左金方靶向特洛细胞抗胃癌的作用机制研究

目的探究特洛细胞(TCs)作为左金方抗胃癌作用的潜在靶标。方法建立N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)联合幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的小鼠胃癌动物模型,模型成功后将小鼠分为模型组和左金方高、中、低剂量(1.456、0.728、0.364 g·kg^(-1))组,对照组不造模。每天ig给药1次,对照组、模型组给予等体积水。第38周收集小鼠胃组织标本,应用透射电子显微镜(TEM)、免疫组化、多重荧光免疫组化(mFIHC)技术对小鼠胃正常组织中TCs的形态、分布及免疫表型进行分析;苏木素-伊红(HE)检测各组小鼠胃病理改变;TEM观察各组小鼠胃中TCs的形态变化;mFIHC检测各组小鼠胃组织中TCs的数量。结果小鼠胃正常组织中,黏膜层TCs数量较少,黏膜下层和肌层中TCs相对较多,TCs的胞体呈长梭形或纺锤形,具有细长伴节状膨大的端足(Tps),与血管、神经和平滑肌伴行交联,形成网状结构;免疫表型为CD34^(+)/PDGFR-α^(+)/CD31−/c-kit−,与人胃组织中的一致。与对照组比较,小鼠胃癌组织中,TCs的形态发生改变,网状结构缺失,分布密度显著下降,数量显著减少(P<0.01);与模型组相比,左金方组均能改善TCs的变化,高剂量组明显减轻了胃组织的病理损伤,TCs的形态和网状结构逐渐恢复,数量回升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论TCs在小鼠胃组织各层均有分布,其免疫表型为CD34^(+)/PDGFR-α^(+)/CD31−/c-kit−,逆转TCs的缺失可能是左金方抗胃癌作用的重要机制。

辣木叶水提物对油酸钠-钠棕榈酸酯诱导的HepG2细胞脂质代谢及抗氧化能力的影响

目的探讨辣木叶水提物(MOLAE)对脂肪堆积人HepG2细胞的调节作用。方法制备MOLAE冻干粉;通过CCK-8法检测油酸钠-钠棕榈酸酯(O-P)对HepG2细胞活力的影响、油红O染色检测O-P对细胞脂质堆积的影响、试剂盒法检测O-P对细胞三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平的影响,筛选O-P诱导HepG2细胞脂质代谢异常模型的作用浓度及时间;CCK-8法检测辛伐他汀、MOLAE对HepG2细胞活力的影响,筛选安全作用浓度;设立对照组、模型组、辛伐他汀(阳性药,15μmol·L^(−1))组和MOLAE(3.125、6.250、12.500、25.000、50.000μg·mL^(−1))组,除对照组外,其他各组均给予0.4-0.2 mmol·L^(−1)的O-P诱导细胞脂质沉积,诱导3 h后开始给药,干预24 h后,CCK-8法检测细胞活性,油红O染色观察细胞中脂滴形成情况,试剂盒法测定细胞中TG、TC、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。结果确定造模方式为:0.4-0.2 mmol·L^(−1)的O-P作用HepG2细胞3 h后开始给药;10、15μmol·L^(−1)的辛伐他汀和3.125~100.000μg·mL^(−1)的MOLAE作用于HepG2细胞24、48 h后,不影响细胞活力。与模型组比较,不同浓度的MOLAE(3.125、6.250、12.500、25.000、50.000μg·mL^(−1))均能降低TG、TC、MDA水平(P<0.05、0.01),显著升高GSH、SOD水平(P<0.05、0.01)。油红O染色结果表明,辛伐他汀组和MOLAE组(12.5、25.0μg·mL^(−1))脂滴堆积现象均较模型组有明显改善。结论MOLAE能够降低O-P诱导的HepG2细胞中TG、TC水平,提高GSH、SOD水平和降低MDA水平,减少细胞中脂质堆积的现象。