二乙酰吗啡致大鼠小脑颗粒神经元细胞凋亡过程中C-Jun、Cytc和Caspase-9的作用

背景:二乙酰吗啡药物可导致神经元损伤,但是目前二乙酰吗啡是否诱导神经元细胞凋亡,C-jun、Cytc和Caspase-9因子是否参与此过程尚未见报道。目的:探讨C-jun、Cytc、Caspase-9是否参与二乙酰吗啡诱导神经元细胞凋亡过程。方法:将SD乳鼠小脑颗粒神经元细胞体外培养7 d,采用不同质量浓度二乙酰吗啡(0,10,40,80,100,120 mg/L)干预神经元细胞24 h,在倒置荧光显微镜下观察神经元细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用100 mg/L二乙酰吗啡和20μmol/L JNK抑制剂SP600125作用于细胞24 h,通过免疫荧光和蛋白印迹方法检测C-jun、Cytc和Caspase-9蛋白的表达。结果与结论:①在不同质量浓度二乙酰吗啡干预下,随着给药质量浓度的增加,神经元细胞胞体萎缩、亮度降低,部分呈灰黑色,细胞碎裂,神经元网状结构不同程度的消失,细胞改变数量逐渐增加;②随着给药质量浓度的增加,形态改变的细胞数量明显增多(P <0.01),细胞凋亡率也显著增高(P <0.01);③与对照组相比,100 mg/L二乙酰吗啡作用神经元细胞时,二乙酰吗啡组C-jun、Cytc和Caspase-9蛋白呈高表达,差异有显著性意义(P <0.05);与二乙酰吗啡组相比,二乙酰吗啡+SP600125组C-jun、Cytc和Caspase-9蛋白表达明显下调,差异有显著性意义(P <0.05);④结果表明,二乙酰吗啡可诱导小脑颗粒神经元细胞凋亡,C-jun、Cytc和Caspase-9参与了二乙酰吗啡致神经元细胞凋亡的过程。

进展期Siewert Ⅱ型食管胃结合部腺癌三种不同术式治疗后患者生活质量的比较

目的:对进展期SiewertⅡ型食管胃结合部腺癌三种不同术式治疗后患者生活质量进行比较,为优化进展期SiewertⅡ型食管胃结合部腺癌患者的手术治疗提供理论依据。方法:选取西安交通大学第一附属医院2015年10月至2017年10月收治的进展期SiewertⅡ型食管胃结合部腺癌患者105例。根据术式将患者分为三组,每组35例,分为全胃切除组(A组)、传统近端胃切除组(B组)和双通道吻合组(C组)。采用癌症患者总体生活质量量表(quality of life questionnaire core-30,QLQ-C30)、食管胃结合部癌专用量表(quality oflife questionnaire oesophagogastric-25,QLQ-OG25)进行量化后,比较上述三组患者术后半年和1年的生活质量差异。结果:QLQ-C30:术后半年:C组在总体生活质量、躯体功能、疲乏及呼吸困难等方面均优于A组和B组(P<0.05),情绪功能优于A组(P<0.05);A组在角色功能、疲乏、腹泻等方面均差于B组和C组(P<0.05);B组的食欲减退症状重于A组及C组(P<0.05)。术后1年:C组总体生活质量、躯体功能及情绪功能等方面均优于A组及B组(P<0.05),角色功能优于A组(P<0.05);A组疲乏与腹泻症状均重于B组和C组(P<0.05);B组食欲减退症状重于A组和C组(P<0.05)。QLQ-OG25:术后半年:A组在饮食限制、焦虑、腹泻等方面症状均差于B组和C组(P<0.05);B组返流症状重于A组和C组(P<0.05)。术后1年:A组的焦虑、腹泻症状均重于B组和C组(P<0.05);B组反流症状重于A组和C组(P<0.05)。结论:对于进展期SiewertⅡ型食管胃结合部腺癌,采用双通道吻合法的患者术后生活质量优于传统近端胃切除及全胃切除的患者,该术式值得临床推广。

腹腔镜微创手术治疗局部进展期食管胃交界部腺癌术中腹腔冲洗灭菌注射用水用量对疗效的影响

目的:探讨术中灭菌注射用水在腹腔冲洗中的用量对腹腔镜微创手术治疗局部进展期食管胃交界部腺癌(AEG)患者疗效的影响。方法:选取2013年10月至2014年12月行腹腔镜手术治疗的进展期AEG患者120例,按照灭菌注射用水在腹腔冲洗中的用量分为4组,每组30例。A组:1 000 mL;B组:3 000 mL;C组:5 000 mL;D组:10 000 mL。比较4组患者的手术并发症及不良反应发生率、术后局部复发率、转移率及无进展生存率。结果:4组患者手术并发症的发生率、不良反应发生率未见明显差异(P>0.05)。4组患者的肝转移率、1年无进展生存率未见明显差异(P>0.05),A、B组的局部复发率、转移率和无进展生存率无明显差异(P>0.05),C、D组的局部复发率、转移率和无进展生存率无明显差异(P>0.05)。但是C、D组的局部复发率和腹腔转移率均低于A、B组,3年及5年无进展生存率均高于A、B组(P<0.05)。按照肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移分层情况,可见在T_2期和无淋巴结转移的患者中,4组的局部复发率、转移率、无进展生存率未见明显差异(P>0.05);而在肿瘤浸润较深的T_3或T_(4a)期以及有淋巴结转移的患者中,虽然4组患者的肝转移率、1年无进展生存率未见明显差异(P>0.05),但是C、D组的局部复发率和腹腔转移率均低于A、B组,3年及5年无进展生存率均高于A、B组(P<0.05),而且D组的腹腔转移率还低于C组(P<0.05),3年及5年无进展生存率还高于C组(P<0.05)。结论:随着冲洗腹腔的灭菌注射用水的用量增加,能够有效降低患者的局部复发率和腹腔转移率,提高患者的无进展生存率,延长患者的无进展生存期,但是无法降低肝转移发生率,对肿瘤浸润较深、有淋巴结转移的患者,应提倡此手术操作。

二乙酰吗啡干预离体乳鼠心肌细胞动作电位和钙离子电流的变化

背景:阿片类药物可调控心肌细胞膜电位和Ca^(2+)电流的变化,但是目前二乙酰吗啡是否诱导心肌节律、细胞动作电位和钙离子电流改变尚未见报道。目的:探讨二乙酰吗啡对离体SD乳鼠心肌细胞动作电位和钙离子电流的影响。方法:(1)体外培养SD乳鼠心肌细胞,采用5个浓度二乙酰吗啡(0,10^(-2),10^(-3),10^(-4),10^(-5)mol/L)和20 mol/L维拉帕米作用于心肌细胞;(2)将细胞分为对照组、二乙酰吗啡组、二乙酰吗啡+维拉帕米组。后2组分别以二乙酰吗啡、二乙酰吗啡+维拉帕米(浓度20μmol/L)联合干预心肌细胞;对照组加入等量PBS。实验于2018-05-21经新疆医科大学第一附属医院动物实验医学伦理委员会批准,批准号IACUC201805-K1。结果与结论:(1)当不同浓度二乙酰吗啡干预心肌细胞24 h后,心肌细胞形态异常数量亦随其浓度的改变而明显增加,呈剂量依赖性改变。当二乙酰吗啡浓度逐渐升高,细胞存活数量亦逐渐减少,细胞胞质体积缩小,胞膜收缩,伪足减少,细胞核结构模糊。(2)与对照组相比,当加入二乙酰吗啡干预心肌细胞后,心肌细胞自发性搏动频率和节律差异有显著性意义。静息膜电位负值降低,动作电位中动作电位时程显著增加,动作电位幅度显著减小。(3)与对照组相比,二乙酰吗啡组中心肌膜电位改变数量明显增加,当加入维拉帕米后,心肌膜电位改变细胞数量有所降低。与对照组相比,心肌膜电位改变细胞数量有所升高。(4)提示二乙酰吗啡可致离体SD乳鼠心肌细胞形态异常,心肌自发性搏动频率和节律显著增加,心肌细胞膜电位和动作电位发生改变,钙通道阻滞剂维拉帕米对二乙酰吗啡引起的心肌细胞节律异常有一定改善作用。

CASQ2和RyR2在二乙酰吗啡致心肌细胞节律异常中的作用

目的探讨二乙酰吗啡致心肌细胞节律改变与心肌钙离子通道异常之间的关系,探究肌钙集蛋白2(CASQ2)与兰碱尼受体2(RYR2)因子与钙通道之间的联系,明确其是否参与心肌细胞钙离子通道异常及心律失常的过程。方法取出生3日龄SD大鼠乳鼠的心肌细胞进行体外培养,分为正常对照组(N组)、二乙酰吗啡干预组(H组)、二乙酰吗啡加维拉帕米干预组(H+V组),二乙酰吗啡浓度为10^(-4) mol/L,药物作用时间24 h。在荧光倒置显微镜下,观察心肌细胞形态和收缩频率节律改变;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测CASQ2和RyR2因子的mRNA及蛋白表达,观察H组、N组及H+V组上述2个因子表达含量的变化情况。结果 (1)细胞培养:原代心肌细胞形态多样,呈三角形、长梭形和多边形,细胞核圆形或类圆形,大小正常核膜光滑,细胞间通过伪足相互连接,连接成片的细胞搏动节律一致。(2)心肌细胞形态及节律改变:与N组相比,H组和H+V组心肌细胞形态发生一定程度的改变,收缩频率降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与N组相比,H组和H+V组中CASQ2和RYR2蛋白和mRNA表达量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与H组相比,H+V组中CASQ2和RYR2蛋白和mRNA表达量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二乙酰吗啡可致心肌细胞自发性搏动频率和节律异常,CASQ2和RyR2因子参与二乙酰吗啡致心肌细胞自发性搏动频率和节律异常的过程。关键字:

Gankyrin基因在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的研究肿瘤相关基因Gankyrin在食管鳞状细胞癌中的表达情况及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测食管鳞状细胞癌患者150例,观察Gankyrin基因的表达,同时回顾性研究Gankyrin基因的表达与相关临床病理参数如年龄、性别、分化程度、浸润深度及淋巴结转移情况等和术后生存率之间的关系,并做COX多因素分析,分析影响预后的独立性因素。结果 150例食管鳞状细胞癌患者组织中,Gankyrin基因的阳性表达率为68.7%(103/150),食管正常组织中Gankyrin基因的阳性表达率为16.0%(8/50),差异有统计学意义(P <0.01)。食管鳞状细胞癌组织中Gankyrin基因的表达与年龄和性别无关(P>0.05),而与分化程度、浸润深度和淋巴结转移情况有关,差异有统计学意义(P <0.01)。Gankyrin基因阴性者,术后3a生存率为36.1%,而阳性者术后3a生存率仅为14.6%,Gankyrin基因阳性者术后生存率明显低于Gankyrin基因阴性者,差异有统计学意义(P<0.05)。COX多因素分析显示,分化程度、浸润深度和淋巴结转移情况是影响患者预后的的独立因素。结论Gankyrin基因表达与食管鳞癌的浸润、转移有一定的相关性,可作为食管癌的分化程度判定、预后判定和预测转移的重要参考指标。

c-Jun和Bcl-2在海洛因所致大鼠小脑颗粒细胞凋亡中的作用

目的探究海洛因致小脑颗粒细胞凋亡中c-Jun氨基端激酶(c-Jun)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白质的表达情况,分析c-Jun和Bcl-2与海洛因影响小脑颗粒细胞凋亡的关系。方法取8只出生7d的SD大鼠小脑颗粒细胞进行体外培养,随机分为实验组(以80 mg/L海洛因干预)、抑制剂组(以80 mg/L海洛因和10μmol/L CEP1347干预)、正常组(正常培养的小脑颗粒细胞)。采用Hoechst 33258荧光染色技术检测细胞凋亡率,采用免疫荧光、Western blot检测c-Jun和Bcl-2蛋白的表达情况。结果实验组细胞凋亡率较抑制剂组及正常组高(P<0.05);实验组与正常组比较,c-Jun蛋白含量明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白含量下调(P<0.05);抑制剂组中c-Jun蛋白含量较实验组明显下降(P<0.05)。结论 c-Jun和Bcl-2参与海洛因致小脑颗粒神经元细胞凋亡过程,并且可能是c-Jun氨基末端激酶信号通路中的重要候选促凋亡因子。

荷叶黄酮对乳酸杆菌和双歧杆菌抗氧化能力的协同作用研究

为研究荷叶黄酮对乳酸杆菌和双歧杆菌抗氧化能力的影响,0.25 mg/m L的荷叶黄酮添加至培养基培养保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus A105)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis B211),并提取细胞裂解液,依次从自由基清除能力、抗脂质过氧化能力及抗氧化物质活性三方面评估其抗氧化能力。结果显示,0.25mg/m L的荷叶黄酮提高了动物双歧杆菌(54.9%)及保加利亚乳杆菌(14.8%)对O-·2清除能力;其对保加利亚乳杆菌清除DPPH自由基能力稍有提升,对动物双歧杆菌清除DPPH自由基能力稍有抑制;其对保加利亚乳杆菌抗脂质过氧化能力提升率达658%,具有显著的协同增效作用。同时发现:经添加0.25 mg/m L的荷叶黄酮至培养基后,动物双歧杆菌和保加利亚乳杆菌胞内超氧化物歧化酶(SOD)酶活及谷胱甘肽(GSH)活力得到显著的提高。结果表明,荷叶黄酮的添加对保加利亚乳酸杆菌和动物双歧杆菌的抗氧化活性具有促进作用,且对保加利亚乳酸杆菌抗脂质过氧化能力具有明显的协同促进作用,可能与其胞内SOD酶活及GSH活力得到的显著的提升有关,具有潜在的应用价值。

二乙酰吗啡致心肌细胞节律异常中κ受体影响LDH、AST表达的作用

目的:探究κ受体在二乙酰吗啡致心肌细胞节律异常中的作用机制。方法:取出生3天SD大鼠乳鼠心肌细胞体外培养7天后,用二乙酰吗啡和选择性κ受体阻断剂作用心肌细胞30min,检测乳酸脱氢酶(LDH)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果:与对照组相比,在二乙酰吗啡干预下(H组)LDH和AST明显升高,H+B组中LDH和AST值较H组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:κ受体参与二乙酰吗啡致心肌节律异常,同时也是影响心肌细胞释放LDH和AST的因素。

TNF-ɑ、Rho、C-AbI蛋白表达对海洛因致大鼠小脑颗粒神经元细胞凋亡的作用和意义

目的探讨Ras同系物(Rho)、肿瘤坏死因子(TNF-ɑ)和非受体酪氨酸激酶(C-AbI)蛋白表达在海洛因诱导大鼠小脑颗粒细胞凋亡过程中的作用表达和意义。方法成功建立海洛因成瘾模型后继续增加海洛因用量,并分为对照组、海洛因成瘾组、海洛因成瘾10 d组、海洛因成瘾20 d组、海洛因成瘾30 d组和海洛因成瘾40 d组,通过苏木精-伊红(HE)染色、电镜进行形态观察,凋亡试剂盒检测凋亡,免疫组织化学和免疫印迹检测TNF-ɑ、Rho、C-AbI蛋白表达情况。结果海洛因成瘾组大鼠小脑白质神经元细胞数目减少,结构紊乱,神经细胞内出现小空泡,多个小空泡可以合并较大腔隙;神经元细胞突起减少、水肿,分布在毛细血管周围或神经毡内,与周围水肿的突触形成疏松的筛孔状。神经元细胞出现皱缩、胞浆碎裂、线粒体嵴肿胀消失、出现断裂,空泡化,胞核体积明显缩小并变形、核基质减少、消失、水肿。在海洛因成瘾(10 d、20 d、30 d、40 d)组中,神经元细胞凋亡数量随着成瘾天数延长而逐渐增多,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。在大鼠成瘾模型各组中,TNF-ɑ和Rho蛋白随给药时间增加而逐渐增多,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而C-AbI蛋白在海洛因成瘾各组中均无明显变化,与对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论小脑神经元细胞凋亡数量与海洛因作用时间呈正相关,TNF-α和Rho蛋白参与了海洛因致神经元凋亡过程,C-AbI蛋白与海洛因致神经元凋亡作用关系不明显。

不同方式的抗原修复对免疫组化结果的影响

目的：探讨免疫组织化学中不同抗原修复方式对染色结果的影响.方法：采用高温高压修复法、微波修复法和酶消化法对病理科采用的四项免疫组织化学标记（p53、Ki67、C-erbB-2、cyclin D1）进行染色,在显微镜下对染色阳性率进行比较.结果：p53、Ki67、C-erbB-2、cyclin D1四项标记在三种修复方法下均具有较高的阳性率.高温高压修复法、微波修复法的染色结果阳性率较高,与酶消化法相比,有统计学意义（P〈0.05）.结论：三种修复方法均有实用性,三者相比,高温高压修复法、微波修复法修复效果更好,对病理诊断指导意义较大.

探讨病理学实习课SPOC混合教学模式

随着5G网络科技、云计算、人工智能、移动通信等前沿科技不断发展和迭代,为各种课程的教学实现线上学习提供了支撑平台。加之近年来新型冠状病毒感染在全球的不断蔓延,各种形式的线上教学或学习得以普及和迅猛发展。本文结合本校线上教学实践的经验重点讨论采取SPOC混合模式进行病理实习课教学是否能满足该课程的专业要求和顺应线上教学发展。可以看出病理实习课采用SPOC混合教学模式能最大限度利于优质教学资源,提升病理教学识图与新技术的融合,对改革和提升病理学教学质量大有裨益。

某高校附属医院研究生学位论文文献搜集能力分析

目的对新疆医科大学某附属医院近5年毕业的全日制硕士研究生在读期间的毕业论文搜集文献情况进行全面分析，为今后研究生科研能力的提升提供实证性依据。方法查阅新疆医科大学某附属医院2011-2015年毕业论文及综述中，中外文参考文献引用情况有关数据进行描述性分析。结果2011-2015年研究生毕业论文引用文献总数平均增长率为4．18％，其中近5年中文文献引用呈负增长趋势，外文文献引用情况呈正增长趋势。结论中外文期刊是研究生学位论文不可替代的参考文献来源。需要根据专业特点，加强导师对研究生文献调研能力的指导、充分利用高校图书馆优势，另外，提高研究生专业外语能力，对于全面提升高校研究生科研综合能力，尤其是参考文献搜集及引用能力至关重要。