人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立

目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于18只♂裸鼠的右侧尾状核区,每只接种体积为5μL,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。观察不同接种量实验鼠的生存状态、成瘤情况及脏器转移灶、带瘤生存期,测量肿瘤的最大径,计算肿瘤体积,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果各接种量的实验组成瘤率均为100%,未见颅外转移病灶,3组裸鼠的平均生存时间分别为(46.50±3.27)d、(38.50±3.28)d、(30.67±3.51)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;免疫组化GFAP和S-100蛋白呈阳性表达。结论立体定向脑内定量注射U87-MG细胞制备的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型成瘤率高、颅内生长稳定、颅外远隔部位转移率低,与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。

黄芪多糖和羟基红花黄色素A单用及合用对慢性肾病大鼠肾细胞凋亡的影响

目的探讨黄芪多糖和羟基红花黄色素A单用及合用对慢性肾病大鼠肾细胞凋亡的影响。方法采用单侧输尿管梗阻的方法造成大鼠慢性肾病模型。将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪多糖(1 g·kg-1)治疗组,羟基红花黄色素A(50 mg·kg-1)治疗组,黄芪多糖(500 mg·kg-1)+羟基红花黄色素A(25 mg·kg-1)治疗组,假手术组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液。造模后第2日开始给予相应干预措施,连续给药14 d后处死,检测各组大鼠血清肌酐和尿素氮水平,通过HE染色观察肾组织形态变化,通过TUNEL染色法检测肾细胞凋亡,通过蛋白印迹法检测肾组织中凋亡蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果与模型组相比,黄芪多糖和羟基红花黄色素A单用组及合用组都能够降低血清肌酐和尿素氮水平,改善肾组织病理形态和抑制肾细胞凋亡,合用效果优于单用。结论黄芪多糖和羟基红花黄色素A合用发挥肾脏保护作用优于单用,其作用机制可能与抑制肾细胞凋亡有关。

大黄酸和羟基红花黄色素A单用及配伍对慢性肾病的保护作用研究

目的通过对大鼠左侧输尿管结扎(UUO)的动物损伤模型,探讨大黄酸(rhein)和羟基红花黄色素A(HSYA)单用及配伍对肾脏保护的抗炎作用机制。方法采用 UUO 造慢性肾病损伤动物模型,将30 只雄性SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、rhein 治疗组[100 mg/(kg·d)]、HSYA 治疗组[50 mg/(kg·d)]和rhein[100 mg/(kg·d)]+HSYA[50 mg/(kg·d)]治疗组。给药14 d 后处死大鼠,采用试剂盒测定各组大鼠治疗前及治疗后血清中血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定治疗前及治疗后血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达水平,通过HE 染色观察肾组织变化。结果与模型组相比,rhein 和HSYA 单用及配伍组血清中Scr 和BUN 表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-α、IL-6、IL-1β及MCP-1 表达亦明显下降,差异有统计学意义(P<0.01),同时肾组织病理学变化亦得到改善,且配伍的效果优于单用。结论rhein 和HSYA 单用及配伍均能对UUO 导致的炎症损伤发挥一定的肾保护作用,配伍效果更好,其作用机制与抗炎作用有关。

大黄酸配伍羟基红花黄色素A对大鼠单侧输尿管结扎慢性肾病的作用及机制研究

目的研究大黄酸(RH)配伍羟基红花黄色素A(HSYA)对慢性肾病(CKD)模型大鼠抗炎、抗氧化、抗凋亡能力的影响及其可能机制。方法 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、RH(100 mg/kg)组、HSYA(50 mg/kg)组和RH(100 mg/kg)+HSYA(50 mg/kg)组,采用单侧输尿管结扎(UUO)建立CKD模型。试剂盒法测定大鼠肾组织丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;Masson染色观察肾组织病理变化;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blotting检测肾组织中IκBα、p-IκBα、NF-κB p-65、p-p65和Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 RH和HSYA配伍使用明显降低MDA水平,提高SOD及GSH-Px活性;减少肾小球炎细胞浸润,改善肾小管间质纤维化等病理改变;抑制细胞凋亡;抑制磷酸化的IκBα及p65蛋白表达;使Bcl-2蛋白表达上调、Bax表达下调,且效果好于单用组。结论在CKD进程中,RH和HSYA配伍使用可抑制肾脏组织的氧化损伤,抑制肾小球炎细胞浸润,降低细胞凋亡,且效果好于两个药物单用。

红花及主要药效物质治疗糖尿病肾病机制研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)最常见最严重的微血管并发症,是糖尿病患者死亡的重要原因。近年来,传统中药红花及其主要药效物质红花黄色素在改善和治疗糖尿病肾病方面越来越多的关注。分析总结红花及其主要药效物质在治疗糖尿病肾病方面的相关作用机制,对红花治疗糖尿病肾病作用机制的进一步研究有重要意义。

新型金刚烷类氮氧化物的合成及抗肝癌活性研究

目的:研究合成了一种新型金刚烷类氮氧化物并进一步探讨其体外抗肝癌活性。方法:以金刚烷甲酸和Tempol类氮氧自由基为原料,运用双靶标设计原理,合成目标化合物;MTT法测定目标化合物对人肝癌细胞SMMC7721,HepG2,MHCC-97H,BEL-7404以及L02正常肝细胞株的抑制率;流式细胞仪测定目标化合物对BEL-7404细胞周期和凋亡的影响。结果:利用IR、MS、元素分析对目标化合物结构进行了确证;体外实验显示,与Tempol、5-FU、索拉非尼3个阳性药相比,化合物2对各种肝癌细胞均产生了不同的抑制作用,对BEL-7404细胞抑制作用最好,IC50为(7.8±2.9)μmol·L-1且毒性最小,并通过阻滞细胞周期和诱导凋亡来抑制细胞增殖。结论:本研究合成的目标化合物,有望开发成结构新颖、选择性好、不良反应小的抗肿瘤药物,值得进一步研究。