实体瘤免疫治疗相关分离反应的研究进展

近年来,免疫检查点抑制剂(ICIs)在国内外临床实践中被广泛应用,极大改善了部分晚期恶性肿瘤患者的生存及预后。在接受免疫治疗后,一些患者体内会出现有反应病灶和无反应病灶共存的现象,即分离反应(DR)。目前,DR的具体发生机制尚未阐明,评估标准各异,这给临床医师及时识别并治疗患者增加了挑战。本文就免疫治疗相关DR的定义及发生率、评估标准及潜在生物学机制等进行系统综述,以期为临床实践工作提供参考。

眼镜蛇神经毒素分离纯化及其经大鼠直肠给药吸收的实验研究

目的利用色谱技术从眼镜蛇粗毒中分离纯化神经毒素,探索神经毒素经大鼠直肠途径给药后的吸收情况和镇痛活性。方法通过CM Sepharose Fast Flow阳离子交换色谱和Sephadex G-50凝胶过滤色谱两步法分离纯化神经毒素。采用免疫组织化学技术观察神经毒素在大鼠直肠组织中的分布。利用Shotgun质谱技术和数据库检测大鼠血浆神经毒素片段。利用HE染色观察神经毒素对大鼠直肠组织结构的影响。利用醋酸扭体法测定神经毒素直肠给药后镇痛活性。结果通过色谱分离纯化得到电泳纯的神经毒素。神经毒素直肠给药3 h后直肠黏膜组织内神经毒素分布明显,阳性面积比率、平均光密度值、H-SCORE值与对照组相比差异明显(P<0.01)。质谱检测到大鼠血浆中神经毒素有关片段。HE染色表明神经毒素对大鼠直肠组织没有损伤,组织结构无明显病理变化。醋酸扭体法测定小鼠直肠给药神经毒素3 h后扭体抑制率达50%,提示具有镇痛活性。结论眼镜蛇神经毒素可以通过直肠吸收入血并且发挥镇痛作用,为后续研究眼镜蛇神经毒素直肠给药制剂提供实验依据。

α-神经毒素的分离纯化及其经小鼠直肠给药后肠道体外荧光成像分析

目的从眼镜蛇粗毒中分离纯化短链α-神经毒素活性成分,观察荧光染料标记的α-神经毒素经小鼠直肠给药后的肠道内分布和动态过程。方法使用CM Sepharose Fast Flow阳离子交换层析和Sephadex G-50凝胶过滤层析分离纯化电泳纯的α-神经毒素。将4只C57小鼠分为对照组和实验组,对照组采用荧光染料CY7-SE标记,实验组采用荧光染料CY7-SE与α-神经毒素相互结合。使用成像仪检测CY7-SE标记的α-神经毒素在直肠给药1、3 h后肠道内的荧光强度分布情况。结果分离纯化得到电泳纯的α-神经毒素。α-神经毒素直肠给药1 h后,实验组相较于对照组的小肠段和胃的荧光强度较强,盲肠、结肠段荧光强度较弱。α-神经毒素直肠给药3 h后,实验组相较于对照组的小肠、盲肠、结肠段和胃的荧光强度均较弱。结论从眼镜蛇粗毒中分离纯化得到的α-神经毒素经直肠给药可先富集于小鼠小肠段及胃,3 h后被肠道黏膜吸收代谢。本研究为开发神经毒素的直肠递送制剂提供了实验依据。

中华眼镜蛇毒致广西巴马小型猪坏死组织渗出液中的蛇毒成分分析

目的:探究中华眼镜蛇毒致广西巴马小型猪坏死组织渗出液中的蛇毒成分及其蛋白表达的动态变化。方法:给予广西巴马小型猪注射中华眼镜蛇毒,构建蛇伤中毒的局部组织坏死模型,在注射毒素后的6 h、12 h、24 h、36 h和48 h取小猪坏死组织的渗出液,采用无标记的蛋白质组学技术鉴定分析渗出液中蛇毒蛋白质组成及动态变化,通过对所鉴定出的蛋白进行KEGG及GO通路富集分析,以深入了解蛇毒蛋白相关的生物学功能。结果:通过蛇伤中毒后广西巴马小型猪的生物学行为、局部肌肉组织的病理结果、注射部位的伤口变化来评判动物模型,广西巴马小型猪中毒后出现呼吸急促、肌肉组织坏死、局部伤口溃烂等症状,均符合临床特征的实际情况,表明成功构建了中华眼镜蛇毒导致局部组织坏死的广西巴马小型猪模型。在广西巴马小型猪的局部组织坏死渗出液中鉴定到40种蛇毒蛋白质,涵盖三指毒素、磷脂酶A2、富含半胱氨酸分泌蛋白、蛇毒金属蛋白酶、核苷酸焦磷酸/磷酸二酯酶等蛇毒蛋白家族,并呈现出动态性数量变化。结论:在中华眼镜蛇毒致广西巴马小型猪过程中,不同时间段的组织渗出液中均鉴定出多种三指毒素、磷脂酶A2等蛇毒蛋白,其可能在局部组织坏死中发挥着重要作用。

东亚产业发展的新变化及其影响

一、东亚产业发展的新变化及原因 20世纪90年代以来,东亚产业发展出现新变化,雁行发展模式已式微,新的发展模式正在酝酿之中.在新模式下,国家经济发展水平不再是地区产业布局的决定性因素.东亚区域内产业水平性分工增加.随着中国在从劳动密集型到技术密集型诸多领域的产业的迅速扩大,中国在东亚产业体系中的地位有所提高.

土耳其外交新思维及其影响

土耳其正义发展党政府以包容的、超越对抗的新思维指导外交政策,并调整自身战略定位,推行"东西并重"的强国战略,积极开展睦邻外交并积极介入地区事务,在既有的土美战略关系的基础上,强调自身的独立性。土耳其外交政策新思维顺应了国家发展战略和国际安全环境的变化,有利于土耳其实现经济利益多元化,体现了正义发展党维持执政地位的考虑,同时也是土耳其领导人对自身多元文化认识和思考的结果。土耳其外交的新思维,对地区国家的发展方向、地区局势的稳定及地区力量平衡均产生一定的影响,但囿于土耳其自身实力,其影响和政策效果有限。

基于深度学习的人脸识别方法研究

作为非接触式生物识别方法之一,人脸识别在诸多情况下被广泛使用。然而,传统的人脸识别方法由于识别准确度低以及在多个场合的应用受到限制,已不能满足目前的需求。文中提出了采用深度学习的方法来实现脸部标志检测和无限制人脸识别。为解决人脸标志检测问题,使用一种深层卷积神经网络的逐层训练方法,以帮助卷积神经网络进行收敛,并提出了一种避免过拟合的样本变换方法;为了解决人脸识别问题,文中提出了一种SIAMESE卷积神经网络,其在不同部位和尺度上进行训练。实验测试显示,ORL和人脸识别算法的精度分别达到了91%和81%。

特朗普基建计划的现实与前景

2016年底,特朗普以"使美国重新伟大"、"美国优先"的口号入主白宫,重振美国经济是其主要施政目标。为把经济拉回增长轨道,特朗普制定了大胆的经济发展计划,要通过推动税务改革、精简法规、重谈贸易协定和重建美国基础设施四大经济政策,并辅以"美国优先能源计划",以达到下一个十年创造2,500万工作岗位,经济年均增长率4%的目标。特朗普认为,美国基础设施多年失修,破乱不堪,因此提出了野心勃勃的基础设施建设计划,计划出资1.5万亿美元,重振美国基础设施。然而,限于经费、立法以及地方利益集团的局限,特朗普的基建计划进展缓慢,难见实效。

中华眼镜蛇咬伤导致局部组织坏死的猪模型构建

目的通过广西巴马小香猪建立中华眼镜蛇咬伤导致局部组织坏死的动物模型。方法选择健康的广西巴马香猪12头,分为蛇毒组和对照组各6头,每头猪按照本课题组前期获得的半数致死量为剂量依据,蛇毒组以浓度5 mg/kg,剂量0.2 ml/kg于实验猪右后侧大腿肌肉注射,对照组注射等量生理盐水。注射蛇毒后观察实验猪的生物学行为和局部伤口变化情况,采用苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE)观察注射部位肌肉组织的病理学变化,并进行血液学分析。结果蛇毒组实验猪注射中华眼镜蛇毒3 h后,注射部位伤口开始出现淤青肿胀,随后肿胀部位不断扩大;6~12 h,出现渗出液外渗,且伴有出血;24 h,伤口出现糜烂性溃疡,且缓慢向四周扩散;第3天时,伤口部位皮肤向下凹陷,出现坏死;第6天,出现伤口全部坏死溃烂;第7天,坏死部分全部脱落。对照组实验猪注射部位全程无变化。同时蛇毒组在注射中华眼镜蛇毒后6 h,实验猪腿部肌肉肌丝的排列出现紊乱,没有规则;注射后12 h,肌肉组织中细胞溶解,见浆液性渗出物弥漫浸润组织,局部出现炎性水肿细胞质呈现不规则排布,细胞核成团聚集在组织间浆液中;24 h后,肌肉组织细胞溶解加重,出现坏死,部分细胞核凋亡消失;在36 h,仅剩少许肌肉组织,成形细胞核完全消失;48 h后,肌肉组织全部溶解,形成空泡状,说明注射部位组织全部溃烂坏死。对照组实验猪腿部肌肉肌丝排列整齐,肌肉组织细胞形态完好,清晰可见细胞核全程无较大变化。与对照组各时间点比较,蛇毒组实验猪的WBC、RBC、LDH和CK水平均显著升高,而且AST与ALT在24 h内急剧上升,组间比较差异均具有显著统计学意义(均P<0.05)。结论成功建立中华眼镜蛇毒致局部组织坏死的猪模型,为蛇伤的救治提供良好实验模型。

N2对肺癌A549细胞的体外抗肿瘤活性及其机制研究

目的评价1-[4-(2-喹喔啉基)苯基]-5-(4-甲基苯基)-1,4-戊二烯-3-酮(N2)的体外抗肿瘤活性并初步探讨其作用机制。方法将不同浓度的N2和阳性对照药物吉非替尼(gefitinib)作用于非小细胞肺癌A549细胞,溶剂二甲基亚砜(DMSO)作为阴性对照组,利用CCK-8法、形态学观察、DAPI染细胞核,Annexin V-FITC/PI双染、罗丹明123染色和PI单染等方法检测N2对A549细胞的增殖、凋亡、周期的影响。结果N2浓度为20μM时作用24h、48h、72h,抑制率分别为47.54%、75.80%、87.60%,高于吉非替尼的抑制率,差异具有显著性(P<0.05);IC50值分别为30.85μM、6.61μM、5.68μM,与吉非替尼26.64μM、11.93μM、7.18μM相比48h、72h作用更强,差异具有显著性(P<0.05)。DAPI染色、细胞凋亡、线粒体跨膜电位实验显示N2诱导了A549细胞的凋亡,并且随着药物浓度增加,细胞凋亡率逐渐增加。细胞周期实验发现,N2能够将A549细胞阻断在G1期。结论N2对非小细胞肺癌A549具有较高的抑制活性和较低的细胞毒性,属于浓度依赖型周期抑制药物,可通过阻断细胞周期、抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡起到显著的抗肿瘤作用,提示N2是一种较理想的新型抗肿瘤药物。

尖吻蝮蛇蛇毒降纤酶的分离纯化及其经直肠给药的实验研究

目的:通过层析法从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化降纤酶,探索降纤酶经直肠给药进入血液循环而降低体内纤维蛋白原水平的可行性。方法:从尖吻蝮蛇蛇毒粗毒中分离降纤酶,经小鼠直肠给药后动物成像观察降纤酶在小鼠脏器中的分布,病理学检测降纤酶对组织的影响,质谱测定小鼠血浆成分,ELISA检测血浆纤维蛋白原水平。结果:尖吻蝮蛇蛇毒粗毒分离纯化获得电泳纯的降纤酶,经直肠给药后其安全性高,无急性毒性反应,直肠组织无明显病理改变。免疫组化结果显示降纤酶分布于直肠组织中(P<0.01),Shotgun质谱测得给药1 h后小鼠血浆存在降纤酶片段,动物成像显示给药3 h后染料标记的降纤酶分子分布大量分布于盲肠组织中,并随时间的延长其含量逐步减少。降纤酶经直肠给药能降低体内纤维蛋白原水平(P<0.01)。结论:尖吻蝮蛇蛇毒粗毒经二步层析法分离获得电泳纯的降纤酶;降纤酶可经直肠给药后吸收进入血液循环并降低体内纤维蛋白原水平。