油菜BnJAZ7通过调控抗氧化途径促进核盘菌侵染

【目的】由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的油菜菌核病是危害油菜生产的第一大病害。通过分子克隆获得甘蓝型油菜BnJAZ7,利用生物信息学、细胞生物学以及分子生物学手段,明确甘蓝型油菜BnJAZ7的表达特征及其在核盘菌侵染过程中的作用,为油菜抗菌核病分子育种打下理论基础。【方法】利用分子克隆技术扩增BnJAZ7全长,并分析其生物信息学特征,利用MEGA X构建BnJAZ7的亲缘关系树。利用实时荧光定量PCR技术测定BnJAZ7在油菜中的组织表达以及核盘菌侵染过程中的表达特征;构建BnJAZ7与GFP的融合表达载体,在激光共聚焦显微镜下观察融合蛋白的亚细胞定位。在本氏烟叶片中瞬时表达融合蛋白,并接种核盘菌,分析BnJAZ7的表达对核盘菌侵染的影响。构建BnJAZ7-OE过表达转基因油菜,在其T2代叶片上接种核盘菌,观察其对核盘菌侵染的影响。利用生化技术检测核盘菌侵染BnJAZ7-OE后抗氧化酶SOD、POD、CAT以及PAL活性;通过实时荧光定量PCR技术分析核盘菌侵染BnJAZ7-OE油菜后相关基因BnSOD、BnPOD、BnPAL和BnCAT的转录水平。【结果】BnJAZ7全长801 bp,编码266个氨基酸,由TIFY和CCT_2两个结构域组成,分子式为C_(1244)H_(2000)N_(358)O_(384)S_(13),等电点为9.57,理论分子量为28.53 kDa,不具跨膜结构域。BnJAZ7与油菜TIFY 7的亲缘关系最近,在油菜茎中表达量最高,并且核盘菌侵染后6、12、24、48 h其表达量持续上升。亚细胞定位显示eGFP:BnJAZ7定位于细胞膜和细胞核。在本氏烟叶片中异源瞬时表达eGFP:BnJAZ7促进核盘菌侵染;BnJAZ7过表达的BnJAZ7-OE转基因油菜也促进核盘菌侵染。核盘菌在BnJAZ7-OE植株中侵染后显著降低了BnPOD、BnSOD和BnPAL的转录水平,显著增加了BnCAT的转录水平,从而降低POD、SOD和PAL活性,增加CAT活性。【结论】甘蓝型油菜BnJAZ7的表达受到核盘菌侵染诱导,且BnJAZ7过表达显著加快了核盘菌的侵染速度。核盘菌通过诱导BnJAZ7上升后降低抗氧化酶编码基因BnPOD、BnSOD和BnPAL转录水平、增加BnCAT转录水平,从而调控抗氧化酶活性来进一步加快侵染。

高职学前教育专业学生在幼儿园活动设计中存在的问题及解决策略

幼儿园活动设计是高职学生在校的核心课程之一,也是学生入职前成为幼儿教师的必备实践性技能。总结学生在这一核心学科中存在的问题,并在实践中摸索出一些较为适宜的解决策略,旨在教育教学中不断研究与探索,提升学生的专业能力和专业素养,为提升幼儿教师队伍增添一份力量。

丰顺开展“青春情暖”困难青少年关爱行动

日前，丰顺团县委在该县汤西镇颍川小学举行了丰顺县“青春情暖”困难青少年父爱行动暨汤西颍川小学“希望家园”揭牌仪式。仪式上，该县团委代表帮扶单位给留守儿童和家庭困难的学生代表送上了学习礼包，并发放了慰问金。

广州市金融工作局帮扶上湾村结硕果

“我们村有了文化广场了，每天晚饭后都可以带着小孩出来玩，真好!”丰顺县留隍镇上湾村村民蔡大姐兴奋地说．日前，上湾村新建的两个文化广场竣丁并投入使用，进一步丰富了当地群众的文娱生活。