干性相关分子Nanog在食管鳞状细胞癌组织中高表达并促进食管鳞癌细胞的侵袭转移:基于激活TGF-β信号通路

目的 探讨食管鳞状细胞癌(鳞癌)中干性相关分子胚胎干细胞关键因子(Nanog)和侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达及其之间的调控关系。方法 运用免疫组织化学技术检测127例食管鳞癌组织和82例癌旁正常组织中Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白的表达情况,分析Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白的表达水平、相关性及与食管鳞癌患者的临床病理参数和预后之间的关系;采用GEO数据库分析Nanog等干性相关分子主要富集通路;应用TIMER在线网站分析食管癌中TβR1和MMP-2及MMP-9的相关性。在体外运用siRNA转染的方式将食管鳞癌细胞株分为正常对照组、Nanog低表达组,采用划痕实验分析其对食管鳞癌细胞迁移的影响,qRT-PCR及Western blotting检测两组之间TβR1、p-Smad2/3、MMP-2/MMP-9的表达情况。结果 Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中表达均上调(χ^(2)=70.475,P<0.01;χ^(2)=34.415,P<0.01;χ^(2)=46.605,P<0.01),且呈正相关(r=0.205,P=0.045;r=0.307,P<0.001)。Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白表达水平与食管鳞癌的浸润深度相关(χ^(2)=23.9,P<0.01;χ^(2)=6.029,P<0.05;χ^(2)=11.89,P<0.05),有淋巴结转移的样本中,MMP-2/MMP-9蛋白表达水平高于无淋巴结转移的样本(χ^(2)=10.08,P<0.01;χ^(2)=5.731,P<0.05)。MMP-2/MMP-9蛋白表达与食管鳞癌患者的年龄、性别和肿瘤分化程度无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白高表达组的食管鳞癌患者生存时间短于低表达组(P<0.001;P=0.004;P=0.017);生物信息学分析显示,Nanog等干性相关分子主要富集在转化生长因子-β(TGF-β)信号通路,MMP-2/MMP-9与TβR1表达在食管癌中呈正相关关系。体外划痕实验结果显示,Nanog促进食管鳞癌细胞系的迁移;qRT-PCR及Western blotting结果显示,敲低Nanog后,TβR1、p-Smad2/3、MMP-2/MMP-9的表达水平明显降低。结论 Nanog和MMP-2/MMP-9蛋白在食管鳞癌患者组织中高表达且呈正相关,其与食管鳞癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及预后密切相关,且Nanog通过TGF-β信号通路影响MMP-2/MMP-9蛋白的表达。

基于M2型巨噬细胞来源的Siglec15对食管鳞癌细胞恶性生物学行为影响的生物信息学分析及实验验证

目的:采用生物信息学方法分析M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2-TAMs)来源唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15(Siglec15)促进食管鳞状细胞癌(ESCC)恶性生物学行为的作用,并通过细胞实验对其进行验证。方法:应用肿瘤免疫评价资源(TIMER)数据库分析Siglec15在泛癌和癌旁正常组织中的表达差异及免疫浸润情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测M2-TAMs和ESCC EC109及KYSE150细胞中Siglec15 mRNA表达水平。在M2-TAMs与ESCC细胞非接触性共培养基础上,分别设置EC109/KYSE150组、EC109/KYSE150+si-NC组(转染si-NC序列)和EC109/KYSE150+si-Siglec15组(分别转染si-Siglec15#1和si-Siglec15#2序列),采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组细胞中迁移和侵袭细胞数,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:生物信息学分析,与癌旁正常组织比较,食管癌、结肠癌和头颈部鳞状细胞癌等泛癌组织中Siglec15 mRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01),且食管癌组织中Siglec15 mRNA表达水平与巨噬细胞浸润呈明显正相关关系(P<0.05);与EC109细胞和KYSE150细胞比较,M2-TAMs中Siglec15 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。EC109/KYSE150组、EC109/KYSE150+si-NC组和EC109/KYSE150+si-Siglec15组细胞增殖率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与EC109/KYSE150组比较,24和48 h时EC109/KYSE150+si-NC组细胞划痕愈合率升高(P<0.01),迁移和侵袭细胞数增加(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01);与EC109/KYSE150+si-NC组比较,EC109/KYSE150+si-Siglec15#1组和EC109/KYSE150+si-Siglec15#2组细胞划痕愈合率降低(P<0.05),迁移和侵袭细胞数减少(P<0.05),细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:M2-TAMs来源Siglec15可能是促进ESCC细胞迁移和侵袭的关键因子。

土石过水围堰过水期最不利工况及其流量确定

本文系统分析了影响土石过水围堰溢流工况的主要因素 ,提出衡量最不利工况的指标和确定最不利流量的方法 ,为土石过水围堰堰体下游护坡结构及消能防冲设施设计提供了理论依据。通过理论计算结果与模型试验现场观测资料数据对比分析 。

Cu(100)表面吸附HCN和HNC的密度泛函研究

采用密度泛函方法 ,以原子簇Cu14 为模拟表面 ,对氢氰酸 (HCN)和异氰酸 (HNC)在Cu( 10 0 )表面上不同吸附位的吸附情况进行了研究 .结果表明 :HCN和HNC分别通过原子N和C垂直吸附在表面上时 ,顶位是其最佳吸附位 ,且是吸附能为 18 5kJ·mol-1和 42 6kJ·mol-1的弱吸附 ,计算结果与实验相符 .C—N(HCN)键或N—C(HNC)键偏离垂直的分子轴线的吸附体系均不稳定 .顶位吸附时HCN和HNC分子的C—N键振动频率均发生蓝移 .

乙酰半胱氨酸对特发性肺间质纤维化肺成纤维细胞增殖及胶原合成的影响及机制

目的探讨乙酰半胱氨酸(NAC)对特发性肺间质纤维化(IPF)肺成纤维细胞增殖及胶原合成的影响及其机制。方法分离培养IPF患者及正常对照肺成纤维细胞,MTT法检测NAC(5、10、20、40mmol/L)对细胞增殖的影响;再分为NAC(20mmol/L)、重组人转化生长因子-β1(TGF-β1组)单用及联用组和正常对照组,RT-PCR检测I型前胶原mRNA的表达变化,Western blotting检测α-肌动蛋白(α-SMA)及信号转导与转录激活因子-3(STAT3)的表达。结果 5、10、20、40mmol/L NAC对正常及IPF患者肺成纤维细胞增殖均具有抑制作用,且具有明显的剂量依赖性。与正常对照组相比,NAC组能够明显抑制正常及IPF肺成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA的表达(分别为0.28±0.04vs.0.52±0.07,P=0.001;0.56±0.08 vs.0.74±0.03,P=0.017);NAC联用TGF-β则可以减弱其抑制作用(0.75±0.03 vs.0.28±0.04,P=0.012;0.71±0.03 vs.0.56±0.08,P=0.000)。正常肺成纤维细胞表达一定水平的α-SMA,而IPF肺成纤维细胞则表达水平明显增高(0.97±0.06 vs.0.63±0.04,P=0.001),NAC能够明显抑制IPF肺成纤维细胞α-SMA及STAT3表达(分别为0.48±0.02 vs.0.97±0.06,P=0.000及0.43±0.05 vs.0.76±0.02,P=0.000),NAC联用TGF-β则可以减弱其抑制作用(0.93±0.04 vs.0.48±0.02及0.89±0.03 vs.0.43±0.05,P均=0.000)。结论 NAC能够抑制正常及IPF肺成纤维细胞增殖及胶原合成,这可能与抑制α-SMA及STAT3的表达有关,但这种作用可被TGF-β所抑制。

基于生物信息学分析肝细胞癌中GNPDA2与免疫相关性

目的:通过生物信息学方法分析泛癌中葡萄糖-6-磷酸脱氨酶2(GlcN6P deaminase 2,GNPDA2)表达水平及免疫相关性;浅显分析肝细胞癌中(Hepatocellular Carcinoma,HCC)DNA甲基化与GNPDA2相关性。方法:利用ULCAN网站分析泛肿瘤中GNPDA2表达水平与生存差异;运用Spearman相关性分析GNPDA2表达与免疫细胞浸润及免疫分子相关性;预测DNA甲基化调节GNPDA2表达能力。结果:HCC中存在GNPDA2表达升高(P<0.001),其过表达可缩短患者生存期(P<0.01);GNPDA2过表达与免疫有关分子存在一定相关性(r>0.1,P<0.05),并促进免疫细胞浸润(r>0.2,P<0.05);DNA低甲基化可上调GNPDA2表达(r=-0.26,P<0.001)。结论:HCC中GNPDA2过表达可促进免疫细胞浸润并与DNA甲基化呈负相关。

甲状旁腺全切加前臂移植术对红细胞生成素治疗肾性贫血的作用

目的：研究１０例患者行“甲状旁腺全切（ＰＴＸ）加前臂移植术”对红细胞生成素治疗肾性贫血的有益作用。方法：观察１０例继发性甲状旁腺功能亢进（ＳＨＰＴ）患者手术前、后３～５６个月平均血细胞比容（ＨＣＴ）和重组人类红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）的使用剂量，同时检测血清全段甲状旁腺素（ｉＰＴＨ）并与术前３个月的ＨＣＴ、ｒＨｕＥＰＯ的使用剂量作相关分析。结果：８例患者ＰＴＸ１个月后，血ＨＣＴ开始上升，术后３个月，１０例患者的平均ＨＣＴ由术前（２１．４±１．８）％升至（２９．１±１．９）％，ｒＨｕＥＰＯ的平均剂量由术前每周（１００．０±８．３）Ｕ／ｋｇ（６０～１５０Ｕ／ｋｇ）降至（７０．４±６．１）Ｕ／ｋｇ（６０～８５Ｕ／ｋｇ）。随访２～５年，疗效稳定可靠。ＰＴＸ前、后ｒＨｕＥＰＯ的剂量及ＨＣＴ的各自改变差异均有显著性（％Ｐ％＜０．０５）。ｉＰＴＨ也由术前（１４８４．７５±７２．４０）ｐｇ／ｍｌ降为（５０．１３±９．３０）ｐｇ／ｍｌ。ＨＣＴ与ｉＰＴＨ呈负相关。结论：ＰＴＸ能明显改善慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）患者合并ＳＨＰＴ的贫血，提高ｒＨｕＥＰＯ的疗效。

病理学实验教学的改革与探索

实验教学是病理学教学中的重要环节,如何更有效地进行病理实验教学成为许多病理学教育工作者关注的课题,在如何调动学生对病理学实验学习的积极性,提高学生的综合能力,激发学生的思维和创新意识等方面进行尝试性的改革与探索。

HLA-DRB1^＊1501和DQB1^＊0602与新疆哈萨克族HPV感染及食管癌发生的相关性研究

目的：从基因水平探讨新疆哈萨克族食管鳞癌的HPV16E6感染及食管鳞癌发生与HLA—DRB1，DQB1等位基因的遗传易感性，为寻找哈萨克族食管鳞癌的易感基因提供参考。方法：采用聚合酶链反应（PCR）技术检测200例哈萨克族食管鳞癌和150例哈族萨克正常人群HPV16E6基因的表达情况，运用序列特异性引物聚合酶链反应技术（PCR—SSP），检测新疆哈萨克族食管鳞癌患者200例，哈萨克族正常人群食管膜膜150例的HLA—DRB1^＊1501和HLA—DQB1^＊0602的分布。结果：新疆哈萨克族食管鳞癌患者HPV16E6感染率为41％，明显高于哈萨克族正常人群感染率的14％（P〈0．001，OR=3．94）；HPV16E6感染与哈萨克族正常人群HLA—DRB1^＊1501，HLA—DQB1^＊0602的无相关性（P〉0．05）；新疆哈萨克族食管鳞癌患者HLA—DRB1^＊1501和HLA～DQB1^＊0602基因分布频率显著高于哈萨克族正常人群（0．455：0．232，P〈0．001，OR=2．78；0．69比0．554，P=0．006，OR=1．80）；HLA～DQB1^＊0602基因阳性率在中低分化鳞癌组中（68．8％）的分布高于高分化鳞癌组（31．2％），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：HPV16E6的感染可能是新疆哈萨克族食管癌发生的重要因素之一。HLA—DRB1^＊1501和HLA—DQB1^＊0602是哈萨克族食管鳞癌的易感基因，其中HLA—DQB1^＊0602与哈萨克族食管鳞癌的分化程度有关。

CN在Pt(100)表面吸附的密度泛函研究

采用密度泛函方法,以原子簇Pt14为模拟表面,对CN自由基分子在Pt(100)表面上不同吸附位的吸附情况进行了研究.结果表明,CN分子吸附在Pt(100)面上时,通过原子C垂直吸附在表面顶位是其最佳吸附方式,CN键振动频率明显发生蓝移,与实验事实相吻合;而在桥位及四方穴位吸附时CN键振动频率均发生红移.吸附前后,CN分子的σ、π电子与底物间的电荷转移的差异决定了CN键振动频率的不同变化.

齿轮传动中NW轮系可装配条件研究

论述了NW型周转轮系的装配条件 。

61例尿毒症患者甲状旁腺全切加前臂移植术后低钙血症的发生与处理

目的针对内科治疗无效的继发性甲状旁腺功能亢进（sHPT）的尿毒症患者行甲状旁腺全切加前臂移植术，分析术后患者低钙血症的发生与处理。方法61例患者术后立即监测血钙浓度，并静脉补充葡萄糖酸钙，使血钙维持在1．8～2．2mmol／L之间，统计手术前、后患者的全段甲状旁腺激素（iPTH）、血清钙磷乘积和碱性磷酸酶（AKP）水平以及手术切除的总的腺体质量。结果56例患者（占91．7％）术后12-24h即出现血钙低于1．8mmol／L，静脉立即补充葡萄糖酸钙，约合元素钙（18±6）g，补钙剂量与术前血iPTH（r=0．621，P〈0．01）、钙磷乘积（r=0．719，P〈0．01）、AKP（r=0．606，P〈0．01）及总的切除腺体质量（r=0．716，P〈0．01）相关。结论低钙血症是患者甲状旁腺术后的常见表现，与SHPT的严重程度有关，术后及早监测血钙和静脉补钙可有效、安全预防严重低钙血症的发生。

Cu(100)表面吸附CN的密度泛函研究

采用密度泛函方法 ,以原子簇Cu14 为模拟表面 ,对CN自由基分子在垂直和平行Cu( 10 0 )表面不同位置的吸附情况进行了研究 ,结果表明 :通过原子C垂直吸附在表面的顶位是其最佳吸附方式 ,吸附后CN键振动频率发生蓝移 ;而其它吸附方式中CN键振动频率均发生红移 .DOS和电荷转移分析指出CN通过C端吸附在表面顶位位置时 ,Cu与CN之间具有较强的σ成键和较弱的π反键特征 .

丹参氧合血肺动脉持续灌注对先天性心脏病合并肺动脉高压患儿体外循环手术中的肺保护作用

目的探讨丹参氧合血进行持续肺动脉灌注对合并肺动脉高压的先心病患儿在体外循环(cardiopul monarybypass,CPB)中的肺保护作用。方法30例先天性心脏病合并肺动脉高压的患儿随机分为试验组和对照组,每组15例。2组患儿均在CPB下进行心内畸形矫治手术。试验组在CPB肺动脉灌注氧合血中加入20 mL丹参注射液,对照组在CPB中仅行常规肺动脉灌注。2组患儿在CBP前、主动脉开放后0、6、12、24 h时抽取动脉血2 mL,采用ELISA法检测白细胞介素8(IL-8)和丙二醛(MDA)的水平。并抽取动脉血进行血气分析,计算CPB前、主动脉开放后0、6、12、24 h时的呼吸指数(RI)及氧合指数(QI),并记录气道峰压进行统计分析。结果试验组术后6、12、24 h血清MDA、IL-8水平均低于对照组(P均<0.05),试验组术后6、12、24 h RI、QI均明显高于对照组(P均<0.05),试验组术后6、12 h气道峰压均明显低于对照组(P均<0.05)。结论丹参氧合血肺动脉持续灌注对先天性心脏病患儿合并肺动脉高压者在CPB中的肺保护作用较单纯持续肺动脉灌注要好。

层状金属配位聚合物[｛NIX_2(bipy)｝n](X=F,Cl,Br,I;bipy=4,4'-bipyridyl)的能带结构研究

用紧束缚（EHT）晶体轨道方法对层状金属配住聚合物[{Nix2。（bipy）｝n]（X=F，Cl，Br，I；bipy=4，4’－bipyridyl）进行了能带结构计算，并利用键向量方法对这一系列聚合物能带特征和成键性质进行了讨论。研究表明，Fermi能级附近的能带主要是金属镍原子和卤素原子之间形成的d－pσ反键作用，这一反键作用的强弱对导电性起决定作用。

基于DSP的组合导航系统设计

组合导航系统在军民用中有着巨大的应用前景,在高空无人飞行中,组合导航系统的性能直接影响到飞行控制的精度和稳定性。为设计结构紧凑、体积小巧、精度较高、稳定性好的组合导航系统,对微型组合导航系统进行了研究,设计了信号调理电路、模数转换电路、串口扩展电路,并根据所选用的DSP型号—TMS320C6713的特点进行了硬件版图设计,最后对所设计的组合导航系统给出了软件设计。仿真结果表明所设计的组合导航系统稳定性好,精度较高。

1,25-(OH)_2-D_3大剂量间隙疗法治疗中重度继发性甲旁亢

目的:观察1,25-(OH)2-D3大剂量间隙疗法治疗中重度继发性甲旁亢的临床疗效。方法:回顾性分析1996～2005年93例全段甲状旁素(iPTH)>500pg/ml的接受小剂量1,25-(OH)2-D3(0.25!g,每日1次,口服)治疗8周无效而改用大剂量1,25-(OH)2-D3(2!g,每周2次,口服)间隙疗法的患者资料,包括性别、年龄、平均透析年限、治疗前后iPTH、碱性磷酸酶(AKP)的平均水平,1,25-(OH)2-D3的剂量、疗程。治疗过程中血清钙、磷、AKP的水平以及相关的影像学资料。结果:经口服2!g、每周2次1,25-(OH)2-D38周的治疗,有74例患者iPTH有明显下降,差异有统计学意义;19例因高钙磷乘积退出观察,疗效不明显。经B超、ECT检查发现17例甲状旁腺增生,行甲状旁腺全切加自身前臂种植术,术后疗效良好。结论:1,25-(OH)2-D3大剂量间隙疗法治疗中重度继发性甲旁亢是一种行之有效的方法。对于治疗无效患者,如有甲状旁腺增生者可考虑手术治疗。

甲状旁腺全切加前臂移植术对甘油三酯代谢的影响

目的:探讨甲状旁腺全切(PTX)加前臂移植术对血清甘油三酯(TG)代谢的有益作用。方法:观察10例继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)患者手术前、后3～68个月TG的浓度,同时检测血清全段甲状旁腺素(iPTH),并将手术前后的TG、iPTH作相关分析。结果:7例患者PTX1月后,血TG开始降低,术后3个月,10例患者的平均TG由术前(2.34±0.72)mmol/L降至(1.51±0.54)mmol/L。随访2～6年,疗效稳定可靠。PTX前、后TG的改变差异有显著性(P<0.05)。iPTH也由术前(1484.75±72.40)pg/ml降为(50.13±9.30)pg/ml。TG与iPTH呈正相关。结论:PTX能明显改善慢性肾功能衰竭患者合并SHPT的TG代谢。

髓内针内固定治疗16例股骨开放性粉碎型骨折无并发症的报告

我院从1989年—1994年收治开放性粉碎型骨折22例,其中16例行梅花髓内针内固定治疗取得满意效果,报告如下

病理学临床思维能力培养的教学改革研究

病理学教学在医学生临床思维能力的培养中有其独特的优势,在教学中需要整合和优化教学资源,精心设计临床案例,培养学生逆向临床思维能力,增加临床思维能力考核比例,从而完整、系统地培养医学生的临床思维能力,为他们今后成为一名合格临床医生奠定基础。