸性蛋白酶2m^3罐中试发酵研究报告

宇佐美曲霉栗色变种Ｌ－３３６是分泌高单位酸性蛋白酶的生产菌，在摇瓶小试工艺基础上进行２ｍ３罐发酵中试，结果表明：较优发酵培养基（％）为黄豆粉４．３，玉米粉１．０，鱼粉０．７，蚕蛹水解液１０，Ｎａ２ＨＰＯ４０．２，ＣａＣｌ２０．５，ＮＨ４Ｃｌ１．０，豆油１．６；风量为０～２５ｈ时１∶０．４ｖ／ｖ／ｍ，２５～５０ｈ时１∶１．０ｖ／ｖ／ｍ，５０ｈ后１∶１．３ｖ／ｖ／ｍ；接种量１０％，温度３１℃，搅拌转速２００ｒ／ｍｉｎ，发酵周期７５ｈ。在上述条件下，发酵酶活力稳定在５５００ｕ／ｍｌ左右。

猪肝线粒体DNA的纯化及其限制酶切分析

本文报道了一种纯化猪肝线粒体DNA(mtDNA)的简便方法.用差速离心制备线粒体,然后用1%Sarkosyl提取粗制的mtDNA,氯仿-异戊醇脱蛋白,最后用Sepharose4B凝胶柱层析纯化mtDNA.对纯化的mtDNA用化学分析、紫外吸收光谱、凝胶电泳和限制酶切等方法进行了鉴定.猪肝mtDNA经限制酶HindⅢ,HaeⅢ,HincⅡ,BamHⅠ和EcoRⅠ酶切分别切割成4,6,5,5和3个片断.经估算猪肝mtDNA的分子量约为15.85千碱基对或10.46×10~6道尔顿.

水稻叶绿体DNA的分离纯化及其限制酶切分析

通过在匀浆缓冲浪中添加抗坏血酸并结合蔗糖密度梯度离心和差速离心法等分离纯化了水稻叶绿体 DNA(ctDNA),得率高达100μg/100g叶,其纯度足以用于限制酶分析和分子生物学研究.环状水稻ctDNA总长度为129.5Kbp,PvuⅡ、SalⅠ、PstⅡ、Hind Ⅲ、EcoRⅠ和BamHⅠ在ctDNA上的切点分别为11、12、17、37、67和44.

rbcL基因在水稻叶绿体DNA基因库克隆中的定位

由水稻品系珍汕９７不育系为材料制得的叶绿体ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）基因库中，筛选到了含核酮糖１，５－二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基基因（ｒｂｃＬ）的重组质粒，对该重组质粒用ＰｖｕⅡ，ＰｓｔⅠ和ＳａｌⅠ限制性内切酶进行了分析并制作了限制图谱，ｒｂｃＬ基因在该图谱上进行了定位．