非严格厌氧条件下酪酸菌的固态培养

为了获得酪酸菌在工业生产上的便利固态培养条件,以活菌数为考察指标,研究酪酸菌在以豆粕为固态基质在非严格厌氧条件下的生长情况。首先采用单因素实验确定培养温度、培养时间及培养基的含水量对活菌数的影响,然后进行正交实验,获得最优的培养条件。结果表明,最优的培养条件为:培养时间24h,培养温度35℃,培养基含水量60%,该条件下培养出的酪酸菌活菌数可达(10.23±0.26)×10~6 CFU·g^(-1)。

2-溴甲基-3-羟基吡啶合成工艺的改进

2-溴甲基-3-羟基吡啶是合成常山酮的中间体,以3-羟基吡啶为起始原料,经胺甲基化、醋酐乙酰化、浓氢溴酸水解3步反应,合成2-溴甲基-3-羟基吡啶,总收率达56.79%。通过MS和1 H NMR对化合物结构进行表征。该方法原料是工业级,反应条件平和,对设备的要求不高,可以满足工业化路线的要求。

2.4.6-三羟基苯乙酮的合成及条件优化

介绍了一种全新的2.4.6-三羟基苯乙酮的合成方法,以柚皮苷为原料,经15%KOH开环得到根皮乙酰苯-4'-新橙皮苷,然后8%的稀硫酸去掉糖基得到2.4.6-三羟基苯乙酮,对反应条件进行优化,总收率达到81%。此路线原料柚皮苷是大宗产品,反应条件温和,实验重复性高,适合工业化生产。

类胡萝卜素清除自由基活性构效关系

为探讨类胡萝卜素结构对其自由基清除能力的影响,采用四种自由基清除方法分别测定β-胡萝卜素、叶黄素、虾青素、番茄红素的自由基清除能力,对十三种类胡萝卜素进行了量子化学计算,通过AM1法对其结构进行初步优化后,再用密度泛函方法(Density functional theory,DFT)在B3LYP/6-311(d,p)水平上进一步优化计算。结果表明,不同种类类胡萝卜素对不同的自由基清除能力不同,虾青素最强,其次是番茄红素、叶黄素,β-胡萝卜素最弱;根据前线轨道能级差、NPA净电荷分布发现,类胡萝卜素多个共轭双键的特殊结构是其具有自由基清除能力的重要原因,其端环上的基团能够促进分子的活性,酮基是对其活性影响最大的基团,其次是羟基与环氧基,这与实验结果相吻合,表明前线轨道能级差、NPA电荷分布是表征类胡萝卜素自由基清除能力的重要参数。

黑曲霉所产α-L-鼠李糖苷酶酶学性质及其在异槲皮素制备上应用

本文前期筛选得到一株产α-L-鼠李糖苷酶的黑曲霉,并利用该酶转化芦丁制备异槲皮素。该黑曲霉在以芦丁作为诱导剂的培养基中生长,对发酵液用70%硫酸铵沉淀,透析得到α-L-鼠李糖苷酶的粗酶液,酶活为798 U/m L,用此酶液对芦丁进行水解制得异槲皮素。采用SDS-PAGE电泳测定粗酶液的酶蛋白分子量为55 k Da,经优化该酶的最适温度为55℃,最适p H为5.5,在此条件芦丁转化45 min后的转化率高达到95%以上。用柱层析处理能得到纯度99%以上的异槲皮素。该酶同样具有良好的热稳定性和高催化活性。本研究可为α-L-鼠李糖苷酶用于天然产物的脱糖基化这一类生物转化提供有效借鉴。

黑曲霉所产α-L-鼠李糖苷酶制备普鲁宁

前期筛选得到一株产α-L-鼠李糖苷酶的黑曲霉,并利用该酶转化柚皮苷制备普鲁宁。该黑曲霉在以芦丁作为诱导剂的液体培养基中发酵72h,对发酵液用70%硫酸铵沉淀,透析得到α-L-鼠李糖苷酶的粗酶液。经优化该酶的最适转化温度为50℃,最适pH为5.0,在此条件柚皮苷转化2h后的转化率高达到97%以上。本研究可为α-L-鼠李糖苷酶用于制备普鲁宁这一类生物转化提供有效借鉴。