膝骨关节炎合并抑郁的发生发展规律及相关危险因素研究

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是最为常见的骨骼肌肉疾病,以关节软骨退变、骨赘形成和关节间隙狭窄为特征[1]。其中,膝关节是骨关节炎最常见的发生部位,膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的主要症状是关节疼痛、僵硬、功能受限,导致残疾、疲劳、情绪低落和睡眠障碍,是膝关节置换术的主要适应证。抑郁是KOA患者的常见合并症,KOA患者的抑郁症状患病率尚无确切数据,据Stubbs B等[2]报道约为18.5%,这是普通人群的约2倍。

屋尘螨第21类过敏原原核表达和过敏原性鉴定

目的屋尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)是引起过敏性疾病的主要过敏原,鉴定其免疫原性是研究哮喘和其他过敏性疾病的基础。由于不同地区生物的多样性,本实验在国内首次对屋尘螨Der p 21进行克隆、表达和免疫原性鉴定。方法提取屋尘螨总RNA,RT-PCR扩增Der p 21的cDNA片段,根据已知Der p 21序列设计出表达引物,再通过已获得的cDNA和引物进行PCR扩增,将扩增产物连接到克隆载体上并转入克隆菌E.coli Top10中,涂板过夜培养,挑选菌落,保菌,取样送至公司测序。将测序正确的基因转入表达载体PET32中,经酶切鉴定测序再转入表达菌BL21中,大量表达重组蛋白Der p 21经过纯化后,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测目的蛋白表达并进行免疫印迹分析(Western blotting)。结果双酶切显示Der p 21已成功连接在载体上,SDS-PAGE显示目标基因在大肠埃希菌BL21成功表达,纯化后的重组Der p 21蛋白分子量约为50 kD,Western blotting结果显示有明显条带。结论成功克隆表达Der p 21 cDNA,表达和纯化出重组蛋白,并具有免疫原性。