绞股蓝总皂甙对内毒素豚鼠心乳头肌的保护作用

用内毒素诱发豚鼠心乳头肌损伤、观察ＧＰＳ抗内毒素的损伤作用。结果显示：在内毒素作用下，乳头肌收缩力先短时迅速升高后逐渐降低，功能不应期缩短、兴奋性提高，肾上腺素诱发的自律性增高，心肌中超氧化物歧化酶活性降低，而脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）含是升高。先给ＧＰＳ８０ｍｇ·Ｌ－１、再给ＥＴ、乳头肌收缩高峰推迟、并抑制其负性肌力作用，同时逆转ＥＴ所致的乳头肌不应期、兴奋性和自律性的改变，心肌组织中ＭＤＡ含量均已恢复，提示ＧＰＳ对豚鼠心肌的ＥＴ损伤具有保护作用。

绞股蓝总皂甙对内毒素损伤兔左室功能作用的实验研究

绞股蓝总皂甙对内毒素损伤兔左室功能作用的实验研究胡弼，唐朝克，廖端芳，余麟，雷建华（衡阳医学院生理教研室，药理教研室，湖南４２１００１）中国图书分类号Ｒ２８２．７１；Ｒ２８４．１；Ｒ９７２绞股蓝［ＧｙｎｏｓｔｅｍｍａＰｅｎｔａｐｈｙｌｌｕｍ（Ｔｈｕｎ...

成纤维细胞生长因子与单核-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白在大肠杆菌中的表达

为获得防治动脉粥样硬化和再狭窄的新型基因产品，应用基因工程技术将碱性成纤维细胞生长因子和单核─巨噬细胞集落刺激因子基因克隆到pGEM－3Zf（＋）载体的EcoRI和BamHI位点上，重组成融合基因，亚克隆到pBV220表达载体上，并在大肠杆菌DHα中进行表达，然后用十二烷基磺酸钠─聚丙烯酸胺凝胶电泳和Westernblot进行分析。结果发现，融合蛋白可获得表达，且具有成纤维细胞生长因子与单核─巨噬细胞集落刺激因子的免疫学活性。这为进一步研究该融合蛋白的功能及防治动脉粥样硬化和动脉再狭窄提供一种新的基因产品。

人表皮生长因子(EGF)与单核-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)融合蛋白在大肠杆菌中的表达

应用基因工程技术，将ＥＧＦ、ＧＭ－ＣＳＦ基因克隆到ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）载体的ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ位点上，再将重组融合基因亚克隆到表达载体ｐＢＶ２２０的ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ位点上，在大肠杆菌ＤＨ５α中进行表达，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ表明ＥＧＦ－ＧＭ－ＣＳＦ融合蛋白获得表达，并且具有ＥＧＦ、ＧＭ－ＣＳＦ的免疫学活性．这为进一步研究该融合蛋白的功能和肿瘤治疗提供一种新的基因产品．

表皮生长因子与假单胞菌外毒素融合蛋白在大肠杆菌中的表达研究

目的和方法：应用基因工程技术，将ＥＧＦｃＤＮＡ克隆到ｐＬＹ５／ＩＬ２－ＰＥ４０载体的ＥｃｏＲⅠ、ＳｍａⅠ位点之间ＩＬ２基因位置上，再将重组融合基因亚克隆到表达载体ｐＢＶ２２０的ＥｃｏＲⅠ、ＰｓｔⅠ位点上，以探索ＥＧＦ－ＰＥ４０融合基因在大肠杆菌ＤＨ５ａ中的进行表达及其生理功能。结果：ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ表明：ＥＧＦ－ＰＥ４０融合蛋白获得表达，并且具有ＥＧＦ和ＰＥ４０的免疫学活性。

绞股蓝总皂甙对内毒素损伤兔左室功能的保护作用

绞股蓝总皂甙对内毒素损伤兔左室功能的保护作用衡阳医学院生理教研室（４２１００１）胡弼，唐朝克，廖端芳，余麟衡阳市卫生学校生理教研室雷建华０引言绞股蓝［ＧｙｎｏｓｔｅｍｍａＰｅｎｔａｐｈｙｌｌｕｍ（Ｔｈｕｎｂ）Ｍａｋｉｎｏ］为葫芦科绞股蓝属植物。对绞股...

槟榔碱改善2型糖尿病大鼠糖、脂代谢紊乱

目的研究槟榔碱(arecoline)对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢的影响及其降糖机制。方法采用高果糖高脂饲料喂养建立2型糖尿病大鼠模型。实验大鼠随机分7组:普通饲料对照组(control),高果糖高脂饲料模型组(HF),高果糖高脂饲料+不同剂量槟榔碱组(1、5、10、20、50mg·kg-1)。观察槟榔碱对糖尿病大鼠血糖、血脂、肝功能及肝脏组织学的影响,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测槟榔碱对糖异生酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)和翼螺旋转录因子O1(FoxO1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的mRNA表达的影响。结果与高果糖高脂模型组相比,槟榔碱以剂量依赖的方式降低2型糖尿病大鼠空腹血糖及甘油三脂水平,但是10、20、50mg·kg-1剂量组具有明显肝脏毒性;5mg·kg-1的槟榔碱明显降低糖异生酶PEPCK和G6Pase,转录因子FoxO1及其辅助因子PGC-1α的mRNA的表达。结论低剂量槟榔碱能够改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱,降糖机制为抑制肝脏过度糖异生。

氯沙坦和培哚普利逆转高血压大鼠心血管重构的比较

目的 比较氯沙坦和培哚普利逆转肾血管性高血压大鼠心血管重构作用及其机制 ,为临床用药提供实验依据。方法 以经典两肾一夹肾血管性高血压大鼠为研究模型。采用鼠尾测压法测定大鼠血压的变化 ;反射免疫分析法测定大鼠血浆血管紧张素Ⅱ含量和肾素活性 ;称量法计算各组大鼠心脏与体重的比值 ;高清晰度数码照相扫描分析技术测定各组大鼠主动脉、肠系膜动脉血管管壁厚度、管壁厚度和管腔内径比值、管壁面积和管腔面积比值来估计两类药物对心血管重构的影响。结果 高血压大鼠心脏与体重的比值、主动脉、肠系膜动脉血管管壁厚度和管腔内径比值、管壁面积和管腔面积比值与正常大鼠相比明显增大 (P <0 0 1) ,给予氯沙坦 (2 0mg·kg-1)或培哚普利 (3mg·kg-1)治疗后 ,上述各项指标基本接近正常水平 ,与非用药组相比具有显著差异 (P<0 0 1)。结论 氯沙坦和培哚普利均能明显降低高血压大鼠血压 ;长期应用较低剂量氯沙坦和培哚普利均能有效逆转高血压大鼠病理性心血管重构 ,两药存在等效性。

槟榔碱对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素抵抗的作用

目的:探讨槟榔碱对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素抵抗的影响及其机制。方法:采用高果糖饲料饲养Wistar大鼠12周制备2型糖尿病大鼠模型,实验动物随机分为5组(n=8):对照组、模型组、模型+不同浓度的槟榔碱(0,0.5,1,5 mg/kg)组。4周后通过检测血糖、血脂、胰岛素、RT-PCR检测肝脏组成型雄甾烷受体(CAR)、孕甾烷X受体(PXR)、糖代谢相关基因:葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)和炎症相关因子:白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达,Western blot检测大鼠肝内p-AKT和葡萄糖转运体4(GLUT4)蛋白表达。结果:1,5 mg/kg槟榔碱显著降低糖尿病大鼠体重、空腹血糖、空腹胰岛素、血脂和糖代谢相关基因及炎症相关因子mRNA水平,提高CAR、PXR mRNA水平及p-AKT、GLUT4蛋白水平。结论:槟榔碱可能通过提高CAR和PXR的表达,导致肝脏糖代谢关键酶PEPCK、G6Pase基因表达或者炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)表达降低,改善2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素抵抗。

青藤碱对吗啡依赖与戒断小鼠小脑与脊髓NO/nNOS系统的影响

本文旨在探讨青藤碱对吗啡依赖与戒断小鼠的小脑和胸腰段脊髓中一氧化氮(nitric oxide,NO)/神经元型一氧化氮合酶(neural nitric oxide synthase,nNOS)系统的影响及作用机制。采用吗啡剂量递增法建立小鼠吗啡依赖模型,用纳洛酮激发戒断症状,评价小鼠急性戒断时齿颤、扭体、直立、喷嚏、眼睑下垂等戒断症状,对成瘾小鼠用青藤碱(40mg/kg,i.p.)治疗后,再用纳洛酮激发观察戒断症状。半定量RT-PCR检测小鼠小脑和胸腰段脊髓nNOS mRNA表达变化,化学比色法和硝酸还原酶法分别测定小鼠小脑和胸腰段脊髓组织匀浆的nNOS活性与NO含量。结果显示:(1)青藤碱可以扭转由吗啡依赖引起的小鼠体重下降的趋势,减轻小鼠急性戒断时齿颤、扭体、直立、喷嚏、眼睑下垂等戒断症状;(2)青藤碱可降低小鼠吗啡依赖与戒断时在小脑与胸腰段脊髓中异常上调的nNOSmRNA水平,使酶活性下降到接近对照组水平。nNOS催化产生的NO含量与酶活性的变化一致;(3)单独使用青藤碱,小鼠没有出现类似吗啡引起的戒断症状,小脑与胸腰段脊髓中nNOSmRNA水平及酶活性没有异常升高。上述结果表明,青藤碱本身无成瘾性,但能显著减轻吗啡依赖小鼠的戒断征状,其作用机制可能与青藤碱影响小脑与脊髓中的NO/nNOS系统有关。

槟榔碱抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞炎症因子表达及其机制

目的观察槟榔碱对氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞炎症因子表达的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度槟榔碱(10-6、10-5、10-4和10-3mol/L)处理细胞24h,台盼兰拒染法观察细胞活力;氧化型低密度脂蛋白诱导小鼠巨噬细胞,同时给予槟榔碱处理,采用逆转录聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1mRNA的表达以及过氧化体增殖物激活型受体γmRNA的表达。结果槟榔碱处理细胞24h后,10-3mol/L组细胞活力下降(P<0.01),而10-6、10-5和10-4mol/L组对细胞活力无明显影响;10-6、10-5和10-4mol/L槟榔碱分别处理细胞24h后,对肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1mRNA的表达无明显影响;10-6mol/L槟榔碱与氧化型低密度脂蛋白共同处理细胞24h后,细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1mRNA的表达无显著改变,而10-5和10-4mol/L槟榔碱明显抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和细胞间黏附分子1mRNA的表达,且10-5mol/L槟榔碱使氧化型低密度脂蛋白诱导的细胞内过氧化体增殖物激活型受体γmRNA的表达增加(P<0.01)。结论槟榔碱抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞炎症因子表达,其作用机理可能是通过过氧化体增殖物激活型受体γ起作用。

绞股蓝总皂甙对豚鼠心肌氧自由基损伤的保护作用

用黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶(X—XOD)诱发豚鼠心乳头肌氧自由基损伤,观察绞股蓝总皂甙(CPS)抗心肌氧化损伤的作用.结果示在X—XOD作用下,乳头肌收缩力先升高后降低,功能不应期缩短,兴奋性提高,肾上腺素诱发的自律性增加,心肌中超氧化物歧化酶活性降低,而脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量升高.先给GPS 50mg·L^(-1),再给X—XOD,乳头肌收缩高峰推迟,并抑制其负性肌力作用,同时,逆转X—XOD所致的乳头肌不应期、兴奋性与自律性的改变.心肌组织中MDA含量均得以回复.提示,GPS对豚鼠心肌的氧化损伤具有保护作用.

罗格列酮对胰岛素抵抗高血压大鼠主动脉功能的影响

为探讨罗格列酮(rosiglitazone,ROSI)对胰岛素抵抗高血压大鼠(insulin resistant-hypertensive rats,IRHR)主动脉功能的影响及其可能机制,用高果糖饲养Sprague-Dawley大鼠8周,制备IRHR模型,并通过相关指标的检测判断造模是否成功。随后采用血管环灌流方法,观察各实验组动物离体胸主动脉环对新福林(L-phenylephrine,PE)、氯化钾(KCl)的收缩反应和对乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)、硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)的舒张反应;以及用一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)预孵育血管30 min后,主动脉环对ACh的舒张反应;同时对各实验组血清一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量进行测定。结果显示:(1)罗格列酮能降低IRHR 的收缩压、血清胰岛素水平,改善胰岛素抵抗。(2)高果糖组动物主动脉对PE、KCl的收缩反应明显增强,对ACh的舒张反应明显减弱,ROSI可逆转上述作用。(3)用L-NAME预处理后,高果糖组动物主动脉对ACh的舒张反应进一步减弱, ROSI可部分对抗上述作用。(4)各组大鼠离体主动脉对SNP的舒张反应无显著性差异。(5)ROSI对对照组大鼠主动脉功能的影响不明显。(6)与对照组相比,高果糖组动物血清NO含量显著降低,用ROSI处理后,血清NO含量显著增加。上述结果表明,ROSI能改善IRHR主动脉的舒张功能,其作用的机制可能是部分通过NOS途径促进内皮NO释放,或是通过降低血压、血清胰岛素水平,以及改善胰岛素抵抗等作用,导致血管舒张。

罗格列酮对果糖饲养大鼠血糖血脂及血管重构的影响

目的 研究罗格列酮 (Rosiglitazone)对高果糖饲料饲养SD大鼠血管重构的作用和对血糖血脂的影响。方法 高果糖饲料饲养SD大鼠 1mon ,随机分为两组 :高果糖组 ,继续喂养高果糖饲料 1mon ;高果糖罗格列酮处理组 ,喂高果糖饲料和罗格列酮 (5mg·kg-1·d-1,溶于饮水中 ) 1mon。最后 ,每组一半大鼠麻醉从心脏取空腹血测血糖、血脂、胰岛素。每组另一半取主动脉和肠系膜小动脉 ,固定 ,切片 ,HE染色 ,用病理分析系统测量主动脉和肠系膜小动脉重构指标 :内径、中膜、中膜 /内径、中膜横切面积。结果 高果糖罗格列酮处理组与高果糖组对比 ,罗格列酮降低了血压 (16 0kPavs 18 0kPa ,P <0 0 1)、胰岛素 (34 89mIU·L-1vs5 3 5 6mIU·L-1,P <0 0 1)、甘油三酯 (0 5 6mmol·L-1vs1 16mmol·L-1,P <0 0 5 ) ,升高了胰岛素敏感指数 :血糖 /胰岛素的值 (0 2 6vs 0 14 ,P <0 0 5 ) ;增加了肠系膜小动脉内径 (173 0 μmvs 10 0 0 μm ,P <0 0 1) ,减小了中膜 (18 8μmvs 2 4 5 μm ,P <0 0 5 ) ,减小了中膜 /内径(10 90 %vs 2 5 5 5 % ,P <0 0 1) ;减小了主动脉中膜 (89 0μmvs 10 9 0 μm ,P <0 0 1) ,减小了中膜 /内径 (5 74 %vs6 80 % ,P <0 0 1)。结论 罗格列酮能降低果糖饲养SD大鼠的高血压 ,?

实验性X综合征大鼠模型的建立

目的 建立一种典型的X综合症动物模型。方法 雄性SD大鼠施行两肾一夹术后普通饲料喂养 4周 ,诱发肾性高血压 ,继以高果糖饲料喂养 4周 ,诱导建立X综合症模型。结果 术后 4周 ,大鼠仅出现收缩压升高 ,血糖、血脂未见明显改变。高果糖饲料喂养 4周后 ,大鼠出现高血糖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、高血压和高脂血症。结论 肾性高血压形成后高果糖饮食 1个月 ,可诱导SD大鼠出现典型的X综合症 ,为研究胰岛素抵抗及其伴随的心血管疾病提供了一种理想的动物模型。

17β-雌二醇对去卵巢胰岛素抵抗大鼠主动脉舒缩功能损伤的保护作用

为观察17β-雌二醇(17beta-estradiol,17β-E2)对去卵巢胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠主动脉结构和舒缩功能的 影响及其可能机制,成年雌性Sprague-Dawley大鼠卵巢切除后,高果糖喂养8周诱导IR,同时给予生理剂量的17β-E2(30 μg／kg),每天皮下注射一次,并检测IR相关指标。大鼠胸主动脉石蜡切片,HE染色,图像分析系统测定其结构。采用 血管环灌流法,观察各组大鼠胸主动脉环对新福林(L-phenylephrine,PE)的收缩反应和对ACh、硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)的舒张反应以及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲脂(N-nitrl-L-arginine methyl ester,L- NAME)对卵巢切除+果糖喂养+17β-E2组大鼠胸主动脉Ach的舒张反应的影响;检测各组大鼠一氧化氮(nitric oxide,NO) 含量。结果显示:(1)17β-E2能防止高果糖诱导的去卵巢IR大鼠收缩压升高、高胰岛素血症和胰岛素敏感性下降:(2)各 组大鼠胸丰动脉的结构无显著性差异;(3)卵巢切除+果糖喂养组大鼠与卵巢切除组或果糖喂养组相比,血清NO显著降低, 胸主动脉对PE的收缩反应显著增强,对ACh的舒张反应显著降低,17β-E2能逆转上述改变,L-NAME可部分阻断17β-E2 的这种作用;(4)各组大鼠胸主动脉对SNP的舒张反应和去内皮后对PE的收缩反应均无显著差异。以上结果表明,17β-E2能 抑制高果糖诱导的去卵巢IP大鼠血管舒缩功能的紊乱,其机制一方向可能是部分通过血管内皮细胞NOS途径促进N0的释放, 保护内皮细胞;另一方面可能是通过降低血压,血清胰岛素水平,改善IR所致。

3T3-L1脂肪细胞与胰岛素抵抗脂肪细胞miRNAs表达谱的差异性分析

目的探讨正常3T3-L1脂肪细胞和胰岛素抵抗(IR)脂肪细胞微小RNA(miRNAs)的差异性表达,并进行初步分析。方法采用高糖(25 mmol/L葡萄糖)/高胰岛素液(1μmol/L)处理3T3-L1脂肪细胞24h,通过葡萄糖摄取实验判断IR脂肪细胞模型的建立;接着通过miRNA芯片技术,检测脂肪细胞和IR脂肪细胞中miRNAs的表达,并对其分析;随后借助生物信息学方法,对显著变化的2个miRNAs(miR-320和miR-21)寻找并筛检其可能调控的靶基因。结果共获得79个IR相关miRNAs(29个低表达,50个高表达,其中miR-320显著上调,miR-21显著下调),且筛选出与IR或糖尿病相关的靶基因共13个。结论获得了3T3-L1脂肪细胞和IR脂肪细胞miRNAs的差异性表达谱,为进一步研究这些miRNAs在IR和糖尿病的发病机制中的作用奠定了基础。

青藤碱对吗啡依赖小鼠脊髓与小脑中HO2、sGCα1和sGCα2基因mRNA表达的影响

目的评价青藤碱治疗前后吗啡依赖与戒断小鼠脊髓和小脑中HO2、sGCα1和sGCα2基因mRNA水平的变化,探讨青藤碱作用于吗啡依赖小鼠的分子机制。方法采用吗啡剂量递增法,建立小鼠吗啡依赖模型,用青藤碱(40mg.kg-1,ip)治疗吗啡依赖小鼠后,再用纳洛酮激发急性戒断症状,半定量RT-PCR测脊髓和小脑HO2、sGCα1和sGCα2基因的mRNA水平变化。结果慢性吗啡用药使小鼠脊髓与小脑中HO2和sGCα1基因的mRNA水平发生异常上调,sGCα2基因的mRNA水平没有异常上调。单独使用青藤碱,没有引起小鼠脊髓与小脑中这些指标异常升高。青藤碱治疗后,小鼠吗啡依赖与戒断时在脊髓与小脑中异常上调的HO2和sGCα1基因的mRNA水平下降到接近对照组水平。结论慢性吗啡用药使HO2和sGCα1基因的mRNA水平发生不同程度的异常上调,这种上调在青藤碱治疗后可以恢复到接近正常水平,这可能是青藤碱对吗啡依赖小鼠治疗作用的分子机制之一。

绞股蓝总皂甙预防和延缓家兔休克的作用

目的 :探讨绞股蓝总皂甙 (GPS)对注射内毒素的家兔休克的作用。方法 :动物静脉麻醉后 ,取血测量血小板数、血浆纤维蛋白原含量、凝血酶原时间和NO水平。通过二道生理记录仪测量血压。动物处死后 ,取血再次测量血小板数、血浆纤维蛋白原含量、凝血酶原时间和NO水平。结果 :对照组实验前后各指标没有出现明显的变化 (P >0 .0 5 )。内毒素 (LPS)组平均动脉血压 (MAP) ,在实验后 4,6h明显低于实验前和对照组 (P <0 .0 1) ,实验后血小板数和纤维蛋白原明显低于实验前 (P <0 .0 1) ,NO明显高于实验前 ,凝血酶原时间明显延长。GPS组实验后的NO浓度高于实验前和对照组 (P <0 .0 5 ) ,但低于LPS组实验后的NO浓度 (P <0 .0 5 ) ;实验后血小板数明显低于实验前和对照组 (P <0 .0 1) ,但高于实验后LPS组 (P <0 .0 5 ) ;实验后纤维蛋白低于实验前和对照组 (P <0 .0 5 ) ,但高于实验后的LPS组 (P <0 .0 5 ) ;实验后的凝血酶原时间长于实验前和对照组 (P <0 .0 5 ) ,但短于实验后的LPS组 (P <0 .0 5 )。结论