免疫组织化学在皮肤梭形细胞肿瘤诊断中的应用——附80例分析

为探讨免疫组织化学在皮肤梭形细胞肿瘤鉴别诊断中的应用价值，选用7种抗体(CK，vimentin, SMA，desmin, S-100蛋白，HMB45和CD34)对80例皮肤梭形细胞肿瘤进行分析。结果表明：CD34与S-100蛋白抗体联合应用对鉴别皮肤纤维瘤，隆突性皮肤纤维肉瘤及神经纤维瘤是最佳抗体组合，SMA与desmin对平滑肌来源的肿瘤及HMB45与S-100蛋白对黑素细胞病变与其它梭形细胞肿瘤的鉴别诊断均有极高的价值。因而，免疫组织化学在皮肤梭形细胞肿瘤的鉴别诊断中有广泛应用价值。

甲状腺单发结节超声造影与微血管密度的相关性

目的探讨甲状腺单发结节CEUS的特点及其与微血管密度(MVD)间的相关性。方法对45例甲状腺单发甲状腺结节患者术前行CEUS,分析结节的造影特点;术后以CD34单克隆抗体染色肿瘤组织,于光镜下计数肿瘤的微血管数。结果结节性甲状腺肿23例,腺瘤8例,甲状腺癌14例,CEUS峰值强度分别为(26.82±4.48)dB,(31.50±4.22)dB,(22.36±6.13)dB,MVD分别为(58.55±7.32)条/高倍视野、(68.67±10.62)条/高倍视野、(35.00±6.16)条/高倍视野,峰值强度与MVD呈正相关(r=0.692,P=0.001)。结论 CEUS对甲状腺结节有一定诊断价值,其峰值强度可反映结节的MVD,可于术前反映结节的血管生成情况。

血管内皮生长因子及其受体与上皮性卵巢癌发展

目的 探讨血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (KDR)与上皮性卵巢癌发展的关系。方法 用免疫组化方法检测 4 5例人上皮性卵巢癌中VEGF及KDR的表达 ,分析VEGF及KDR表达与卵巢癌FIGO分期、淋巴结转移及预后的关系。结果 4 5例上皮性卵巢癌中 ,VEGF、KDR表达阳性率分别为 73.3% (33/ 4 5 )、5 7.8% (2 6 / 4 5 )。Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌VEGF表达阳性率 (94 .4 % ,17/ 18)高于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌 (5 9.3% ,16 / 2 7)。淋巴结转移阳性组中VEGF表达阳性率 (10 0 % ,12 / 12 )高于淋巴结转移阴性组 (16 / 2 6 ,6 1.5 % ) ,(P <0 .0 5 )。VEGF表达阴性者生存率高于VEGF表达阳性者 (P =0 .0 4 7)。不同组织学类型上皮性卵巢癌中VEGF表达无明显差异。KDR表达与卵巢癌分期、淋巴转移及预后无关。结论 VEGF与上皮性卵巢癌发展有关。

上皮性卵巢癌血管内皮生长因子的表达与肿瘤内微血管密度的相关性研究

目的 :探讨上皮性卵巢癌组织中血管内皮生长因子 (VEGF)是否与肿瘤内微血管密度 (MVD)、淋巴转移等临床病理学因素存在相关性。方法 :以多克隆抗VEGF抗体和单克隆抗CD34抗体分别标记 4 5例FIGOⅠ～Ⅳ期上皮性卵巢癌术后标本的VEGF和MVD。用彩色图像病理分析系统测定VEGF的相对含量 ,MVD采用人工计数。分析VEGF与MVD、肿瘤期别、组织学类型、腹水量以及淋巴转移的关系。结果 :(1)VEGF的平均吸光度为 0 .178± 0 .14 9(中位数 0 .16 7)。MVD值平均为 72 .2 6± 5 8.5 2 /mm2 (中位数 6 8.4 7/mm2 ) ;(2 )VEGF表达水平与MVD之间存在显著相关性 (r =0 .92 6 ,P <0 .0 1) ;(3)盆腔淋巴转移(n =12 )VEGF平均吸光度 (0 .193± 0 .15 3)显著高于无盆腔淋巴转移组 (n =32 )的 0 .138± 0 .0 90 ,(P <0 .0 5 )。不同期别 ,组织学类型和腹水量之间的VEGF表达强度无显著差异(P >0 .0 5 )。结论

视网膜新生血管动物模型的制备

目的 制备视网膜新生血管动物模型 ,为今后的视网膜新生血管相关疾病的研究提供稳定的模型。方法 以出生 7d的C5 7BL/ 6J小鼠 5 6只 ,雌雄兼有 ,随机将 2 8只放入75 %± 2 %高氧环境 ,控制室温 2 3℃± 2℃ ,日光照明 ,5d后返回空气环境 ;另一组 2 8只置于 2 3℃± 2℃空气环境中饲养作为对照。随机于出生后 12、14、17、2 1、2 2、2 5d取高氧组和空气组小鼠行视网膜铺片、血管内皮生长因子 (vascularendothe lialgrowthfactor ,VEGF)免疫组化染色 ,观察VEGF的表达情况 ,并对出生后 17d小鼠的视网膜铺片、石蜡切片HE染色、VEGF免疫组化染色。结果 高氧诱导组出生后 17d视网膜无血管区面积 ,穿过视网膜内界膜细胞核计数明显高于空气组。血管内皮细胞VEGF的表达从出生后 14d开始有阳性表达 ,阳性表达逐渐增强 ,出生后 17d达到高峰 ,之后逐渐下降 ,持续至出生后 2 1d。结论 该模型为一种合适的视网膜新生血管动物模型。

糖尿病视网膜病变与非酶糖化终产物的关系

目的建立非酶糖化终产物(AGEs)检测方法,研究糖尿病视网膜病变与AGEs的关系。方法以体外孵育的AGEs免疫新西兰大白兔获得抗体;ELISA法标记糖尿病大鼠视网膜上AGEs的沉积;HE染色观察其病理改变,spearman检验统计两者与糖尿病病程的相关性。结果多克隆抗体经免疫双扩散与竞争抑制性ELISA实验被证实与AGEs特异结合。糖尿病大鼠视网膜抗AGEs染色阳性,对照组为阴性(P<0.01);其微血管周细胞密度为4.68±0.528个/油镜视野,对照组为6.74±0.532(P<0.01);其AGEs沉积程度与周细胞密度负相关,两者异常度随糖尿病病程延长而逐步加重,P<0.01。结论糖尿病代谢紊乱导致AGEs在视网膜上沉积,后者和以周细胞丢失为代表的早期视网膜微血管病有密切关系。

视网膜脱离时神经生长因子对Mǖller细胞中间丝蛋白表达的影响

目的研究实验性视网膜脱离(RD)时外源性神经生长因子(NGF)对M櫣ller细胞功能的影响作用。方法29只SD大鼠建立RD模型,并分为NGF实验组、空白、单纯RD、正常对照共4组。在建立RD模型后观察1.5、3、6h,1/2、1、2、4、8、16、32d。NGF实验组在建立模型后每4d在玻璃体腔内注射NGF5μg/5μL/次,空白对照组注射空白载体作为对照。采用免疫组织化学方法对M櫣ller细胞的GFAP和vimentin进行标记。非参数统计方法分析。结果单纯RD组显示随脱离时间延长,二者在M櫣ller细胞的表达强度逐渐增强,分布范围变广。NGF实验组显示M櫣ller细胞内的二者表达强度低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论外源性NGF能抑制RD后M櫣ller细胞过度表达GFAP和vimentin,防止M櫣ller细胞过度反应。

CD_(44)分子的表达与喉癌颈淋巴结转移的相关性研究

目的 研究CD_44分子在喉癌组织中的表达及其与颈淋巴结转移的关系.方法 应用亲和免疫组织化学法(ABC法)对喉癌、喉乳头状瘤、喉白斑组织的CD_44分子进行了免疫组织化学检测.结果10例喉乳头状瘤及9例白斑病变CD_44均为低表达.45例喉癌中高分化鳞癌CD_44表达明显低于低分化鳞癌(P<0.005);伴颈淋巴结转移的喉癌CD_44表达明显高于无颈淋巴结转移的喉癌组织(P<0.001);T_3、T_4期喉癌CD_44表达明显高于T_1、T_2期(P<0.001).结论 喉癌组织CD_44分子的表达与喉癌组织分化、颈淋巴结转移及临床分期均密切相关,提示CD_44分子能客观反映喉癌组织的分化状态、肿瘤进展及转移潜力.CD_44高表达者侵袭力强,转移倾向明显.

微血管计数和血管内皮生长因子在胃癌浸润转移中的作用

目的 研究微血管计数 (MVC)和血管内皮生长因子在胃癌组织中的表达情况 ,探讨其与临床病理特征的关系及在胃癌浸润转移中的作用。方法 应用免疫组织化学ABC法 ,检测 11例正常胃黏膜及 2 5 3例胃癌组织中MVC、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达。结果 肿瘤组织MVC内明显高于正常胃黏膜组织 (P <0 .0 1) ;肿瘤组织中VEGF和bFGF阳性率分别为 67.6% ( 171/2 5 3)和 9.5 % ( 2 4/2 5 3)。VEGF的表达与分化程度、TNM分期、转移 (淋巴结、腹膜、肝等 )密切相关 (P <0 .0 1)。胃癌组织VEGF阳性组的MVC明显高于阴性组 (P <0 .0 1) ;VEGF表达阳性者复发转移率明显高于VEGF阴性者 (P <0 .0 1) ,VEGF阳性患者的预后明显较阴性者差。结论 高MVC及VEGF表达是胃癌的独立预后因子。

胃癌中MMP-2表达与TNM分期和淋巴结转移的相关性研究

目的:研究胃癌组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达与胃癌TNM分期和淋巴结转移的关系。方法:用免疫组织化学半定量方法检测135例胃癌组织中MMP-2的表达,统计分析其与TNM分期等的相关性。结果:MMP-2的表达与WHO、Lauren和Ming病理分型和淋巴结转移有相关性(P<0.05),而与Borrmann病理分型、TNM分期中的远处转移(M)、癌组织浸润深度以及分化程度无相关性(P>0.05)。本组中的早期胃癌28例,有9例表达MMP-2,其中7例伴有淋巴结转移,占早期胃癌伴淋巴结转移者8例中的87.5％。结论:胃癌细胞表达MMP-2与肿瘤的浸润性生长方式和淋巴结转移密切相关;检测MMP-2可作为术前预测早期胃癌有无淋巴结转移和判断预后的辅助指标。

大鼠视网膜脱离后神经生长因子及其受体的表达

视网膜脱离(retinal detachment,RD)术后视功能恢复不理想一直是眼科临床医师关注的重点.神经生长因子(nerve growth factor, NGF)是一类新发现的细胞因子,在神经损伤的保护过程中发挥着重要作用,被认为是最有希望的改善视功能的药物.本研究试通过对NGF及其受体TrkA 的研究,探讨NGF是否有可能用于RD以保护视功能.

脂肪酸合成酶在乳腺良恶性病变组织中的表达

为探究脂肪酸合成酶(FAS)在乳腺良、恶性病变中表达的差异。笔者对乳腺癌和乳腺良性病变(各46例)病理石蜡标本中的FAS进行免疫组化染色,评估两组FAS的染色水平,比较其表达的差异。结果示:乳腺良性病变中FAS阳性率为15.2%,乳腺癌组织中FAS表达为71.7%(P<0.001);FAS染色阳性病例中,乳腺癌组FAS染色强度显著高于乳腺良性病变组(P=0.037)。提示相对于乳腺良性病变,FAS在乳腺癌组织中明显过度表达。FAS的表达状况有可能成为乳腺良、恶性病变的鉴别方法之一。

Bcl-2、Bax基因在喉癌和喉角化症组织中的表达

目的 观察Bcl-2和Bax基因在喉癌和喉角化症组织中的表达,探讨喉癌发生与发展机制及喉角化症的转归和预后。方法 采用免疫组化ABC法检测57例喉癌标本和17例喉角化症患者组织中BcL-2、Bax基因的表达情况。结果 喉癌组织中Bcl-2的阳性表达率为68.4％(39/57),Bax的阳性表达率为22.8％(13/57)。喉癌组织Bcl-2/Bax的表达比为3。而在17例喉角化症组织和10例声带息肉组织中均未见Bcl-2和Bax的阳性表达。经X^2检验,喉癌组织和喉角化症的Bcl-2和Bax表达均有统计学差异(P<0.05)。结论 喉癌组织Bcl-2/Bax的表达比为3,凋亡指数较低,是导致肿瘤的生长的原因之一:Bcl-2与Bax的表达对于评估喉角化症病变程度和愈后并非是一个可行的指标。

软组织Rosai-Dorfman病1例及文献复习

目的探讨软组织罗-道病(RDD)的病理诊断和免疫组化特点以及鉴别诊断.方法通过HE、免疫组化及特殊染色观察1例下肢软组织RDD并复习文献.结果镜下可见丰富的胶原纤维和组织细胞增生以及大量浆细胞、淋巴细胞和嗜酸粒细胞浸润,组织细胞呈梭形、多边形,胞质嗜酸性颗粒状、放射条纹状或泡沫状,一些大组织细胞质内有多量小淋巴细胞.增生的胶原和梭形组织细胞构成不典型Storiform结构;组织细胞表达S-100,KP-1,MAC387,VIM,Masson三色及网状纤维染色显示大量胶原纤维增生,组织细胞PAS-AB染色阴性.结论软组织RDD是临床罕见的疾病,在病理诊断方面,易误诊为其他疾病,明确病理组织学特点在鉴别诊断中有重要意义.

腹主动脉灌注利多卡因对兔脊髓缺血/再灌注损伤的保护作用

目的建立兔脊髓缺血/再灌注损伤模型,研究经腹主动脉灌注利多卡因对脊髓缺血/再灌注损伤的作用。方法新西兰大耳白兔16只,随机分为两组:A组为对照组(8只),B组为利多卡因组(8只)。静脉麻醉后气管插管,持续监测平均动脉压、心率、脉搏血氧饱和度及直肠温度。手术暴露腹主动脉和双侧髂总动脉,经股动脉置一细导管至腹主动脉内距左肾动脉1.0 cm处,并于左肾动脉开口远端0.5 cm处阻断腹主动脉,同时阻断左、右侧髂总动脉,阻断即刻开始经导管向阻断的腹主动脉远端以12 mL.kg-1.h-1的速度灌注实验药物。A组灌注常温0.9%氯化钠溶液(12 mL.kg-1.h-1),B组灌注以常温0.9%氯化钠溶液稀释的等容量利多卡因溶液(40 mg/kg),30 min后开放血管。于动物完全清醒即刻及再灌注后6、24、48 h对双后肢神经功能进行评估;再灌注48 h,取脊髓L3～L53个节段制作石蜡切片,光学显微镜下观察并计数正常的前角运动神经元。结果清醒即刻及再灌注后6、24、48 h,B组的神经行为学评分均显著高于A组(P值均<0.05);再灌注48 h,A、B两组脊髓前角正常神经元中位数(四分位间距)分别为1(2)、9(6)个,B组显著多于A组(P<0.05)。结论腹主动脉阻断期间动脉内灌注利多卡因可减轻脊髓缺血/再灌注损伤。

支架蛋白IQGAP1在乳腺浸润性导管癌中的表达及对肿瘤细胞迁移的影响

目的探讨支架蛋白IQGAP1在乳腺浸润性导管癌中的表达及沉默IQGAP1表达对肿瘤细胞迁移能力的影响。方法利用免疫组织化学染色和Western blotting技术检测IQGAP1蛋白在乳腺浸润性导管癌组织、癌旁组织以及良性乳腺病变组织中的表达;分析IQGAP1蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达与临床病理参数的关系。构建载有shRNA-IQGAP1的慢病毒表达载体,将其稳定转染高转移乳腺癌MDA-MB-435细胞,获得稳定抑制IQGAP1蛋白表达的细胞株(IQGAP1-shRNA组)及相应的空载细胞株(Vector组)、空白对照细胞株(Blank组);运用基于Transwell系统的体外迁移实验观察沉默IQGAP1的表达对MDA-MB-435细胞迁移能力的影响。结果 IQGAP1蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的阳性表达率为83.44%(136/163),与良性乳腺病变组织(32.14%,9/28)比较,差异具有统计学意义(P<0.01);IQGAP1蛋白在癌旁组织中的阳性表达率(77.78%,63/81)与乳腺浸润性导管癌组织比较,差异无统计学意义(P>0.05)。163例乳腺浸润性导管癌中WHO分级为3级者IQGAP1蛋白表达为阴性、胞质阳性和胞膜阳性的例数分别为1、3和22,2级者分别为21、40和61;1级者分别为5、9和1,差异具有统计学意义(P<0.01);IQGAP1蛋白的表达与肿瘤的大小有关(P<0.01),与淋巴结是否转移无关(P>0.05)。Blank组、Vector组和IQGAP1-shRNA组中穿过Transwell小室的平均细胞数分别为(294.3±16.3)、(287.7±16.9)和(93.5±7.6)个,IQGAP1-shRNA组显著低于其他两组(P<0.01)。结论 IQGAP1蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达明显高于良性乳腺病变组织;IQGAP1蛋白表达部位与肿瘤分化程度有关;IQGAP1蛋白在乳腺癌转移过程中起促进作用。