电针对缺氧缺血性脑损伤小鼠抗神经细胞凋亡及促进神经可塑性的作用机制

目的探讨电针对缺氧缺血性脑损伤(HIBI)小鼠抗神经细胞凋亡及促进神经可塑性的作用及机制。方法将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和电针+转录因子NF-E2相关因子(Nrf)2 inhibitors组,每组20只。对模型组和电针组采用Rice法进行HIBI模型建模,假手术组仅进行切口后缝合处理。电针组电针部位选取“内关”穴,频率为2 Hz/100 Hz,电流终强度刺激为2 mA,2次/d,每次持续时间为20 min,共计5 d。采用盲法进行小鼠的神经功能评分;采用Morris水迷宫测试对小鼠空间学习记忆情况进行考察;采用氯化三苯甲基四氮唑(TTC)染色法检测小鼠脑组织的梗死情况;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法检测细胞凋亡情况;采用RT-PCR法检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-9 mRNA表达;采用蛋白免疫印迹法检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),脑源性神经营养因子(BDNF),突触后密度蛋白(PSD)95,突触小泡蛋白(SYP),血红素加氧酶(HO)-1和Nrf2的蛋白表达水平;采用免疫组化检测脑组织Nrf2和HO-1表达。结果与假手术组相比,模型组神经功能评分明显升高,逃避潜伏期明显延长,穿台指数显著降低,脑组织梗死面积比显著上升,TUNEL阳性凋亡细胞数量明显增加,Bax和Caspase-9 mRNA表达水平显著上调、Bcl-2 mRNA表达水平显著下调,bFGF、BDNF、PSD95、SYP、Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低,Nrf2和HO-1蛋白阳性细胞数明显减少(均P<0.05)。与模型组相比,电针组神经功能学评分明显降低,Morris水迷宫测试中小鼠的逃避潜伏期明显缩短,穿台指数显著升高(P<0.05),脑组织梗死面积比显著降低,TUNEL阳性凋亡细胞数显著减少,Bax和Caspase-9 mRNA表达显著下调、Bcl-2 mRNA表达显著上调,bFGF、BDNF、PSD95和SYP蛋白表达水平明显提高,Nrf2和HO-1蛋白阳性细胞数明显增加(P<0.05)。电针+Nrf2 inhibitors组神经功能学评分明显低于模型组,明显高于电针组;Morris水迷宫测试中逃避潜伏期较模型组明显缩短,较电针组明显延长,穿台指数明显高于模型组,明显低于电针组(P<0.05);脑组织梗死面积比介于模型组和电针组之间;TUNEL阳性凋亡细胞数量比模型组低,比电针组高;Bax、Caspase-9和Bcl-2 mRNA表达水平、bFGF、BDNF、PSD95和SYP蛋白表达水平及Nrf2和HO-1蛋白阳性细胞数都介于模型组和电针组之间(P<0.05)。结论电针对HIBI新生小鼠具有抗神经细胞凋亡、抗氧化及促进神经可塑性作用,并对小鼠认知功能的恢复具有一定的神经促进作用,这些作用可能与介导Nrf2相关信号通路相关。

从五苓散方证辨析其治疗充血性心力衰竭的可行性

充血性心力衰竭系多种心脏病末期常见的病理状态。临床表现为尿少、水肿、呼吸喘促、气短乏力、胸闷不适等症状。中医学将这些病理变化概括为心气亏虚,瘀血阻滞,水饮泛滥、心阳不足等;治宜益气温阳、利水活血、利水平喘等法;常选参附汤、生脉饮、葶苈大枣泻肺汤或数方加减。本文从《伤寒论》关于五苓散应用入手,略论五苓散治疗心衰的可行性。

中药复方专利治疗高脂血症的用药规律分析

目的通过分析中药治疗高脂血症的专利状况,研究中药治疗高脂血症的用药配伍规律。方法检索2000年1月—2020年7月国家专利数据库中治疗高脂血症的中药复方专利,录入EXCEL 2010建立数据库,运用SPSS 19.0采用频数分析、聚类分析、因子分析等技术研究中药复方的用药规律。结果共检索到治疗高脂血症的241项中药复方专利;中药频次结果显示共得到≥20次的高频中药30种,使用频率最多的药物为山楂,高频药物性味以温性、寒性和甘味、苦味为主,在归经方面排名前三的分别是肝经、脾经、胃经;基于聚类分析得到药物组合7类,因子分析共提取出10个公因子。结论本研究揭示了治疗高脂血症的中药复方专利的核心用药和方剂用药规律,对临床合理用药和新药的开发有一定的参考价值。

基于ERK1/2和p38 MAPK信号通路探讨温阳化饮方对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠的作用机制

目的探讨温阳化饮方对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠的作用以及对ERK1/2和p38 MAPK信号通路的调节作用。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组、实验组(n=15);先以卵蛋白(OVA)致敏刺激和雾化进行造模形成支气管哮喘模型大鼠,后以冰水喂养给以“饮冷”刺激,冰箱冷冻给以“形寒”刺激进行寒饮蕴肺证造模。实验组和对照组大鼠以剂量为30 mg/kg的温阳化饮方和雷帕霉素溶液(以医用生理盐水进行溶解)进行灌胃给药,正常组和模型组以等剂量的医用生理盐水灌胃,连续灌胃22 d。小微动物肺功能分析仪测定大鼠的肺功能;TUNEL检测肺组织中的细胞凋亡;ELISA法检测血清中细胞因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot检测肺组织中p-ERK1/2、p-p38 MAPK、凋亡相关蛋白Bax、Bcl2的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠吸气时的气道阻力(Rinsp)和呼气时的气道阻力(Rexp),血清中IL-6和TNF-α的含量,细胞凋亡率,p-ERK1/2、p-p38 MAPK、Bax的表达出现明显升高,肺胸通气时的动态顺应性(Cdyn)、Bcl-2的表达出现明显下降(均P<0.05),与模型组相比,对照组和实验组大鼠Rinsp和Rexp、血清中IL-6和TNF-α的含量,细胞凋亡率,p-ERK1/2、p-p38 MAPK、Bax的表达出现明显下降,Cdyn、Bcl-2出现明显升高(均P<0.05)。结论在支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠模型中,温阳化饮方能明显抑制炎性因子的释放,降低肺组织的细胞凋亡,这可能与抑制ERK1/2和p38MAPK信号有关。

糖尿病肾病的中医治疗

糖尿病肾病是糖尿病的并发症之一，临床多见，发病率20％～40％，是导致终末期肾病的基本原因，也是糖尿病导致死亡的重要原因。微量蛋白尿通过临床积极干预，肾功能损害可望逆转；在大量蛋白尿期，提示肾功能损害将大大增加，而且属于不可逆损害。所以关于糖尿病肾病的治疗，早期诊断能有效改善患者预后，减缓疾病的进一步发展，提高患者生活质量。