恒山黄芪和宁夏枸杞的多糖体外抗氧化活性比较研究

以恒山黄芪和宁夏枸杞为材料,采用超声波法提取其多糖成分,比较分析恒山黄芪多糖、宁夏枸杞多糖以及二者复合多糖的抗氧化活性,为开发新的天然抗氧化剂提供依据。结果显示:(1)恒山黄芪多糖的总抗氧化能力[T-AOC=(0.67±0.12)U/mg]和超氧阴离子自由基清除能力(EC50=2.34 mg/mL)均高于宁夏枸杞多糖[TAOC=(0.52±0.07)U/mg,EC50=4.28mg/mL],而恒山黄芪多糖的羟自由基清除能力(EC50=1.36mg/mL)则低于宁夏枸杞多糖(EC50=0.98mg/mL)。(2)在相同浓度下,二者按照1∶1比例配成的复合多糖总抗氧化能力[T-AOC=(0.79±0.02)U/mg]、羟自由基清除能力(EC50=0.84mg/mL)、超氧阴离子自由基清除能力(EC50=1.37mg/mL)均高于单种多糖。(3)恒山黄芪多糖、宁夏枸杞多糖以及二者复合多糖的抗氧化能力均与其浓度呈正相关关系。研究表明,恒山黄芪多糖具有较好的抗氧化活性,是具有开发潜力的天然抗氧化物质,且恒山黄芪多糖与宁夏枸杞多糖复合配伍后具有协同效应,抗氧化活性增强。为开发新的天然抗氧化剂提供参考。

潞党参多糖对宫颈癌细胞SiHa增殖和迁移的影响

以上党地区道地药材潞党参的多糖成分(Lu Dangshen polysaccharides,LDP)为对象,研究其对人宫颈癌细胞Si Ha的增殖及迁移的影响。通过MTT法检测LDP对Si Ha细胞增殖的影响。通过细胞黏附试验、铺展试验和划痕试验,分析LDP对Si Ha细胞迁移的影响。结果显示,LDP显著抑制了Si Ha细胞的增殖,IC50值为0.68 mg/m L;LDP明显抑制了Si Ha细胞与外基质的黏附作用,延缓了其铺展过程,并抑制了其体外迁移运动能力。LDP对人宫颈癌细胞Si Ha的增殖、黏附、铺展以及迁移运动能力具有显著的抑制效应,具有开发为肿瘤治疗的辅助药物及保健食品的价值。

潞党参多糖的提取及其抗氧化活性分析

以长治地区道地药材潞党参为研究对象,比较分析水提取法、碱提取法、微波提取法和超声波提取法的多糖得率,初步确定碱提取法(提取率为13.28%)是最佳的潞党参粗多糖的提取方法,其次为微波提取法(提取率为10.02%)。通过Sevag法和透析法依次除去粗多糖中的蛋白成分和小分子后得到精制多糖,然后利用相关试剂盒检测其抗氧化活性。结果显示,精制的潞党参多糖(Lu Codonopsis pilosula polysaccharide,LCPP)的总抗氧化活性为0.90±0.15 U/mg,清除羟自由基EC50值为1.73 mg/m L,清除超氧阴离子自由基EC50值为6.87 mg/m L。与阳性对照水溶性维生素E(Trolox)相比,LCPP具有与之相当的羟自由基清除能力,以及相对较低的超氧阴离子自由基清除能力和总抗氧化能力。因此,道地药材潞党参的多糖成分具有良好的抗氧化活性,在药物和食品领域具有潜在的开发价值。

红花和灯盏花素注射液体外抗氧化和抗补体活性比较研究

通过比较分析活血化瘀类中药注射液红花和灯盏花素的抗氧化和抗补体活性,深入探讨二者的药理活性。利用试剂盒检测红花和灯盏花素注射液的总抗氧化能力(T-AOC)、羟自由基清除能力以及超氧阴离子自由基清除能力,并通过采用细胞溶血法,检测二者对补体经典途径和旁路途径的抑制效应。结果显示:二者皆具有抗氧化活性,其中灯盏花素注射液的总抗氧化能力(T-AOC=1.74±0.06 U/mg)、羟自由基清除能力(EC_(50)=0.96 mg/mL)以及超氧阴离子清除能力(EC_(50)=7.22 mg/mL)均强于红花注射液(T-AOC=0.09±0.01 U/mg,羟自由基清除能力EC_(50)=27.13 mg/mL,超氧阴离子清除能力EC_(50)=19.22 mg/mL),其中灯盏花素注射液的总抗氧化能力强于BHT(T-AOC=0.54±0.03 U/mg);在抗补体活性方面,灯盏花素注射液(CH_(50)=0.27 mg/mL,AP_(50)=0.44 mg/mL)均强于红花注射液(CH_(50)=10.07 mg/mL,AP_(50)=4.53 mg/mL),但是弱于阳性对照肝素钠(CH_(50)=0.11 mg/mL,AP_(50)=0.08 mg/mL)。研究表明,红花和灯盏花素注射液都具有较强的体外抗氧化和抗补体活性,而灯盏花素注射液均强于红花注射液。

NMD机制及其对人类遗传病的治疗意义

无义介导的mRNA降解机制(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)是真核细胞内重要的RNA质量监控机制,能够识别并降解含有提前终止子(premature termination codon,PTC)的mRNA,避免细胞内积累有害的截短蛋白质产物。同时,NMD机制还调控着大量不含PTC的mRNA稳定性,影响其蛋白质产物的含量。现综述了NMD机制的底物、调控因子及其对人类遗传病治疗意义的最新研究进展。

党参多糖对Ana-1巨噬细胞和小鼠的免疫调节作用

以中药党参为材料,研究其多糖成分对小鼠巨噬细胞Ana-1 和小鼠的免疫活性的影响。通过MTT 实验,检测党参多糖对Ana-1 细胞增殖的影响。利用ELISA 实验,检测不同浓度的党参多糖对Ana-1 细胞释放TNF-α和IL-1β的影响。用不同剂量的党参多糖灌胃小鼠,分别测定小鼠脾脏指数、淋巴细胞增殖活力以及血清中TNF-α和IL-1β的含量。体外实验结果显示党参多糖不影响Ana-1 细胞的增殖,却显著提高TNF-α和IL-1β的分泌,并呈浓度依赖关系。体内实验结果显示:与对照组相比,党参多糖中、高剂量组小鼠胸腺指数、淋巴细胞增殖指数以及血清中TNF-α和IL-1β的含量均显著增高,呈剂量依赖关系。因此,党参多糖能够有效提高小鼠巨噬细胞Ana-1 的免疫活力,增强小鼠的免疫功能。

黄芩多糖的提取及其抗氧化和抗肿瘤活性研究

以中药黄芩(Scutellaria baicalensis)为材料,通过比较分析水提醇沉法、微波提取法及超声波提取法的提取率,寻找最优的提取方法。对黄芩多糖(S.baicalensis polysaccharides,SBP)进行精制后,通过体外抗氧化实验,检测SBP的羟自由基和超氧阴离子的清除能力及总抗氧化能力。通过MTT实验检测SBP对胃癌细胞MGC80-3增殖的影响,通过形态观察评估SBP对MGC80-3细胞形态的影响,然后通过western blot实验探讨其潜在分子机制。结果显示,微波提取法的SBP得率最高(7.26%);SBP对羟自由基具有明显的清除能力,对超氧阴离子具有一定的清除能力,具有较为理想的总抗氧化能力;SBP能够有效抑制MGC80-3细胞增殖,并影响其细胞形态;在蛋白水平上,低浓度SBP有效提高了Akt和p-IκB α水平,IKK β和pro-caspase3水平,以及LC3 B/LC3 A比值和cleave-caspase 3/pro-caspase 3比值则与SBP浓度呈正相关因此,SBP具有较好的抗氧化和肿瘤细胞抑制作用,具有开发为抗氧化剂和抗肿瘤药物的潜在价值。

蓝莓皮色素的理化性质及其抗氧化和抗肿瘤活性分析

利用酸化乙醇提取蓝莓皮色素,确定其溶解性和特征光吸收波长,检测其稳定性,利用相关试剂盒检测其抗氧化活性,利用MTT法检测其对人胃癌细胞AGS的影响。结果显示,蓝莓皮色素易溶于水和甲醇,可溶于乙醇,特征光吸收波长为520 nm;在60℃以上、还原剂以及Ca^(2+)条件下不稳定,在p H小于5、氧化剂、Na Cl和蔗糖、常见离子以及紫外线和日光照射条件下稳定性良好;对DPPH自由基和羟自由基有很强的清除活性,对超氧阴离子的清除能力较强;能强烈抑制AGS细胞生长,并导致细胞内部空泡化。蓝莓皮色素稳定性良好,具有较强的抗氧化和抗肿瘤活性,值得更深入的研究以提升其附加价值,本研究可为蓝莓皮的资源化利用提供参考。

潞党参多糖的抗补体活性分析

以山西上党地区著名道地药材潞党参为材料,分析其多糖成分的抗补体活性。首先,通过细胞溶血实验,分析潞党参多糖(Lu Codonopsis pilosula polysaccharides,LCPP)对补体经典途径和旁路途径的影响。结果表明,LCPP具有一定抗补体活性,CH_(50)值为2.061±0.127 mg/mL,AP_(50)值为6.725±0.895 mg/mL,并表现为明显的量效关系。随后,利用人HepG2细胞,通过实时定量PCR实验,分析LCPP对补体系统重要成分C3表达的影响,发现LCPP能够显著抑制肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人HepG2细胞中C3的表达。以上结果提示,潞党参是一种潜在的补体抑制剂,在治疗补体过度激活所导致的自身免疫性疾病方面具有应用前景。

连翘总黄酮对胃癌细胞MGC80-3增殖的影响

以长治连翘为材料,分析其黄酮成分对胃癌细胞MGC80-3的影响。利用乙醇回流提取长治连翘的总黄酮成分,通过MTT法、平板集落形成实验、RT-PCR以及Western blot技术,探讨连翘黄酮提取物对胃癌细胞MGC80-3的抑制作用及其潜在分子机制。结果显示连翘黄酮能显著抑制MGC80-3细胞的增殖和集落形成能力,其分子机制可能是连翘黄酮通过下调mTOR的蛋白水平,上调Bax以及细胞自噬因子Beclin 1以及LC3 Ⅱ的表达水平,促进细胞自噬性死亡,进而抑制MGC80-3细胞的存活。

恒山黄芪多糖对人宫颈癌细胞SiHa的抑制效应分析

本文旨在探讨道地药材恒山黄芪的多糖成分对人宫颈癌细胞Si Ha生长和迁移能力的抑制效应。通过采用MTT法验证恒山黄芪多糖对Si Ha细胞生长活力的抑制效应,利用细胞黏附试验和铺展试验检测恒山黄芪多糖对Si Ha细胞的粘附能力和铺展能力的影响,并采用划痕试验检测恒山黄芪多糖对Si Ha细胞迁移运动能力的抑制效应。结果表明:恒山黄芪多糖具有抑制Si Ha细胞增殖的活性(IC50值为0.25 mg/m L),并且在低浓度(0.0625 mg/m L)时仍然能够有效抑制其生长;与对照细胞相比,恒山黄芪多糖处理的细胞在培养器皿底部的黏附能力和铺展能力显著下降(P<0.01),并且明显抑制了Si Ha细胞迁移运动能力(P<0.01)。因此,道地药材恒山黄芪的多糖成分具有抑制人宫颈癌细胞Si Ha的增殖、粘附、铺展以及迁移运动的活性。

一株南方红豆杉内生菌HDSW的抗肿瘤活性研究

[目的]鉴定南方红豆杉抗肿瘤内生菌HDSW,并初步研究其抗肿瘤机制。[方法]基于16S rDNA测序鉴定菌株HDSW的种属,通过MTT试验、平板细胞集落形成试验、细胞黏附试验、划痕试验和流式细胞术检测HDSW发酵液的有机溶剂提取物对胃癌细胞MGC-803的抑制活性,利用实时定量PCR方法探索其抗肿瘤的分子机制。[结果]菌株HDSW被鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus pumilus),其发酵液的乙酸乙酯提取物作用于胃癌细胞MGC-803可有效降低其存活率,减弱其黏附能力,抑制迁移能力,诱导细胞凋亡。菌株HDSW发酵液的乙酸乙酯提取物可显著增强促细胞凋亡基因p53、Bax和Caspase 3的表达水平,抑制细胞凋亡拮抗基因Bcl-2的表达。[结论]南方红豆杉内生菌HDSW可产生具有显著抗胃癌细胞MGC-803活性的次级代谢产物,且乙酸乙酯可将其提取出来,具有潜在的开发价值。

紫丁香花精油的抗氧化和抗肿瘤活性研究

采用水蒸气蒸馏法提取紫丁香花蕾精油,用3种不同的抗氧化体系检测了精油的抗氧化活性。测定不同质量浓度的紫丁香花精油溶液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基的清除效果,并测定了其总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)。结果显示,精油具有较好的DPPH自由基、羟自由基的清除作用,并且与精油浓度呈现出量效关系。精油的T-AOC是19.86±1.74 U/mg,高于化学抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲酚(3,5-Di-tert-butyl-4-hydroxytoluene,BHT()0.38±0.08 U/mg)。精油的抗肿瘤活性检测采用胃癌细胞株MGC80-3和HGC-27,3(-4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物(3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT)法测定紫丁香花精油对癌细胞的抑制作用。TUNEL法检测精油对胃癌细胞凋亡的影响。MTT法检测结果证明紫丁香花精油可显著抑制两种胃癌细胞生长,其抑制作用与精油浓度呈正相关,MGC80-3和HGC-27细胞经精油处理48 h后的IC50值分别为0.282 mg/mL和0.263 mg/mL。利用TUNEL法检测细胞凋亡情况,结果显示,凋亡细胞数量随精油浓度的提高而显著增多,并且HGC-27细胞对紫丁香花精油更敏感。研究结果表明,紫丁香花精油具有良好的体外抗氧化和抗肿瘤活性,具备进一步药用研究和开发的价值。

柴胡总黄酮的体外抗炎及抗氧化活性研究

检测中药柴胡总黄酮的体外抗炎和抗氧化活性,为进一步研究柴胡的药理作用奠定基础。通过乙醇回流法提取柴胡总黄酮,测定其含量。用不同浓度的柴胡黄酮处理小鼠巨噬细胞RAW264.7,利用中性红法分析其对细胞吞噬能力的影响;通过Elisa试验和实时定量PCR分析柴胡黄酮对巨噬细胞释放促炎症因子的影响;利用试剂盒检测柴胡黄酮对羟自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除率,评估其抗氧化能力。结果显示,柴胡黄酮能够显著减弱脂多糖(LPS)刺激下的巨噬细胞的吞噬能力,抑制LPS诱导的促炎症因子TNF-α、IL-6和NO的释放以及验证相关基因(TNF-α、IL-6和iNOS)的表达。而且柴胡黄酮能够有效清除羟自由基(EC_(50)∶0.32 mg/mL)、超氧阴离子(EC_(50)∶0.42 mg/mL)和DPPH自由基(EC_(50)∶0.19 mg/mL),具有良好的抗氧化活性。柴胡黄酮具有良好的抗炎和抗氧化活性,具有开发为天然免疫调节剂和抗氧化剂的潜在价值。

熟地黄多糖的提取及其体外抗氧化活性研究

目的研究熟地黄多糖的最佳提取方法,评估熟地黄多糖的体外抗氧化活性,为进一步的体内活性研究提供依据。方法采用水提醇沉法、微波提取法和超声波提取法提取熟地黄多糖,筛选出得率最高的方法。通过Sevag法除去粗多糖中的蛋白成分,透析法除去小分子,活性炭除色素后,得到精制多糖,苯酚-硫酸比色法测定多糖含量。通过4种不同的抗氧化体系以及细胞水平的实验,检测了多糖的体外抗氧化活性,包括羟自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的清除效果、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、对细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH-px)活力以及丙二醛(MDA)水平的影响。结果精制的熟地黄多糖(Rehmanniae Radix Preparata polysaccharides,RGP)清除羟自由基EC_(50)值为1.51 mg/mL,清除超氧阴离子自由基EC_(50)值为3.04 mg/mL,清除DPPH自由基的EC_(50)值为0.26 mg/mL,其总抗氧化活性为18.85±0.80 U/mg。与阳性对照2,6-二叔丁基对甲酚(2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol,BHT)相比,熟地黄多糖具有较好的DPPH自由基清除作用、一定的羟自由基和超氧阴离子自由基的清除能力,并且与多糖浓度呈现出剂量效应。而且熟地黄多糖能够有效提高H2O2所导致的SOD和GSH-px活力降低的情况,以及降低H_(2)O_(2)诱导的MDA水平升高的情况。熟地黄多糖还具有很好的总抗氧化能力。结论传统中药熟地黄的多糖成分具有良好的体外抗氧化活性,具有开发为天然抗氧化剂和食品保健品的潜在价值。

中华蹄盖蕨黄酮提取纯化工艺优化及其成分分析

目的优化中华蹄盖蕨黄酮的提取纯化工艺,并对其进行成分分析。方法采用超声波辅助乙醇法与聚酰胺树脂法对中华蹄盖蕨黄酮进行提取纯化,液质联用法检测分析其黄酮成分。在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、超声温度、超声时间、料液比为影响因素,得率为评价指标,正交试验优化提取纯化工艺。结果最佳提取条件为料液比1∶35,乙醇体积分数60%,超声温度60℃,超声时间20 min,中华蹄盖蕨黄酮的得率为15.01%;最佳纯化条件为上样液pH 5,上样质量浓度2 mg/mL,70%乙醇洗脱,洗脱体积流量2.0 BV/h,中华蹄盖蕨黄酮回收率为80.14%,所得干粉中其含量为70.32%,比纯化前提高25.64%。中华蹄盖蕨含有9个黄酮类化合物,其中黄芪黄酮、针依瓦菊素、槲皮素-7-O-葡萄糖苷含量较高。结论该方法稳定可行,可用于中华蹄盖蕨黄酮的提取纯化,其中黄酮类化合物含量较高。

柴胡总皂苷通过Akt/NF-κB信号通路抑制胃癌细胞MGC80-3的增殖和迁移

该文以中药柴胡为材料,研究其皂苷成分对胃癌细胞MGC80-3的抑制活性,并探讨其潜在的分子机制。采用已报道的方法提取柴胡的总皂苷成分,通过显微镜观察其对MGC80-3细胞形态的影响,利用MTT法和细胞集落形成实验检测其对MGC80-3细胞增殖的影响,利用细胞黏附实验和细胞划痕实验分析其对MGC80-3细胞迁移的影响,进一步通过Western blot实验检测柴胡总皂苷对Akt/NF-κB信号通路的影响。结果显示,柴胡总皂苷显著抑制胃癌细胞MGC80-3的增殖和迁移能力,并呈现明显的量效关系和时效关系。而且,柴胡总皂苷降低了NF-κB p65的蛋白表达水平,虽然不影响Akt和IKKβ的表达,却显著抑制了二者的磷酸化水平。因此,柴胡总皂苷可能通过Akt/NF-κB信号通路发挥对胃癌细胞MGC80-3的抑制作用,具有开发为抗胃癌药物的潜在价值。