基于“以学生为中心”教学理念的混合式教学模式在天然药物化学教学中的应用

文章基于研究背景,首先论述了基于“以学生为中心”教学理念的混合式教学模式在天然药物化学教学中的应用,然后分析了基于“以学生为中心”教学理念的混合式教学模式在天然药物化学教学中的应用效果,最后对基于“以学生为中心”教学理念的混合式教学模式在天然药物化学教学中的应用进行了反思。

基于课程思政的天然药物化学教学体系的构建

《天然药物化学》是药学专业的主干课程,如何使学生在掌握专业知识的同时,加强学生思想政治教育是目前面临的新的重要课题。本文在原有的专业课程教学过程中,从课程思政建设的必要性、教学大纲的完善、思政案例挖掘、教学团队建设等方面构建基于思政的天然药物化学教学体系。积极引导学生参与的主动性,实现专业知识与思政元素之间的交叉渗透,达到全课程育人的目的。

蔷薇红景天总黄酮提取物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其活性部位筛选

目的考察蔷薇红景天总黄酮提取物(TFE)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其活性部位筛选。方法采用20μmol·L^(-1)Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤,经AB-8大孔吸附树脂色谱法分离蔷薇红景天TFE,得水及20%、40%、60%、80%、95%乙醇洗脱物(即TFE-0%、TFE-20%、TFE-40%、TFE-60%、TFE-80%和TFE-95%)。计算不同体积分数乙醇洗脱物浸膏得率(赋予0.3权重),紫外分光光度法检测不同体积分数乙醇洗脱物总黄酮含量(赋予0.7权重),综合评价不同体积分数乙醇洗脱物。MTT法检测不同体积分数乙醇洗脱物对损伤后PC12细胞活力的影响;采用倒置显微镜观察细胞形态;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的含量;酶联免疫测定(ELISA)法分别检测细胞上清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌水平。结果TFE-40%总黄酮浓度和浸膏得率的综合得分高于其他不同体积分数乙醇洗脱物。与空白组比较,模型组细胞间隙变大,数目减少,出现细胞碎片,突触明显减少,存活率和SOD水平明显降低(P<0.05),LDH水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,TFE-40%、TFE-60%洗脱物和盐酸多奈哌齐组细胞形态均有一定程度改善,数目增多,突触增加,细胞形态较完整;TFE-40%、TFE-60%、TFE-80%及TFE-95%组的细胞上清液中IL-6、TNF-α、COX-2和IL-1β的水平均明显降低(P<0.05)。结论蔷薇红景天TFE-40%洗脱物对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤具有较好保护作用,为最佳活性部位,其机制可能与拮抗Aβ_(25-35)的神经毒性和抑制细胞炎症的发生有关。

基于网络药理学和动物实验探讨管花肉苁蓉苯乙醇苷对糖尿病肾病的作用

目的 基于网络药理学和动物实验探讨肉苁蓉苯乙醇苷(CPhGs)对糖尿病肾病(DKD)的作用。方法 UHPLC-QE-MS法分析CPhGs化学成分,TCMSP、Swiss Target Prediction数据库筛选核心成分,OMIM、GeneCards数据库获取DKD相关靶点,获得共同靶标后使用STRING网站构建蛋白互作网络,DAVID数据库进行GO、KEGG通路分析,Cytoscape软件构建“CPhGs核心成分-靶点-通路”网络。随机选取10只大鼠作为正常组,其余大鼠用高糖高脂饲料喂养及单次腹腔注射STZ建立DKD模型,分为模型组、达格列净(1 mg/kg)组和CPhGs高、中、低剂量(500、250、125 mg/kg)组,每组10只,药物干预6周,观察一般情况,每周称定体质量并检测血糖;末次给药后收集24 h尿液,检测24 h尿蛋白总量(24-UTP);腹主动脉取血并处死,分离血清,检测尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平,HE染色及Masson染色观察肾组织病理变化,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测肾组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS3蛋白表达。结果 UHPLC-QE-MS技术共检测得到699种成分,经筛选后获得CPhGs核心成分16种,相关靶点323个,CPhGs与DKD共有靶点99个,关键靶点为STAT3、SRC、EGFR等。KEGG通路分析筛选了151条信号通路,显示IL-17信号通路、PI3K/Akt信号通路、TNF信号通路等可能在CPhGs治疗DKD的过程中发挥关键作用。CPhGs能增加DKD大鼠体质量(P<0.01),减少饮水量(P<0.01),调节糖脂代谢,降低24-UTP、BUN水平(P<0.01),改善肾脏组织病理损伤,降低肾组织p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达(P<0.01),提高SOCS3蛋白表达(P<0.01)。结论 CPhGs通过多成分、多靶点、多途径干预DKD,可能通过抑制DKD大鼠肾脏JAK2/STAT3信号通路来发挥作用。

基于谱效关系的茴香根皮抗肝纤维化有效成分筛选及其机制探讨

为探讨茴香根皮治疗肝纤维化的化学成分,揭示其药效物质基础和作用机制。本研究应用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术定性鉴别茴香根皮95%乙醇提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位的化学成分,根据质谱裂解规律和对照品验证及文献检索推测鉴定了各组分的58个共有化合物;采用MTT法检测各组分对HSC-T6细胞增殖的影响,谱效关系筛选抗肝纤维化潜在活性化合物,结果显示茴香根皮抗肝纤维化贡献较大的成分是二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱、异莨菪亭;体外实验验证单体化合物抗肝纤维化活性及机制,结果表明二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱和异莨菪亭对活化的HSC-T6具有较好的抑制作用(P<0.01、P<0.001),均可以抑制α-SMA的表达(P<0.01、P<0.001);二氢辣椒碱和去氢骆驼蓬碱具有较强的促凋亡作用,可以下调Bax/Bcl-2和Caspase3的相对表达量(P<0.05、P<0.01)。表明茴香根皮抗肝纤维化的药效物质可能为二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱和异莨菪亭、东莨菪内酯、7-羟基香豆素等,其机制可能是通过抑制肝星状细胞活化、调节Bax/Bcl-2的表达发挥作用,体现了茴香根皮多成分多靶点抗肝纤维化的作用特点。

护肝布祖热方联合奥沙利铂对肝细胞癌荷瘤裸鼠的减毒增效作用及机制

目的 研究护肝布祖热方联合奥沙利铂对肝细胞癌荷瘤裸鼠的减毒增效作用及机制。方法 从40只裸鼠中选取8只作为空白组(生理盐水),其余32只裸鼠皮下接种人肝癌Huh7细胞构建荷瘤裸鼠模型。将造模成功的32只裸鼠随机分为模型组(生理盐水,灌胃)、奥沙利铂组(10 mg/kg,腹腔注射)、护肝布祖热方组(0.69 g/kg,灌胃)和联合用药组(腹腔注射10 mg/kg奥沙利铂+灌胃0.69 g/kg护肝布祖热方浸膏),每组8只。每天灌胃给药/生理盐水1次,连续32 d;每7天腹腔注射给药1次,共5次。实验期间,观察各组裸鼠一般情况,每4 d测量1次肿瘤体积;给药第30天,检测裸鼠热刺激缩足潜伏期;给药结束后,检测各组裸鼠的抑瘤率、脾脏系数、血常规指标以及血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和肌酐水平,观察裸鼠肿瘤组织病理形态变化,检测肿瘤组织中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、选择性自噬接头蛋白p62、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶3(Caspase-3)的表达。结果 与模型组比较,奥沙利铂组裸鼠肿瘤体积、瘤重以及全血中白细胞、红细胞数量和脾脏系数均显著减小/降低(P<0.01),热刺激缩足潜伏期和血清中AST、肌酐水平均显著延长/升高(P<0.05或P<0.01)。与奥沙利铂组比较,联合用药组裸鼠肿瘤体积、瘤重均显著减小/降低(P<0.01),全血中白细胞、红细胞、血小板数量和脾脏系数均显著增加/升高(P<0.05或P<0.01),热刺激缩足潜伏期和血清中AST、肌酐水平均显著缩短/降低(P<0.01);肿瘤组织中LC3、Bax和Caspase-3蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01),p62、Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01)。结论 护肝布祖热方通过诱导凋亡和自噬增强奥沙利铂对裸鼠的抑瘤作用,并可缓解奥沙利铂引起的外周神经毒性、血液毒性、肝肾毒性和免疫器官毒性。

肉苁蓉复方咀嚼片制备工艺及质量控制的研究

目的研究肉苁蓉复方咀嚼片的制备工艺及质量控制方法。方法基于中医理论对肉苁蓉、黄精和党参进行配伍,将其药材提取物与若干辅料等量递加混合,再加入硬脂酸镁,混合后过80目筛3次,每次混合时间超过5 min,压片制成肉苁蓉复方咀嚼片;以外观、硬度和口感等为指标进行工艺初步筛选,用正交实验法优选最佳处方;对用最佳处方制得的咀嚼片进行质量评价,用HPLC法测定有效成分的含量;通过研究肉苁蓉复方咀嚼片低、中、高剂量对小鼠体质量、力竭游泳时间及疲劳代谢产物等的影响来验证该咀嚼片在缓解体力疲劳方面的功效。结果3批工艺验证结果显示,用最佳处方制得的咀嚼片口感细腻、酸甜适宜,片质量为0.5 g·片^(−1),硬度>8 kg·mm^(−2)、脆碎度<1%;每片含松果菊苷>0.025 g,松果菊苷>0.003 g。0.25、0.50、1.50 g·kg^(−1)·d^(−1)剂量的肉苁蓉复方咀嚼片均能显著延长小鼠力竭游泳时间,降低尿素氮和乳酸的含量,增加肝糖原、肌糖原的含量,差异有统计学意义(P<0.01)。结论优选了肉苁蓉复方咀嚼片的处方工艺。用最优处方制备的肉苁蓉复方咀嚼片的外观性状、口感、硬度及脆碎度等均达到预期要求。肉苁蓉复方咀嚼片对体力疲劳有缓解作用。

护肝布祖热颗粒定性与定量质量控制方法的研究

目的建立护肝布祖热颗粒中各药材的薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)鉴别和主要成分的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)含量测定方法,完善其质量标准,以加强制剂质量的可控性。方法用TLC法分别对制剂中菊苣根和菊苣子中的秦皮乙素、小茴香和茴香根皮中的东莨菪素、芹菜根和芹菜子中的芹菜素以及菟丝子中的金丝桃苷进行鉴别。建立HPLC法测定护肝布祖热颗粒中秦皮乙素的含量。用SunFire C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇(A)-1 mL·L^(-1)磷酸溶液(B),梯度洗脱:0~2 min,5%A;2~5 min,5%~27%A;5~30 min,27%A。柱温为30℃;流速为1 mL·min^(-1);进样体积为10μL;检测波长为349 nm。结果护肝布祖热颗粒中秦皮乙素、东莨菪素、芹菜素和金丝桃苷经TLC鉴别,斑点清晰,分离度较好,缺方阴性对照无干扰;秦皮乙素在0.16~4.00μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r^(2)=0.9997,n=6),精密度、重复性、稳定性、加样回收率的RSD值均小于2.00%,该批次护肝布祖热颗粒中秦皮乙素的平均含量为2.66μg·g^(-1),RSD值为0.79%。结论建立的定性鉴别和含量测定方法操作简单,重复性好,可用于护肝布祖热颗粒的质量控制。

中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值及血小板计数与淋巴细胞计数比值对反应性关节炎诊断效能的分析

目的:探讨中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值(NLR)和血小板计数与淋巴细胞计数比值(PLR)对反应性关节炎(ReA)诊断效能及与疾病治疗的关系。方法:选取2018年1月至2021年12月山西白求恩医院风湿免疫科确诊的79例ReA患者为ReA组,92例健康体检者为健康对照组。比较ReA组与健康对照组的NLR、PLR、血常规、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR),采用Spearman相关分析性ReA患者NLR、PLR与血常规、CRP、ESR的相关性,且通过绘制受试者工作特征曲线(ROC)评价NLR、PLR及在ReA的诊断价值。最后比较治疗前后单核细胞计数、淋巴细胞计数、CRP、ESR和NLR、PLR的变化。结果:ReA组NLR、PLR高于健康对照组,且感染<2周发病的ReA患者NLR、PLR高于感染≥2周发病者(P<0.05)。ReA组NLR、PLR与白细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数、CRP、ESR呈正相关,PLR与血小板计数呈正相关,NLR、PLR与淋巴细胞计数呈负相关(P<0.05)。根据ROC曲线,NLR诊断ReA的最佳截断值为3.41(敏感性为57.00%,特异性为96.70%,AUC=0.81),PLR诊断ReA的最佳截断值为140.58(敏感性为77.20%,特异性为77.20%,AUC=0.85),且NLR与PLR联合诊断的敏感性为78.80%,特异性为91.00%,AUC=0.85;而CRP诊断ReA的最佳截断值为8.16(敏感性为78.50%,特异性为100.00%,AUC=0.89),ESR诊断ReA的最佳截断值为19.50(敏感性为84.80%,特异性为96.70%,AUC=0.91),NLR、PLR联合诊断的效能高于NLR、PLR单一检测,而略低于CRP和ESR(Z=4、Z=3.58,P<0.05)。进一步比较ReA患者治疗前后,NLR、PLR显著减低(P<0.05)。结论:NLR、PLR可用于辅助诊断ReA,且对患者的感染史具有一定的指导意义。两者在反映治疗效果具有一定的临床价值,两者联合的诊断效果更好,但其诊断效果不如CRP和ESR。

护肝布祖热方对大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤的影响及机制

目的研究护肝布祖热方(HBF)对大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤的影响及潜在机制。方法将大鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、熊去氧胆酸(UDCA)组(阳性对照,60mg/kg)和HBF低、中、高剂量组(HBF-L、HBF-M、HBF-H组,0.4、0.8、1.6g/kg),每组6只。各药物组大鼠每天灌胃相应药液1次,连续7d;control组和model组大鼠灌胃等体积水。实验第5天,除control组外,其余各组大鼠均单次灌胃α-异硫氰酸萘酯橄榄油溶液(100 mg/kg)建模。造模48 h后,检测大鼠血清中肝功能指标(天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素)含量和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶]水平,观察肝组织病理形态变化,检测肝组织中炎症相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)]和法尼酯X受体(FXR)信号通路相关因子[FXR、小异源二聚体伴侣受体(SHP)、多药耐药蛋白2(MRP2)、胆盐输出泵转运蛋白(BSEP)、钠离子依赖性牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)、有机阴离子转运多肽2(OATP2)和胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)]mRNA,以及FXR信号通路相关蛋白(FXR、MRP2、BSEP、NTCP)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达情况。结果与model组比较,HBF-H组大鼠血清中上述肝功能指标含量和MDA水平,肝组织中上述炎症相关因子mRNA、CYP7A1 mRNA的表达水平以及NF-κBp65蛋白的相对表达量均显著降低,血清中GSH水平和肝组织中FXR、SHP、MRP2、BSEP、NTCP、OATP2mRNA的表达水平以及FXR、MRP2、BSEP、NTCP蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01),肝组织病理改变明显好转;HBF-L组、HBF-M组、UDCA组大鼠均只有部分指标显著逆转(P<0.05或P<0.01)。结论HBF可预防大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤,此作用可能与激活FXR信号通路、减轻炎症和氧化应激有关。

肉苁蓉苯乙醇总苷对胆汁淤积型肝病小鼠的预防保护作用

目的考察肉苁蓉苯乙醇总苷对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthalene isothiocyanate,ANIT)诱导的小鼠胆汁淤积性肝病的预防保护作用。方法采用C57小鼠连续灌胃给予肉苁蓉苯乙醇总苷125、250、500 mg·kg^(-1)(肉苁蓉苯乙醇总苷低、中、高剂量组)和阳性药甘利欣100 mg·kg^(-1)7 d,每日给药1次,第5天给药后2 h单次灌胃给予ANIT 80 mg·kg^(-1)诱导造模,模型组小鼠等量灌胃生理盐水,其余各组小鼠继续用药干预2 d后收集小鼠血液与组织样本。检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)、胆汁酸(TBA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,观察肝脏组织病理学变化。结果与模型组相比,肉苁蓉苯乙醇总苷各组能够明显降低ANIT模型小鼠中ALT、AST、AKP、TBA、TBIL和MDA水平(P<0.05);肉苁蓉苯乙醇总苷中、高剂量组显著提高ALB、GSH-Px和SOD的活性(P<0.05)。结论肉苁蓉苯乙醇总苷可能通过改善细胞膜通透性和消除自由基氧化,从而发挥对ANIT所诱导的胆汁淤积性肝病小鼠的预防保护作用。

新疆沙枣果实不同部位总酚的含量测定

以没食子酸为对照品,采用Folin-Ciocalteu比色法测定新疆不同产地沙枣果肉及种子中总酚含量。没食子酸在2～12μg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.9991),平均回收率为98.80%,RSD为1.81%。7个产地沙枣种子中的总酚含量均明显高于果肉,种子总酚含量/果肉总酚含量约为3～5倍。实验方法简便、快速、准确,可用于沙枣果实的质量控制。

“初级临床实践”与思想政治教育有机融合的实践与思考

推进高校专业课程思政建设,发挥课程育人作用。为提高教学质量,培养政治立场坚定的创新型人才,在“初级临床实践”课堂上既要满足构筑学生知识体系、培养合格药学人才的需求,又要把思政元素融入课堂,引导学生树立正确的价值观。根据“初级临床实践”的特点,充分挖掘课程中包含的显性和隐性思政元素,将其润物无声地融入“初级临床实践”课程教学,使“初级临床实践”课程与思想政治理论课同向同行、协同育人,从而提升课程思政在高校教育中的育人功效。

反相高效液相色谱法同时测定新疆贯叶连翘中芦丁和金丝桃苷的含量

目的：建立同时测定贯叶连翘中芦丁和金丝桃苷含量的反相高效液相色谱法。方法：采用Symmetry Shield RP8色谱柱(4．6mm×150mm，5μm)，以甲醇-0．5％磷酸(50：50，用三乙胺调pH至3．0)为流动相，流速为1mL·min^-1，柱温30℃，检测波长为360nm。结果：样品中芦丁和金丝桃苷平均回收率分别为97．6％和99．3％，RSD分别为1．3％和1．7％，n=6；芦丁和金丝桃苷的线性范围分别为0．32～1．58μg(r=0．9997)和0．02～0．10μg(r=0．9996)。结论：该方法分析简便、快速，结果准确可靠，灵敏度高。

沙枣种子总酚的提取及纯化

目的:研究沙枣种子总酚的提取及纯化工艺。方法:采用单因素试验和L9(34)正交试验法,筛选最佳提取工艺,并考察大孔吸附树脂法和离子沉淀法对总酚粗取物的纯化工艺。结果:沙枣种子总酚的最佳制备工艺为:样品加30倍量40%甲醇溶液回流提取3次,每次1h,减压浓缩,得总酚粗提物。粗提物上AB-8大孔吸附树脂柱,用水洗至流出液无糖后,再用2倍柱体积的40%乙醇洗脱,收集流份,浓缩干燥即得。结论:该制备工艺提取纯化沙枣总酚效果较好,工艺的重复性和稳定性好,制备的3批提取物中总酚平均含量为52.17%。

双波长薄层扫描法测定维吾尔药琐琐葡萄中齐墩果酸的含量

目的 用薄层扫描法对维吾尔药琐琐葡萄中齐墩果酸进行定量分析。方法 双波长反射锯齿扫描 ,λS=5 2 0nm ,λR=6 5 0nm ;狭缝宽 0 4mm× 0 4mm ;线性化器SX =3;展开剂为环己烷 -乙酸乙酯 (7∶3) ;显色剂用 10 %硫酸乙醇溶液。结果 琐琐葡萄中齐墩果酸的含量为 0 2 0 1% ,齐墩果酸标准曲线线性范围为 2～ 6 μg ,平均回收率为 98 2 % ,RSD =3 1% (n =9)。结论 方法准确可靠 ,回收率好 ,可为维吾尔药材琐琐葡萄的品质评价提供参考。

HPLC测定新疆贯叶金丝桃中金丝桃素的含量

目的 建立测定新疆贯叶金丝桃中金丝桃素含量的测定方法。方法 采用HPLC法 ,KromasilODS - 1色谱柱 (4 .6mm× 2 0 0mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 -pH 6 .5磷酸盐缓冲液 (90∶10 ) ,流速 1ml·min- 1 ,柱温 4 0℃ ,检测波长 5 88nm。结果 金丝桃素和其他组分可达基线分离 ,线性范围为 0 .0 16 5～ 0 .0 82 5 μg(r=0 .9999) ,平均回收率为 10 1.1% ,RSD =3.7% (n =9)。 结论 本法操作简便快速 ,灵敏准确。新疆贯叶金丝桃药材中金丝桃素的含量略高于美国药典的要求。

“天然药物化学实验”模块化教学设计初探

模块化教学是依据教学目的将教学内容划分成不同层次模块,每个教学模块中都包含了特定的教学内容和教学目标,各模块之间相互关联、层层递进,构成一个完整的教学系统。该文探索了天然药物化学实验课程模块化教学设计思路,力求提高教学效果,达到提升学生创新研究能力的目的。

高效液相色谱法测定岩舒注射液中苦参碱的含量

目的 :建立岩舒注射液中苦参碱的反相高效液相色谱法。方法 :采用C18柱 ,流动相为甲醇 水 氨水 (195∶6 0∶2 .2 5 ) ,检测波长为 2 2 0nm。结果 :苦参碱在 0 .0 5 2～ 1.0 4μg范围内线性关系良好 (r =0 .9985 ) ,日内和日间精密度RSD均小于2 .0 % ,方法的平均回收率为 99.5 %。结论 :本法简便、快捷 ,结果准确。