生物检测试剂保藏技术研究进展

生物检测试剂的扩增性能,尤其是酶试剂的生物活性对荧光定量PCR等的检测结果起决定性作用。采用不同的保藏技术对维持检测试剂的生物活性,实现生物检测试剂室温条件下长时间稳定保藏与非冷链运输,保证检测结果的稳定性、准确性、特异性和灵敏度等至关重要。针对低温保藏技术、真空冷冻干燥技术、喷雾干燥技术以及玻璃化冷冻技术4种不同保藏技术的研究进展进行了综述,在应用中总结优缺点,以期对后续相关工作的开展提供一定的科学依据。

胶体金免疫层析法快速检测鼠疫耶尔森菌F1抗体

目的建立检测鼠疫耶尔森菌F1抗体的胶体金标记免疫层析方法。方法胶体金标记纯化鼠疫F1抗原,双抗原夹心法原理制成免疫层析检测试纸条,并对兔、羊、人和黄鼠血清进行检测评价。结果用80份不同动物种属的阴性血清进行检测,未出现非特异性反应,对5份恢复期病人血清、13份免疫兔血清和2份免疫羊血清检测也取得阳性结果,对于8份I HA临界阳性(滴度1∶20)的达乌尔黄鼠血清检出阳性6份。结论建立了可以用于现场快速检测鼠疫F1抗体的胶体金免疫层析方法。

麻疹病毒全长cDNA构建及其感染性的研究

为发展新型疫苗和改造目前使用的麻疹病毒疫苗,以麻疹病毒疫苗株为模板,构建了具有感染性的麻疹病毒cDNA克隆。用RT-PCR分6段扩增出麻疹病毒全长基因,通过酶切、拼接构建麻疹病毒疫苗株CC-47的全长正链cDNA序列,并精确地置于T7启动子控制下与丁型肝炎病毒核酶序列之前。克隆麻疹病毒CC-47株蛋白N、P、L编码区质粒并置于T7启动子控制下,用4个质粒共转染哺乳动物细胞,在表达T7RNA聚合酶的重组痘苗病毒VTF7-3的作用下进行病毒拯救。经免疫荧光、PCR等方法检测证实,获得了具有感染性的麻疹病毒。所拯救的病毒在哺乳动物细胞连续传3代后,仍能检出病毒抗原和核酸。

中俄双边口岸地区鼠形动物监测名录

目的于2006至2009年间对中俄黑龙江、内蒙古双边11个口岸地区的鼠形动物进行本底调查。方法 5 m夹夜法、弓形夹法及电弧捕鼠器捕捉法。结果编著中俄双边11个口岸鼠形动物名录。结论该名录为中俄口岸公共卫生及鼠传疾病的防治提供本底资料。

《中华人民共和国生物安全法》高频关键词解读

《中华人民共和国生物安全法》将2021年4月15日起施行,本文通过检索新法内容中高频出现的3个主要关键词:"监测""科学"和"能力",对这些关键词的词频、词义和关联性进行分析,从而吸引同行对我国《生物安全法》的立法和执行目标的关注。同时本文也通过关键词提炼该法的一些突出特点,以重点关注我国生物安全监测、生物安全科学和生物安全能力建设等工作。

大肠杆菌O157胶体金免疫层析快速筛查方法的建立

目的建立一种大肠杆菌O157的胶体金免疫层析快速筛查方法。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测大肠杆菌O157,对该法进行敏感性、特异性和食品样品的适用性分析。结果该法能在15分钟内完成检测,检测不同的肠杆菌科细菌(非O157型大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、柠檬酸杆菌、肠杆菌、沙雷菌、耶尔森菌)、葡萄球菌、李斯特菌、气单胞菌、弧菌等共24种30株常见细菌,未发现有交叉反应,显示该法特异性良好。检测大肠杆菌O157的最低检出浓度为1×105cfu/ml。方法适用于奶粉、面粉、淀粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、果冻、燕窝和果汁等食品样品的检测。结论新建立的大肠杆菌O157胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查。

化妆品中双香豆素和环香豆素的高效液相色谱二极管阵列检测器测定

建立了用高效液相色谱（HPLC）／二极管阵列检测器（DAD）测定化妆品中两种香豆素物质——双香豆素和环香豆素的方法。样品用乙腈-氢氧化钠溶液（0．1mol／L）（体积比9：1）的提取溶液超声提取，高效液相色谱DAD扫描检测，并在306nm波长进行分析。用保留时间结合二种香豆素的紫外光谱定性，外标法定量，并且采用液质联用（LC-MS／MS）确证。双香豆素的回收率为96％～105％，精密度RSD为0．51％～2．08％，定量下限为1ng；环香豆素的回收率为88％～104％，精密度RSD为0．51％～3．36％，定量下限为1ng。

美白化妆品卫生安全及功效评价

美白化妆品越来越被人们所重视,其安全性和功效性评价已成为消费者和生产厂家所关注的重点。本文从科学角度介绍了美白化妆品的美白原理,美白成分及其卫生安全评价,以及国内外对美白化妆品功效评价的进展情况,包括美白活性成分的仪器分析法、功效评价的体外细胞法、动物试验法和人体皮肤试验仪器测试法等。同时展望了美白化妆品的未来发展趋势,为我国美白化妆品事业的发展提供参考。

化妆品过敏的检测和评价

随着化妆品的广泛使用,化妆品过敏的现象也越来越普遍,受到人们的高度关注。作者对化妆品过敏的原因、化妆品过敏的分类和特点做了简要介绍,而对国内外化妆品过敏的非动物检测和评价方法做了重点介绍,主要包括皮肤斑贴试验、体外皮肤模型试验、角质层水分含量试验、皮肤屏障功能试验、皮肤红斑指数测试、皮肤其它生理指数测试等,并针对化妆品过敏的种种现象,对我国化妆品过敏防治的未来发展趋势做了展望,为我国化妆品事业的健康发展提供技术参考。

严重急性呼吸综合征(SARS)患者不同组织中冠状病毒的分离和鉴定

严重急性呼吸综合征(SARS)自2002年11月在中国广东爆发后,已迅速蔓延成为全球性传染疾患。为了了解SARS冠状病毒的特征,对先前SARS冠状病毒PCR检测呈阳性的来自广东的3份尸检肺组织标本、2份尸检脾组织标本,来自北京的2份咽拭子标本和1份血清标本,利用10种不同的细胞系分离病毒。结果显示,上述标本在感染细胞后,分别可在293、Vero-E6、Vero、RD和HeLa细胞系中产生细胞病变(CPE)。不同标本在上述细胞系中致CPE的能力不同,但CPE出现的时间和病变形态学特征无显著性差异。以恢复期SARS病人血清为抗体,用间接免疫荧光法对感染后细胞培养的检测,冠状病毒RT-PCR对感染后细胞RNA的检测,初步证明分离的病毒为冠状病毒。结果再次证明冠状病毒为SARS的病原,它具有较广泛的器官分布和细胞感染能力。血清中SARS冠状病毒的分离,高度提示在SARS发病过程中存在有病毒血症。

在传染性非典型肺炎患者组织和血液中发现冠状病毒

用RT-PCR从广东两例传染性非典型肺炎(非典型肺炎)死亡病例的肺和脾标本中,以及北京、辽宁和宁夏非典型肺炎患者血清中,扩增出冠状病毒核苷酸序列。这些PCR产物为冠状病毒RNA聚合酶基因部分片段,所有测定的序列和国内外SARS病毒序列相同。这些发现提示,冠状病毒和非典型肺炎关系密切,有助于确定我国非典型肺炎的病因。所建立的套式PCR方法可以用于检测临床标本。由于血液中存在SARS病毒,进行血清操作时需要注意安全保护。

五种生物恐怖细菌基因悬浮芯片多重检测方法的建立

目的建立5种生物恐怖细菌的快速、高通量的基因悬浮芯片检测方法,即炭疽芽胞杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西斯菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的多重检测。方法针对炭疽芽孢杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、土拉弗朗西菌、类鼻疽伯克霍尔德菌的特异性基因序列设计6对引物和相应的特异性探针,经多重PCR扩增并用生物素标记相应的基因片段,标记的PCR产物与包被在不同编码微球上的相应探针杂交,用悬浮芯片扫描仪检测。结果多重PCR悬浮芯片检测体系能够正确的检测和鉴定5种生物恐怖细菌,特异性好,灵敏度高,可用于恐怖样本的高通量筛查。结论建立了多重PCR基因悬浮芯片快速检测几种生物恐怖细菌的方法。

化妆品中甲氧基补骨脂素同分异构体的液相色谱法分离和测定

建立了用高效液相色谱（HPLC）-二极管阵列检测器（DAD）测定化妆品中两种呋喃香豆素同分异构体-8-甲氧基补骨脂素（8-MOP）和5-甲氧基补骨脂素（5-MOP）的简便方法。样品用甲醇超声提取，高速冷冻离心，经0．45μm滤膜过滤，注入高效液相色谱，用DAD进行扫描检测，并在301nm波长进行分析。用保留时间结合紫外光谱图定性，外标法定量，并且采用液质联用（LC／MS／MS）确证。测试结果对8-MOP的回收率为87．0％-105．0％，RSD为0．41％～5．3％．检出限为5．0mg／kg；5-MOP的回收率为88．0％～105．0％，RSD为0．33％～4．1％，检出限为5．0mg／kg。本文用DAD同时分离和检测了化妆品中的8-MOP和5-MOP，方法可用于化妆品安全性监控。

保湿化妆品功效评价与发展展望

保湿化妆品越来越被人们所重视,其安全性和功效性评价自然成为消费者和生产厂家所关注的重点。本文从科学角度介绍了保湿化妆品的保湿原理,主要活性成分,作用机制,并重点介绍了国内外对保湿化妆品功效评价的进展情况,包括保湿活性成分的检测和分析、重量法、Corneometer仪器电容测试法、Skincon仪器电导测试法、Tewameter仪器经表皮水分流失值测试法、IR测试,以及一些其它的保湿功效评价方法,等等,同时展望了保湿化妆品的未来发展趋势,为我国保湿化妆品产品的发展提供了参考。

中俄双边七个口岸地区鼠传疾病病原体调查

对2007年中俄联合监测小组在中俄边境7个口岸地区捕获的鼠进行病原体检测，以了解中俄边境鼠传疾病病原体携带情况。采用RT．PCR法检测鼠肺标本中的汉坦病毒RNA。PCR方法检测鼠肝脏、脾脏中的鼠疫杆菌、土拉杆菌、莫氏立克次氏体的DNA核酸。PCR方法检测肾脏中钩端螺旋体DNA核酸。ELISA方法检测血清中出血热病毒总抗体。胶体金法检测鼠疫杆菌抗体、钩端螺旋体抗体、土拉杆菌抗体、英氏立克次氏体抗体。结果显示鼠疫杆菌抗体、钩端螺旋体抗体、土拉杆菌抗体、立克次体抗体检测结果均为阴性。鼠疫杆菌、土拉杆菌、立克次体，钩端螺旋体的DNA核酸检测结果均为阴性。汉坦病毒3例核酸阳性，出血热总抗体8例阳性。结果表明中国抚远、俄罗斯布市、哈巴3个口岸地区应该注意肾综合征出血热的防控。

祛斑化妆品功效评价

从科学角度简要介绍了皮肤色斑的形成、祛斑化妆品作用原理,色斑长期以来一直是困扰人类皮肤的一大问题;并重点介绍了国内外祛斑化妆品产品的功效评价方法和进展,随着祛斑化妆品越来越广泛的应用,其功效评价方法受到了人们的广泛关注,评价方法包括照相法、皮肤荧光色素检测法、反射光谱测量法、三色分析法、漫反射光谱法和数字化成像定量技术等;同时展望了祛斑化妆品产品的未来发展趋势,为我国祛班美容事业的发展提供参考。

上转磷光免疫层析检测肠出血性大肠杆菌O157

目的建立一种肠出血性大肠杆菌O157的上转磷光免疫层析快速检测方法。方法利用上转换磷光标记和双抗体夹心免疫层析技术检测大肠杆菌O157,评价了该法的敏感性和特异性,并用于模拟污染食品样品的检测。结果该法能在40min内完成检测,应用于不同的肠杆菌科细菌如其他大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、产气肠杆菌、枸橼酸杆菌、沙雷菌、耶尔森菌以及葡萄球菌、副溶血弧菌、单增李斯特菌等23种28株常见细菌,未发现有交叉反应,检测灵敏度为5×103CFU/ml,每次最低可检测500个细菌,对奶粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、绿豆糕、果冻、燕窝、果汁等样品中的人工染菌均可检测,最低检测浓度为5×103CFU/ml。结论肠出血性大肠杆菌O157上转磷光免疫层析方法简便快速,特异性和灵敏性好,适用于现场的快速检测。

中俄边境中部地区不同生境鼠类初步调查研究

目的调查2008年中俄边境中部地区不同生境鼠的种类组成和携带体外寄生虫的情况。方法采用夹夜法捕鼠。结果本次调查共捕获啮齿类动物4科7属计266只,同时捕获啮齿类动物的体外寄生虫蚤371只、螨133只、蜱1只。4种生境分布的鼠种的多样性不同,田地的鼠种多样性最高,其次为草地及林区,口岸的鼠种最为单一。同时,所有生境下捕获黑线姬鼠占21%,黑线仓鼠占21%,长尾黄鼠占16%,东方田鼠占13%,大林姬鼠占11%,棕背鼠平占10%,花鼠占7%及褐家鼠占1%。结论为中俄边境地区深入开展鼠类防治研究提供了重要依据。

中俄双边口岸鼠类及体表寄生虫调查

2007年采用在口岸的港区、仓库、垃圾堆与自然生境的林地、草地、牧场、田地、堤坝处布置板夹与弓形夹的方法，对中俄边境中方（黑河市、逊克市、抚远市、饶河市）以及俄罗斯境内的3个边境口岸（布拉戈申斯维克、波利亚科沃镇、哈巴罗夫斯克市）进行了鼠类及体表寄生虫调查。结果显示，中国的4个口岸总捕获率1．8％，其中自然生境总捕获率14．37％。俄罗斯3个口岸总捕获率4．34％，其中自然生境布总捕获率11．76％。本次调查共捕获鼠类11种，其中中方口岸黑线姬鼠Apodemusagrarius为优势种，构成比占60％；俄方口岸黑线仓鼠Cricetulusbarabensis（23％）和黑线姬鼠（29％）同为优势种，合计构成比52％。从所捕获的鼠类体表采集和鉴定了体表寄生虫，其中蚤9种、革螨4种和蜱3种。调查表明，中方抚远口岸、饶河口岸以及俄方的哈巴口岸啮齿动物捕获率较高，达10％～20％，故应密切关注流行性出血热在国境上的传人与传出。

甲用化妆品的功与过评价

随着化妆品事业的快速发展,甲用化妆品也越来越受到人们的关注。文章从科学角度介绍了甲用化妆品的发展,以及美甲产品和护甲产品,并重点介绍了甲用类化妆品对人体的伤害,包括美甲过程的伤害、指甲油的伤害、洗甲水的伤害、甲用类产品过敏,等等。同时展望了甲用类化妆品的未来发展趋势,为我国化妆品事业的健康发展提供参考。