糙皮侧耳PoLIM基因家族鉴定与表达分析

在NCBI、JGI数据库中检索糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)PoLIMs,进行生物信息学分析;测定PoLIM 1~PoLIM 6在25℃培养7 d(菌丝期),16℃培养5 d(扭结前期)、10 d(扭结后期)、15 d(原基期)、22 d(子实体期)的相对表达量以及菌丝在4℃冷胁迫12、24、48 h的相对表达量。结果表明:PoLIM1~PoLIM6的氨基酸数量为353~1 673;等电点为7.26~9.98;亚细胞定位预测均在细胞核中;有10个保守基序;启动子序列中包含光、生长素、MYB转录因子以及低温胁迫等响应元件。就相对表达量而言,PoLIM1在子实体期较高;Po LIM2在扭结后期和子实体期较高;Po LIM3、Po LIM4、Po LIM6在菌丝期较高;Po LIM5在扭结后期较高,在原基期及子实体期降低。与对照(25℃)相比,4℃冷胁迫时Po LIM1、Po LIM3、Po LIM5、Po LIM6的相对表达量升高。

转Pofst3糙皮侧耳菌株农艺性状和胞外酶活性分析

通过袋栽实验比较野生型、Pofst3过表达型和Pofst3反义沉默型糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株(分别记为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)的菌丝生长速度、原基数量、子实体数量、菌柄直径、菌盖直径等农艺性状;测定其漆酶、木聚糖酶、纤维素酶活性。结果表明:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ菌丝生长速度差异不显著;与Ⅰ相比,Ⅲ的原基和子实体数量多,菌柄直径大,菌盖直径小,原基和子实体中Pofst3的相对表达量低;与Ⅰ、Ⅱ相比,Ⅲ的漆酶、木聚糖酶及纤维素酶活性较高;Pofst3对糙皮侧耳发育的影响可能与其胞外酶活性相关。

以就业需求为导向的食用菌栽培学课程建设探索

【目的】为提高食用菌专业人才培养质量,更好地向社会输出食用菌领域专业能力较强的综合性人才。【方法】从优化教学内容、丰富教学手段、完善教学方法等三个方面着手,以就业需求为导向,就《食用菌栽培学》的课程建设进行探索。【结果】从教学成效来看,这种课程建设激发了学生的学习动力,提高了学生对食用菌的全面认识和选择食用菌为就业方向的意愿。【结论】实践证实该方法是一种行之有效的课程建设改革途径。

四种外源信号物质对糙皮侧耳菌丝热胁迫适应性的影响

研究外源信号物质H_(2)O_(2)、Ca^(2+)、NO(供体硝普钠,sodium nitroprusside,SNP)、1,4-二氨基丁烷(putrescine, Put)对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株Xin831热胁迫适应性的影响。以无菌水为对照,在培养基中分别添加不同浓度H_(2)O_(2)(0.01、0.05、0.25、1.25、6.25 mmol·L^(-1))、Ca^(2+)(2.5、5、10、20、40 mmol·L^(-1))、NO供体SNP(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mmol·L^(-1))、Put (25、50、100、200、400μmol·L^(-1)),待菌丝生长5 d后,分别设置常温(25℃)、40℃热胁迫处理24 h,测量并计算各处理下糙皮侧耳菌丝生长速率。结果表明:在常温条件下,0.01~1.25 mmol·L^(-1) H_(2)O_(2)、(2.5、10、20)mmol·L^(-1) Ca^(2+)、0.2 mmol·L^(-1) SNP、25~200μmol·L^(-1)Put对糙皮侧耳菌丝生长均具有促进作用,6.25 mmol·L^(-1) H_(2)O_(2)、40 mmol·L^(-1) Ca^(2+)、0.4~0.8 mmol·L^(-1) SNP抑制糙皮侧耳菌丝生长;在实验范围内,热胁迫条件下,不同浓度H_(2)O_(2)、Ca^(2+)、SNP、Put对糙皮侧耳菌丝恢复生长均具有促进作用。

翻转课堂在食品微生物学教学中的创新应用

食品微生物学是食品科学与工程、食品质量与安全、食品营养与检验教育等专业的一门重要的专业基础课程、必修核心课程,通过学习该课程,学生可以掌握微生物的基本形态特征、生理特性、分类、营养与代谢等基本理论,了解微生物对食品工业的影响和有益微生物在食品加工中的作用,并学会防治有害微生物的方法,能应用微生物方法分析解决一些食品污染问题。目前该课程多采用传统教学模式,理论与实践存在脱节现象,教学内容未能及时更新,实验课与普通微生物实验课存在较多重复之处,考核方式针对性不强,导致教学效果不太理想,无法培养出应用型人才。

尿素和麦麸对糙皮侧耳生长发育和子实体营养组成的影响

【目的】阐明尿素和麦麸对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)生长发育和子实体营养组成的影响及机制,为糙皮侧耳氮源选择和培养料配方优化提供依据。【方法】以棉籽壳为主料,尿素和麦麸为氮源,设计16种培养料配方,对比研究培养料氮源形态、氮质量分数和碳氮比值对糙皮侧耳菌丝生长、子实体生物学效率和营养成分的影响,并从培养料NH+4含量和基质降解酶活分析其影响机制。【结果】随着培养料氮源添加量的增加,糙皮侧耳菌丝生长速率逐渐降低,子实体生物学效率先升高后降低。糙皮侧耳以尿素或麦麸为氮源时,培养料的最适氮质量分数和碳氮比值均不同;添加5 g·kg^(-1)尿素时,子实体生物学效率最高为118.1%,对应培养料氮质量分数和碳氮比值分别为1.52%和25.0∶1;添加300 g·kg^(-1)麦麸时,子实体生物学效率最高为122.9%,对应培养料氮质量分数和碳氮比值分别为1.86%和20.8∶1。2种氮源栽培的糙皮侧耳子实体营养成分存在显著差异,添加300 g·kg^(-1)麦麸时子实体总氨基酸和粗蛋白质量分数比添加5 g·kg^(-1)尿素时分别高25.6%和29.4%。添加5g·kg^(-1)尿素或300 g·kg^(-1)麦麸均可提高糙皮侧耳菌丝木质纤维素降解酶活力,但糙皮侧耳对尿素和麦麸2种氮源的利用方式不同。【结论】从子实体生物学效率和营养成分来看,麦麸更适宜作为棉籽壳熟料栽培糙皮侧耳的氮源。

培养料不同含氮量和碳氮比对糙皮侧耳生长和营养成分含量的影响

采用不同比例(10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%)麦麸与玉米芯混合进行糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)熟料栽培,研究培养料不同含氮量和碳氮比对菌丝生长、生物学效率和子实体营养成分的影响。结果表明:在实验范围内,随着麦麸用量增加,培养料含氮量呈上升趋势,碳氮比呈下降趋势;菌丝生长速度呈下降趋势;生物学效率呈先升高后降低趋势;子实体粗蛋白含量呈上升趋势,而子实体总糖、粗脂肪和粗纤维含量呈下降趋势。综合菌丝长势、生物学效率、营养成分含量等因素,玉米芯、麦麸栽培糙皮侧耳的最佳配方:52%玉米芯、45%麦麸、2%石灰、1%轻质碳酸钙,含水量65%;对应培养料的含氮量和碳氮比分别为1.69%和21.90∶1。

平菇不同类型菌种及接种方式比较试验

为提高平菇生产效率、节约生产成本,以平菇8129菌株液体菌种和固体菌种作为试验菌种,考察液体菌种和固体菌种平铺、打穴接种方式对平菇熟料栽培菌丝生长、污染率、接种效率、生物学效率、成本等的影响。结果表明:液体菌种打穴接种效率高、省时省力、接种成本低、杂菌感染率低、菌丝生长快、生产周期短;不同类型菌种及接种方式对平菇产量无影响。结论:平菇集约化生产宜采用液体菌种打穴接种方式。

几种常见植物激素对平菇菌丝生长速度的影响

为了研究几种常见植物激素(植物生长调节剂)对平菇菌丝生长的影响,试验在含一定质量浓度的赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚丁酸(IBA)和6-苄氨基嘌呤(6BA)的固体平板上接种平菇菌丝,并观察其生长。结果表明,五种植物激素未改变平菇菌丝长势,菌丝洁白、浓密,菌落边缘整齐,但却不同程度地影响了菌丝生长速度;IBA质量浓度高可抑制平菇菌丝的生长,质量浓度低对菌丝生长无显著影响;2,4-D质量浓度低(2 mg/L和4 mg/L)显著提高平菇菌丝生长速度;试验质量浓度范围的GA3对平菇菌丝的生长无显著影响;试验质量浓度范围的IAA显著抑制平菇菌丝的生长速度;0.4 mg/L和0.8 mg/L 6BA显著促进平菇菌丝的生长。试验结果为平菇的植物激素在生产上应用提供了依据。

棉籽粕与棉籽壳混合料熟料栽培平菇研究

棉籽粕与棉籽壳混合熟料栽培平菇,探究棉籽粕用于平菇生产的可行性。结果表明:随着棉籽粕添加量的增加,平菇菌丝生长速度逐渐下降,但菌丝长势更好,出菇时间延长,子实体生物学效率先升高后降低。综合菌丝生长、出菇期和子实体生物学效率等,棉籽粕、棉籽壳混合熟料栽培平菇的最佳培养基配方:棉籽壳82%,棉籽粕15%,石灰2%,轻质碳酸钙1%(配方5);该配方平菇子实体生物学效率达121.86%,比对照提高22.07%,平菇生产净利润率由对照的205.0%提高至225.1%。

中国主要食用菌子实体γ-氨基丁酸含量测定及产量影响因素

氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种功能性非蛋白氨基酸,在维持人体健康方面发挥着重要作用。为探明食用菌子实体的GABA含量水平和影响食用菌GABA产量的因素,本研究通过对食用菌GABA提取和衍生条件优化,建立了食用菌GABA检测的9-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生HPLC法;利用该方法测定了20种中国主要食用菌子实体的GABA含量,并进一步探究了培养料氮源含量和种类、栽培时间对GABA含量的影响。食用菌GABA提取的最佳料液比、时间和温度分别为1:100、1 h和65℃。20种食用菌子实体的GABA含量在0.20-3.02 mg/g DW,存在显著种间差异,其中黄白银耳GABA含量最高(3.02 mg/g DW),香菇、银耳、金针菇、双孢蘑菇的GABA含量也较高,为1-2 mg/g DW。增加培养料含氮量可显著促进GABA积累,且添加尿素的促进效果明显优于添加麦麸。栽培时间也可影响子实体GABA产量,第二茬和三茬子实体的GABA含量显著高于第一茬子实体。综上可知,食用菌GABA含量不仅与品种密切相关,而且受到培养料中氮源含量和种类、栽培时间的影响。

糙皮侧耳热胁迫背景下RT-qPCR内参基因的筛选

通过文献报道和对糙皮侧耳基因组进行搜索,得到14个候选基因。以40℃热胁迫不同时间(0,1,2,4,8,12 h)的菌丝作为材料,通过反转录得到的候选基因片段,进行实时荧光定量PCR筛选,使用geNorm、NormFinder、BestKeeper 3种软件对结果进行分析,筛选得到稳定的内参基因β肌动蛋白(β-actin)、假定蛋白(sar1)。此外,选取2种热应激反应基因Hsp9、Hsp90作为靶基因,分别以筛选得到的稳定、不稳定基因以及多个内参基因作为内参进行分析,结果显示选用多个内参基因时能够缩小不同基因作为内参导致的结果差异。

四种信号类物质对糙皮侧耳冷胁迫适应性的影响

糙皮侧耳Pleurotusostreatus是我国主栽食用菌品种之一,经济效益较高。但是,大棚环境种植糙皮侧耳控制能力较差,受外界环境条件影响较大,在寒冷条件下糙皮侧耳易受冷胁迫影响,生长受到抑制。信号类物质在生物应对环境胁迫中发挥重要作用,本试验以全国广泛栽培的糙皮侧耳新831菌种为材料,通过4℃冷胁迫处理,加入不同浓度的信号类物质,研究了腐胺(putrescine,Put)、Ca^(2+)、H_(2)O_(2)、NO这4种信号类物质对糙皮侧耳冷胁迫适应性的影响。发现一定浓度的Put和NO可提高冷胁迫期间糙皮侧耳的菌丝生长速率,Put不仅可提高冷胁迫期间菌丝生长速率,还可以提高冷胁迫后的恢复生长速率。本文研究了4种信号类物质对糙皮侧耳冷胁迫适应性的影响,可为深入研究糙皮侧耳冷胁迫抗性机理提供借鉴和参考,具有一定的理论意义和应用价值。

热胁迫对糙皮侧耳抗霉菌侵染能力的影响

糙皮侧耳Pleurotus ostreatus具有较高的食用与药用价值,是世界上广泛栽培的食用菌之一,也是中国栽培范围最广的食用菌。糙皮侧耳生产中会受到多种环境因素的影响,其中温度是最重要的环境因子。为了探究高温对糙皮侧耳生理及抗霉菌侵染能力的影响,以生产菌袋为材料,分离并获得3种霉菌,经鉴定为卷枝毛霉Mucor circinelloides、四孢脉孢菌Neurospora tetraspora和长柄木霉Trichoderma longibrachiatum;进一步研究发现,高温显著抑制糙皮侧耳菌丝生长,高温胁迫后,糙皮侧耳抗霉菌侵染的能力降低、微观结构遭到破坏、糙皮侧耳菌丝胞外多糖含量显著增加并且吸附霉菌孢子的能力增强。本研究为阐明高温降低糙皮侧耳霉菌感染抗性的作用机制提供科学依据。

磷酸氢二铵对糙皮侧耳菌丝生长及基质降解酶活性的影响

氮源种类和浓度均会对糙皮侧耳Pleurotus ostreatus菌丝长势、生长速率以及代谢产生影响,而氮匮乏与氮过量积累都会对糙皮侧耳的生长产生不利影响。为了研究氮源对糙皮侧耳菌丝生长和基质降解酶活性的影响,本研究选取磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4]作为唯一氮源,通过在培养基中添加不同浓度的磷酸氢二铵检测糙皮侧耳菌丝生长速率和木质纤维素降解酶的活性,筛选出糙皮侧耳生长的最适磷酸氢二铵浓度。结果表明,当磷酸氢二铵的添加浓度区间为10–20 mmol/L时菌丝长势最好。以缺氮时的酶活作为对照,当磷酸氢二铵的添加浓度为10 mmol/L时,羧甲基纤维素酶的活力最强,显著高于对照组(P<0.05);当添加浓度为5 mmol/L时,滤纸纤维素酶的活力最强,显著高于对照组(P<0.05),而10 mmol/L浓度下的酶活力比5 mmol/L时稍有下降,但二者之间无显著性差异(P>0.05);当添加浓度为40 mmol/L时,木聚糖酶的活力最强,显著高于对照组(P<0.05);当添加浓度为10mmol/L时,漆酶的活力最强,显著高于对照组(P<0.05)。基质降解酶活性越强,越有利于糙皮侧耳对基质的降解利用。本研究为糙皮侧耳的栽培提供理论和实践指导,对糙皮侧耳产业发展具有积极意义。