混合菌群产氢特性研究

对产氢菌株进行筛选，得到一组可以在微氧条件下高效产氢的微生物菌群．此菌群在0－15％O2浓度下都可以产氢，具有较高的耐氧产氢特性．该混合菌群可利用甘露醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉为底物产氢，其中甘露醇为最适底物．最适产氢温度、pH值、初始氧气浓度分别为33℃、7．0、2．72％．在此条件下，以甘露醇为碳源（5．0g／L），产氢效率可达到324．18mL（H2）/g（甘露醇）．对该产氢体系发酵末端产物的液相分析显示乙醇占76％～93％，表明该产氢体系为乙醇型发酵．通过PCR-DGGE方法进行菌群分析，发现不同初始氧浓度下菌群分布有一定差异，但克氏杆菌在各种氧浓度下的混合菌群中都占明显优势，是主要的产氢菌．

稳定混合菌协同降解咔唑研究

以咔唑(Carbazole,CAR)作为唯一碳源和氮源,从某炼油厂废水中筛选获得稳定的咔唑降解混合菌株.对该混合菌株进行分离和纯化,获得两株细菌,经生物化学和分子进化特征分析后,初步鉴定为Chryseobacterium sp.NCY和Achromobacter sp.NCW.扫描电镜显示,两株菌在含咔唑的无机盐培养基和肉膏培养基上生长时,细胞形态发生显著的变化.这两株细菌形成的稳定复合体在24h内对咔唑(500mgL-1)的降解率为80%,64h内降解率可达到99%以上,并释放出氨氮22.69mgL-1.纯化后的两株细菌单独以咔唑为唯一碳源和氮源,均不能生长,推测两株菌通过协同代谢作用降解咔唑.

张之洞从清流健将向洋务殿军转变的原因初探

张之洞在洋务运动大兴之时跻身倾向保守的清流派,但却在清流党逐步鼎盛之时,出任山西巡抚,逐渐从清流健将转向洋务殿军。在此阶段,张之洞通过与李提摩太的接触,对"西技"、"西艺"开始有了初步认识,这正是他从清流派转向洋务派的契机。张之洞将李提摩太"西化"方案中的兴办实业条款付诸实施,迈出了向洋务派转化的第一步。中法战争使张之洞直接接触到外部世界,战争的曲折艰难和令人愤懑的结局,更加速了他转向洋务派的进程。在督两广任上张之洞在粤兴办洋务,最终完成由清流健将向洋务殿军的转变。

张闻天与《南鸿》周刊

《南鸿》周刊是张闻天主编的第一份刊物,1925年3月30日《南鸿》周刊第1期在重庆正式出版。张闻天在主编《南鸿》周刊之前,点燃重庆新文化运动火焰,推动重庆思想启蒙运动。张闻天在主编《南鸿》周刊期间,高举新文化运动旗帜,把重庆“变成一个大造反的世界”。《南鸿》周刊的遭禁,张闻天被迫离开重庆重返上海,成为张闻天人生的转折点。

不同吸附体系及因素水平对PCC中4类抗凝蛋白的影响研究

目的探讨不同吸附体系及其柠檬酸钠、氯化钠、pH、电导4因素对凝血酶原复合物(PCC)中蛋白C、蛋白S、蛋白Z、抗凝血酶收率及比活的影响。方法选择柠檬酸钠、氯化钠、pH3因素3水平设计正交试验,配制9种PCC平衡吸附体系;凝胶平衡后,吸附血浆,洗涤、洗脱,制备PCC浓缩物;测定浓缩物中蛋白C和S、抗凝血酶活性、蛋白Z含量、总体积及蛋白浓度,获得四类抗凝蛋白收率及比活,比较不同吸附体系收率、比活总趋势;利用正交试验直观分析法分析柠檬酸钠、氯化钠、pH对蛋白C、S和Z收率及比活的影响;测定吸附体系电导率,分析电导率与4类抗凝蛋白收率及比活的关系。结果不同吸附体系4类抗凝蛋白收率及比活有较大差异,抗凝血酶二者均极低。柠檬酸钠对蛋白C收率及比活、蛋白S收率影响较大;pH对蛋白S比活、蛋白Z收率及比活影响极差分别为:0.120、6.847、0.716,高于其他因素;氯化钠对其影响均最小。柠檬酸钠浓度越低,蛋白C收率及比活越高,蛋白S收率则越低,0.015 mol/L水平蛋白Z收率为49.11%,高于其他水平,而蛋白S和Z比活最低;pH越低,蛋白Z收率则越高,pH7.0水平蛋白C和S收率及比活、蛋白Z比活最高;氯化钠浓度0.075 mol/L水平,蛋白C收率及比活、蛋白S和Z比活分别为:29.37%、0.533 IU/mg、0.401 IU/mg、2.362μg/mg,均高于其他水平,而蛋白S、Z收率最低。不同电导率条件,蛋白C收率及蛋白Z比活变化较大,其中蛋白Z与S收率、蛋白Z与S比活、蛋白C收率与比活变化趋势基本一致;(10.00±0.20)ms/cm条件,蛋白C、S和Z比活较高。结论不同吸附体系抗凝血酶收率及比活均极低,蛋白C、S和Z收率及比活间无规律性。氯化钠对蛋白C、S和Z收率及比活影响较小,柠檬酸钠、氯化钠、pH不同水平对蛋白C、S和Z收率影响效应无共性,0.01 mol/L柠檬酸钠,0.075 mol/L氯化钠、pH7.0水平蛋白C、S和Z比活最佳。电导率与四类抗凝蛋白收率及比活间无线性关系。

离子交换层析分离纯化人α1-抗胰蛋白酶

目的建立一种新的用离子交换层析从Cohn组分IV沉淀中分离纯化α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)制剂的工艺。方法以Cohn组分Ⅳ为原料,用12倍体积20mmol/L Tris-HCl缓冲液溶解后,加入2.5%气相二氧化硅搅拌吸附脂蛋白等杂质。抽提液经离心收集上清,再用0.45μm滤膜过滤。将滤液上样于CM-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析柱,收集未吸附的流穿蛋白液。再将收集的流穿液上样于Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析柱,上样及平衡液清洗后,用含60mmol NaCl的缓冲液洗涤杂蛋白,再用含100mmol/L NaCl的缓冲液洗脱,收集洗脱液。

交叉免疫电泳法对人抗凝血酶-Ⅲ肝素结合组分的检测

目的建立检测人抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)中肝素结合组分的方法。方法利用火箭电泳法确定AT-Ⅲ抗原抗体比例,以交叉免疫电泳法检测AT-Ⅲ中的肝素结合组分,加热处理方法制备无肝素结合力的AT-Ⅲ样品。结果免疫电泳检测显示沉淀峰清晰,明确分辨出AT-Ⅲ样品中肝素结合组分及非结合组分并计算比例:混合血浆中结合肝素的AT-Ⅲ组分比例约为85.8%,AT-Ⅲ标准品、商业化制品及本实验室自制样品中结合肝素的AT-Ⅲ组分比例均接近100%。AT-Ⅲ样品经热处理(60℃,10h)后,不含枸橼酸钠的样品全部失去肝素结合力,在枸橼酸钠作保护剂的样品中,肝素结合组分占68.5%。结论建立的交叉免疫电泳法能够有效用于人AT-Ⅲ研发、生产时样品中肝素结合组分的检测。

低温乙醇法影响蛋白C的抗凝活性的研究

目的人血浆蛋白C(protein C,PC)是在肝脏中合成的一种维生素K依赖性的丝氨酸蛋白酶原,是体内重要的抗凝剂。Cohn组分Ⅳ(Cohn FractionⅣ,CFⅣ)是常规工业化血浆蛋白生产过程(低温乙醇法)中的副产物,其中包含了血浆中大约90%的蛋白C。调查3批次低温乙醇法生产血浆蛋白的原料血浆和产生的CFⅣ中的蛋白C的抗原含量、酰胺酶活性和抗凝活性,分析低温乙醇法是否影响蛋白C的抗凝活性。方法将CFⅣ按1∶10(w/v)加入20mmol/L的枸橼酸钠缓冲液,4℃搅拌5h,抽提出CFⅣ中的蛋白C,并尽可能多的挥发其中的乙醇后,离心(4℃,6500g),弃去沉淀。

干热法对人凝血因子Ⅷ制品中指示病毒灭活效果验证

目的研究100℃,30 min加热法对人凝血因子Ⅷ制品中指示病毒的灭活效果。方法采用细胞感染法,并以猪细小病毒(PPV)、脑心肌炎病毒(EMCV)作为指示病毒,对3批人凝血因子Ⅷ半成品样品进行病毒灭活效果验证。同时对干热前后样品的活性进行检测,以考察灭活方法对制品活性的影响。结果 3批人凝血因子Ⅷ样品经100℃,加热处理30 min后,均无可以检测到的PPV和EMCV病毒,可使病毒滴度下降4个Log以上。对病毒滴度阴性的样品,取其最低稀释倍数孔上清,接种敏感细胞,盲传3代均无可观察到细胞病变。3批样品干热前活性分别为:30.1 IU/mL、27.6 IU/mL、29.8 IU/mL,干热后效价分别为:22.6 IU/mL、20.0 IU/mL、21.6 IU/mL。结论100℃,30 min加热法对人凝血因子Ⅷ半成品中指示病毒PPV和EMCV具有良好的灭活效果,干热后活性损失分别为25%、28%、28%。

冻干人纤维蛋白原质量提高的研究

目的通过调整生产工艺和工艺参数来提高产品的质量。方法健康人血浆化浆后采用离心方法去除冷沉淀,然后进行8%低温乙醇反应获得FI沉淀。FI沉淀进行抽提溶解,过滤后上清进行S/D病毒灭活(0.3%磷酸三丁酯和1%的吐温80);灭活后制品再进行2次8%乙醇反应以去除S/D试剂同时对制品进一步纯化,最终获得F1-2沉淀;对F1-2沉淀进行抽提溶解,过滤后超滤透析浓缩,再进行配制、除菌过滤,分装、冻干;冻干结束进行100℃30 min干热病毒灭活。结果最终的制品的纯度提高了15%左右,外观和可见异物合格,同时收率提高了30%左右。结论用改进工艺后的工艺制备的冻干人纤维蛋白原的质量和收率都得到了提高。

一株好氧DNRA细菌的分离鉴定及其诱导的生物矿化

从实验室硝化生物反应器的生物膜上分离获得一株能够在好氧条件下将硝酸盐异化还原到铵(DNRA)的兼性厌氧菌Q1-2.通过对菌株生理生化测定及16S rDNA基因序列的分析,该菌属于Pseudomonas alcaliphila.摇床上培养3 d后将培养瓶在室温下静止培养.数日后可观察到羽毛状晶体的出现.晶体的形成可能与细菌Q1-2诱导的生物矿化现象有关.

硝化渗滤液回灌对填埋垃圾反硝化、产甲烷及稳定化的影响

垃圾填埋场是重要的甲烷释放源,其有效管理是减缓温室效应的重要环节.通过硝化渗滤液回灌模拟垃圾填埋柱,研究硝化渗滤液在新鲜垃圾和老龄垃圾填埋柱中的脱氮及对垃圾稳定化和产甲烷的影响.结果表明,回灌的硝化渗滤液在不同填埋龄垃圾柱中,均可实现总氧化态氮(Total oxidation nitroge,TON)完全还原.当回灌TON负荷分别达到14.19 g t-1(TS)d-1和10.45 g t-1(TS)d-1时,新、老垃圾柱中甲烷产生开始受到抑制.实验后期,回灌TON负荷增至38.78 g t-1(TS)d-1和30.62 g t-1(TS)d-1时,新、老垃圾填埋柱产甲烷相对抑制率分别达54.10%和95.77%.同时,回灌反硝化对新、老垃圾柱中垃圾降解贡献率(Rd)分别达85%和93%,能有效促进垃圾稳定.

光合菌群利用丁酸产氢的初步研究

对影响光合菌群利用丁酸产氢的主要因子:初始细胞浓度、温度、初始pH值、光照强度和丁酸浓度进行了研究.结果表明,光合菌群在初始细胞浓度0.2～0.3 g/L,温度30～40℃,pH 6.0～9.0,光照强度2000～8000 Lx,丁酸浓度6～30 mmol/L的范围内均可以保持较高的产氢效率.当初始细胞浓度为0.3 g/L、温度30℃、初始pH 7.0、光照强度为4000 Lx、丁酸浓度为30 mmol/L时该光合菌群具有最大产氢量364 mL,最大产氢效率5.4 mol-H_2/mol-丁酸和最大产氢速率22.2 mL/L/h.

培养基简化对甘薯暗发酵和光合发酵藕联产氢的影响

以甘薯为产氢碳源,厌氧污泥和光合菌群为菌源,采用分批培养方式考察培养基简化对暗发酵-光合发酵藕联产氢能力的影响.结果表明:在四种培养基中,无机元素Fe和Mo组成的简化培养基C获得了最高的总氢气产率,折合为7.60 mol H_2/mol葡萄糖.所有培养基液相产物组成均以丁酸和乙醇为主,丁酸含量占到47.5%～68.8%,乙醇含量占到14.3%～34.0%,呈现出混合型发酵特征.其中,简化培养基C的代谢物中丁酸浓度显著增加,乙醇浓度最低.藕联产氢体系的碳平衡分析表明整个产氢代谢过程的碳回收率在95.7%～97.6%之间,其中简化培养基C的甘薯有机碳利用率最高,达到77.2%.甘薯简化培养基组成的藕联产氢体系具有原料高效利用、高产氢效率以及低产氢成本的显著优势.