伴有踝关节外侧副韧带损伤的慢性外侧踝关节不稳患者距骨软骨的T_2-mapping评估

目的:应用T_2-mapping定量评估伴有踝关节外侧副韧带(LAL)损伤的慢性外侧踝关节不稳(LAI)患者的距骨软骨退变情况。方法:搜集19例来本院就诊的伴有LAL损伤的慢性LAI患者和21例健康受试者。对这些研究对象进行T_2-mapping扫描和美国足踝外科评分系统评分。将距骨滑车软骨分为内侧前部(MA)、内侧中部(MC)、内侧后部(MP)、外侧前部(LA)、外侧中部(LC)、外侧后部(LP)6个部分。测量并计算每个软骨区域的平均T_2值,总距骨软骨(TTC)的T_2值由6块软骨的平均T_2值得到,计算慢性LAI组每个软骨区域T_2值相对于对照组相应软骨区域T_2值的增加率。应用独立样本t检验比较慢性LAI组与对照组各软骨区域T_2值的差异,应用Pearson相关分析研究慢性LAI组T_2值与美国足踝外科评分系统(AOFAS)评分的相关性。结果:慢性LAI组的距骨MA、MC、MP和TTC软骨区域的T_2值高于对照组(分别为P<0.001,P=0.026,P=0.002,P<0.001),其中MA软骨区域T_2值的增加率最为显著(18.65%)。慢性LAI患者的AOFAS评分为69.32±7.22,MA软骨区域的T_2值与AOFAS评分呈负相关(r=-0.525,P<0.05),其余软骨区域T_2值与AOFAS评分无明显相关性(P>0.05)。结论:伴有LAL损伤的慢性LAI患者的距骨软骨发生了退变,主要累及距骨内侧软骨面,MA软骨区域最为明显,MA是影响患者临床症状和预后的主要软骨区域。

3D UTE-T2*评价跟腱腱病及其与临床评分的相关性

目的采用3D超短回波时间(UTE)-T2*序列比较病变跟腱与健康跟腱T2*值的差异,并分析其与临床评分的相关性。方法纳入15例跟腱病变患者(病变组)和10名健康志愿者(对照组),行UTE序列及常规序列MR扫描。按纵向长度将跟腱平均分为3段,计算这3段以及跟腱总体的T2*值。采用临床美国足踝外科协会(AOFAS)评分和跟腱完全断裂(ATRS)评分对跟腱病变患者进行临床评估。两组T2*值的比较采用独立样本t检验,患者跟腱T2*值与临床评分的相关性采用Pearson相关分析。结果病变组患者4个ROI的T2*值明显高于对照组;病变组T2*值与AOFAS及ATRS评分呈负相关(r=-0.92、-0.90,P<0.01)。结论跟腱病变患者跟腱T2*值升高,UTE-T2*可从组织生化结构方面定量评估跟腱情况,且与临床一致,有助于跟腱病的早期准确诊断。

T2-mapping评估前交叉韧带重建术后膝关节软骨变性的定量研究

目的:应用MRI T2-mapping定量评估前交叉韧带重建术(ACLR)后1年内膝关节软骨变性情况及半月板完整性对软骨的影响。方法:搜集100例ACLR术后1年内患者,其中术后3个月患者30例(B组),术后6个月患者32例(C组),术后12个月患者38例(D组)。选取23例健康志愿者作为正常对照(A组)。对所有患者及健康志愿者行膝关节MRI T2-mapping扫描及临床评分。将膝关节软骨分为股骨内侧(FM)、胫骨内侧(TM)、股骨外侧(FL)、胫骨外侧(TL)、髌骨(P)、股骨滑车(TrF)等6个区域,并进一步将股骨软骨分为负重区及非负重区。勾画各区域为感兴趣区,并测量相应区域软骨的T2值。运用国际膝关节文献委员会(IKDC)膝关节评估表对患者膝关节症状及体征进行评估。采用单因素方差分析比较A、B、C、D四组膝关节各软骨区域的T2值差异及B、C、D三组的IKDC评分差异;采用独立样本t检验比较ACLR术后患者中,半月板完整者与半月板部分切除者的胫股关节软骨总T2值差异。结果:B、C、D组FM负重区、FL负重区、TM区域的软骨T2值均高于A组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。D组FM负重区的软骨T2值高于B组[D组为(40.18±5.75)ms,B组为(36.24±4.50)ms,P=0.004],C组FL负重区的软骨T2值高于B组[C组为(43.91±5.90)ms,B组为(40.78±5.47)ms,P=0.025],C、D两组TM区域的软骨T2值均高于B组[C组为(27.87±4.02)ms,D组为(28.32±3.84)ms,B组为(25.84±3.35)ms,P值分别为0.043、0.030]。ACLR术后1年内,行半月板成形术患者的胫股关节软骨总T2值与半月板完整者的软骨T2值差异无统计学意义(P>0.05)。ACLR术后1年内,患者的IKDC评分逐渐升高,术后3、6、12个月患者分别为(44.23±8.62)、(51.16±9.59)、(61.42±5.43),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACLR术后患者的临床症状及体征逐渐改善,但膝关节软骨呈退变趋势。ACLR术后1年内半月板成形术对膝关节软骨退变无显著影响。T2-mapping序列是早期检测ACLR术后膝关节软骨退变的有效检查手段。

融资融券对我国股市波动性影响的实证研究

本文选取的样本区间为2008年1月2日到2014年12月31日,通过GARCH模型和TARCH模型研究融资融券对我国股市波动性的影响。研究表明,融资融券机制的引入能降低股市的非对称波动性,但融资融券余额的增减会加大股市的波动性。

鼠肺炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据鼠肺炎病毒NS2基因保守区设计一对特异性引物,建立了一种快速、灵敏、特异的PVM检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了评价。结果显示,标准品浓度在1.0×101~1.0×107 copy/μL之间时,其浓度的对数值与荧光定量RT-PCR实验中的Ct值之间有良好的线性相关性(相关系数R2=0.9988),且该标准品检出限为1.0×102 copy/μL。该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、古典猪瘟病毒、牛病毒性腹泻粘膜病病毒、禽流感病毒均无扩增反应,引物具有良好的特异性。同时,该方法实验间的变异系数为0.51%~1.56%,均小于2%,表明该方法扩增稳定性高、重复性强。结果表明:该研究新建的PVM实时荧光定量RT-PCR检测方法有着特异性好、灵敏度高、重复性强的优点,可用于PVM的监测以及流行病学研究。

湖南省4株猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组序列测定与分析

为了解湖南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的遗传变异情况,对湖南省2016-2019年分离的4株PRRSV(Hunan/2016/075、Hunan/2017/085、Hunan/2018/123、Hunan/2019/055)进行全基因组测序,对其ORF5、NSP2基因以及全基因组核苷酸序列进行分析。结果显示,分离的4株病毒株均为美洲型,全基因组同源性为83.1%~98.7%,其中3株属于高致病型,1株为属于类NADC30型。Hunan/2016/075、Hunan/2017/085毒株全长序列与谱系5中亚系5.1的代表性毒株BJ-4亲缘关系相近,聚为一簇;Hunan/2018/123毒株与谱系8.7中的tjnh1501毒株聚为一簇;Hunan/2019/055毒株独立成一簇,与谱系1亲缘关系相近。本研究掌握了湖南省PRRSV的遗传变异情况,从而为制定有效的防控策略提供了依据。

H1亚型猪流感病毒微滴数字RT-PCR定量检测方法的建立

本研究针对H1亚型猪流感病毒(swineinfluenzavirus,SIV)HA基因保守序列设计引物和探针,通过反应条件优化,建立了一种快速、准确检测H1亚型SIV的微滴数字RT-PCR定量方法。该方法特异性强,除H1亚型SIV外,H3、H5、H7亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等检测均为阴性;敏感性高,最低可检测4.7拷贝/μL;重复性好,对5个不同稀释度的H1亚型SIVRNA进行3次重复试验,每个稀释度的变异系数均小于5%。利用该方法对湖南省规模化养殖场收集的30份猪鼻拭子样品进行检测,发现与荧光RT-PCR检测结果一致。试验表明,该方法快速、准确、灵敏,可为H1亚型SIV的快速筛查及流行病学研究提供可靠的技术保障。

功能化核酸适体检测氯霉素可行性研究

目的探讨荧光适体探针用于氯霉素快速检测的可行性。方法设计了一种荧光适体探针,主要包括一段与氯霉素特异性识别的DNA序列,其3’端标记FAM荧光,且有一小段核酸随机结构。当适体探针单独存在时,被氧化石墨烯(graphene oxide,Go)吸附到表面,由于能量共振转移作用使得FAM荧光淬灭;当加入靶标时,由于靶标与适配体探针具有高亲和力,配对形成双链复合物,从Go表面脱离,使FAM的荧光信号得到恢复。结果当25 nmol/L荧光标记适配体探针与1.2μL浓度为1 mg·mL-1 Go溶液共同孵育后,超过95%的荧光信号被Go淬灭。当再加入氯霉素溶液经孵育后,荧光信号得到显著恢复。结论该荧光适体探针能被用于氯霉素样品的快速检测,且对其他小分子检测也具有很大的应用潜力。

UTE-T2^*定量评估肩袖术后早期愈合情况的可靠性

目的:探讨超短回波时间(UTE)-T2^*技术评估关节镜下肩袖修复(ARCR)术后肩袖早期愈合情况的可行性。方法:搜集65例接受单侧ARCR术并于术后早期行UTE-T2^*扫描的患者资料。2名放射科医师和1名肩关节外科医师独立对术后肩袖影像进行观察评估,评估内容包括Sugaya分型和T2^*值的测量。将冈上肌腱等分为外侧亚区(腱-骨愈合区)、中间亚区和内侧亚区,测量相应的T2^*值。Sugaya分型的观察者间和观察者内一致性采用Kappa检验;不同亚区T2^*值的观察者间和观察者内一致性利用Bland-Altman法;外侧亚区T2^*值与Sugaya分型的关联性采用Pearson相关分析。结果:Sugaya分型的观察者间和观察者内均呈中等一致性(观察者间Kappa=0.40~0.50,观察者内Kappa=0.53~0.62);而不同亚区T2^*值的观察者间和观察者内均达到高度一致性(观察者间r=0.82~0.89,观察者内r=0.83~0.96)。外侧亚区T2^*值与Sugaya分型具有高度相关性(r=0.88,P<0.05)。不同Sugaya分型的肩袖外侧亚区T2^*值的方差分析及LSD两两多重比较显示:除Ⅰ型和Ⅱ型间T2^*值无统计学差异(P>0.1),其余各型两两比较T2^*值均具有统计学差异(P均<0.05)。结论:与Sugaya分型的半定量评估相比,UTE-T2^*技术对术后肩袖愈合的定量评估具有更高的可重复性和临床可行性。

小鼠诺如病毒数字RT-PCR定量检测方法的建立

为了建立快速、准确定量检测小鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)的方法,试验针对MNV高度保守区的靶向扩增引物和探针构建MNV的数字RT-PCR定量检测方法,优化其退火温度,并对其敏感性、特异性及临床应用效果进行检测。结果表明:建立的数字RT-PCR方法能对MNV进行定量检测;最佳退火温度为57.5℃;分别对MNV、小鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒3型等核酸检测,除MNV外均为阴性;最低可检测到7拷贝/μL;对不同稀释度核酸进行3次重复试验,变异系数均小于7%;对20个小鼠盲肠样本进行MNV检测,结果与荧光RT-PCR结果一致。说明试验建立的数字RT-PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可应用于MNV的临床快速定量检测。

鼠呼肠孤病毒3型荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据呼肠孤病毒3型(Reo3)M1基因序列保守区设计一对特异性引物,作者建立了一种快速、敏感、特异的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了评价试验。试验结果显示,标准品浓度在1.0×10^2~1.0×10^10copy/μL之间时,其浓度的对数值与荧光定量R T-PCR实验中的Ct值之间有良好的线性相关性(相关系数R^2=0.9990),且该标准品检出限为1.0×10^2个copy/μL。特异性方面,该方法除对Reo3有扩增反应外,对其它相关病毒均无扩增反应,引物具有良好的特异性。同时,该方法实验间的变异系数为0.54%~1.04%之间,均小于2%,表明该方法扩增稳定性高、重复性强。以上研究结果表明,此研究检测方法建立的Reo3荧光R T-PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于实验动物中Reo3的监测以及流行病学研究。

动物产品中腹泻性贝类毒素检测方法研究

为探讨小分子核酸适体快速检测动物产品中腹泻性贝类毒素的可行性,研究基于冈田酸(Okadaic acid,OA)核酸适体,构建了特异性适体辅助识别体系平台。结果显示,当体系中靶标OA被释放后,导致可结合标记酶催化产生不同程度的颜色反应,可以用肉眼进行初步判断;通过波长扫描显示在450 nm波长呈现最大吸收峰,测定其吸光度值,可反映出溶液中的靶标浓度。该体系平台方法具有操作步骤简便、对检测硬件要求低等优点,可用于基层养殖现场快速初筛检测中的使用。

术前前踝骨性撞击对踝外侧副韧带重建术疗效的影响

目的 探究术前合并前方骨性撞击征对踝关节外侧副韧带重建手术疗效的影响。 方法 前瞻性队列研究。入选2014年1月至2017年10月在复旦大学附属华山医院运动医学科行踝关节外侧副韧带重建术的踝关节慢性不稳定患者,依据术中观察有无踝关节前方骨性撞击分为无骨性撞击征组(NI组)和合并骨性撞击征组(BI组),记录所有患者术前美国足踝外科协会后足-踝评分(AOFAS)、Karlsson踝关节功能评分(KAFS)、运动水平Tegner评分、疼痛视觉模拟评分(VAS),并在术后至少2年时再次进行临床随访和影像学评估。 结果 共随访59例患者,其中NI组29例,男23例,女6例,年龄(28.4±7.1)岁;BI组30例,男28例,女2例,年龄(31.9±8.6)岁。NI组AOFAS、KAFS、Tegner评分分别从术前的(65.8±10.6)分、(65.9±10.1)分和3.0(3.0,4.0)分提升至术后的(97.5±4.3)分、(97.8±4.7)分和6.0(5.0,6.0)分,VAS从术前的3.0(3.0,4.0)分降至术后的0(0,0)分,差异均有统计学意义(均 P <0.05)。BI组AOFAS、KAFS、Tegner评分分别从术前的(65.2±11.0)分、(64.2±10.0)分和3.0(3.0,4.0)分提升至术后的(97.1±4.3)分、(97.3±4.3)分和5.0(4.0,6.0)分,VAS评分从术前的3.0(3.0,5.0)分降至术后的0(0,1.0)分,差异均有统计学意义(均 P <0.05)。两组间术前基线评分及临床功能评分差异均无统计学意义(均 P >0.05),两组术后AOFAS、KAFS及VAS差异无统计学意义(均 P >0.05),术后NI组Tegner评分高于BI组[6.0(5.0,6.0)比5.0(4.0,6.0)分, P =0.026]。所有患者影像评估显示重建的韧带结构完好,术前存在的关节内合并损伤均有明显愈合征象。 结论 踝关节外侧副韧带重建手术治疗慢性踝不稳合并或不合并前方骨性撞击征可在踝关节功能、稳定性、疼痛水平方面获得相似疗效。

基于COⅠ基因在熊胆制品鉴定中的应用探讨

本研究对熊胆粉进行核酸提取,利用普通PCR法扩增COⅠ序列并进行测序分析,验证其应用于熊类制品鉴定的可行性。利用MEGA 5.0软件进行比对分析,计算种内和种间遗传距离并构建邻接系统发育树;利用DNAStar软件进行亚洲黑熊种内COⅠ序列同源性分析。结果显示,亚洲黑熊、棕熊各单独聚为一簇,常见伪瞒报品等各单独聚为一簇,可进行明显区分。本实验获得COⅠ序列与亚洲黑熊指名亚种COⅠ序列同源性为99.2%。该方法作为有效的分类鉴定手段,可为打击熊类制品走私和非法交易提供有效的技术支撑。

体外冲击波疗法对膝骨关节炎患者下肢功能及关节软骨的影响

目的观察体外冲击波疗法(ESWT)对膝骨关节炎(KOA)患者的下肢功能、安全性及关节软骨的影响。方法将符合纳入标准的63例KOA患者根据治疗方法的不同按随机数字表法分为ESWT组(32例)和对照组(31例)。2组均给予常规膝关节肌力训练,每日3组训练,每组10次,连续训练4周;ESWT组辅以体外冲击波疗法,压力2.5 bar,频率8.0 Hz,频次2000,每周1次,共4次;对照组患者除冲击波压力设置为0.2 bar,其余治疗步骤及治疗参数与ESWT组保持一致,共治疗4周。分别于治疗前、第5周及第12周,测评和比较2组患者的视觉模拟评分法(VAS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎(WOMAC)指数、奎森指数评分及膝关节软骨磁共振检查T2值,并记录患者可能出现的不良反应。结果 ESWT组在第12周的VAS分值[(2.3±1.1)分],WOMAC指数[(11.3±6.8)分]和奎森指数[(3.9±2.7)分]分别较组内治疗前[(5.3±0.8)、(31.6±7.2)和(10.6±2.4)分]有明显改善(P<0.05),亦显著优于对照组在第12周时的各个评分[(4.3±1.1)、(24.5±10.1)和(8.7±3.5)分],组间差异有统计学意义(P<0.05)。ESWT组在第12周的T2值[(49.2±5.6)ms]与组内治疗前[(49.1±5.5)ms]比较,差异有统计学意义(P<0.05),但与对照组第12周的T2值[(49.1±5.8)ms]比较,差异无统计学意义(P<0.05)。研究过程中2组均未出现严重不良反应,2组出现不良反应的频次没有明显差异(P>0.05)且均在第12周时前消失。结论 ESWT可明显改善KOA患者的下肢功能,且其对膝关节软骨的影响在安全的范围内。