牛乳蛋白生物脱敏技术研究进展

牛乳及乳制品具有重要的营养价值,但是牛乳过敏会导致患者出现呼吸道问题,严重者甚至会休克或死亡,因此低致敏乳制品的研发具有重要意义。目前常见的牛乳脱敏技术被分为物理法、化学法和生物法,其中生物法更具有前景。简述了牛乳的主要过敏蛋白,阐述了生物酶法、发酵作用和转基因技术这3种生物脱敏技术。其中生物酶法仍然是目前最具有前景的生物降敏方法,水解酶将蛋白质降解为小分子多肽,但在降敏的同时会产生苦味物质,因此,近年来交联酶在该领域的作用逐渐被重视。发酵作用可以降低牛乳致敏性,但其降低程度有限,需与其他处理联合使用。转基因技术可以通过对线性表位氨基酸进行突变,以降低牛乳致敏性。另外,介绍了目前常见的几种牛乳致敏性检测方法,以期望为未来低致敏乳制品的研究提供理论依据。

CPPs阻钙沉淀活性与酪蛋白水解度之间关系的研究

通过对在不同的酶与底物浓度比下所得CPPs的特性进行研究，从而找出了在不同水解度下所得CPPs的阻钙沉淀性能与酪蛋白水解度之间的关系。即当酶与底物的比不同时，所得CPPs的N/P不同；N/P不同，其CPPs阻钙沉淀活性也不同。当N/P高时，CPPs的阻钙沉淀活性较低；N/P低时，CPPs的阻钙沉淀活性高。

高压处理诱发虾原肌球蛋白结构变化与致敏性的关系

以凡纳滨对虾原肌球蛋白为原料,研究不同高压条件下引发构象的变化与致敏性的关系。采用不同高压条件(压力0.1~800.0 MPa,处理时间10~40 min,温度10~37℃)处理原肌球蛋白(tropomyosin,TM),用圆二色谱法检测二级结构变化,荧光光度法检测三级结构变化,间接酶联免疫吸附法检测致敏性。结果显示,超高压处理能够引发TM的致敏性和三级结构变化,而对二级结构无显著影响;高压条件下TM致敏性的变化与其三级结构的改变有显著相关性。在实验压力范围内,20℃、300 MPa处理40 min TM疏水性氨基酸暴露程度最小,且致敏性最低(OD_(492 nm)为0.210±0.005);700 MPa条件下暴露程度最高,且致敏性最高(OD_(492 nm)为0.328±0.004)。因此,TM致敏性与其三级结构有关,与二级结构无关。

金属离子及pH值对菜籽蛋白溶解性及持水性的影响

研究在不同 ｐＨ值下，金属离子（ Ｃａ＋＋ 、 Ｍｇ＋＋、 Ｎａ＋）对菜籽蛋白的溶解性和持水性的影响。结果表明，对相同离子、菜籽蛋白的溶解性和持水性在等电点之前，随着ｐＨ值的增大而降低，在等电点之后，随着ｐＨ值的升高而增大；在等电点处，其溶解性和持水性最低、对不同离子在不同ｐＨ值条件下，对菜籽蛋白溶解性和持水性的强弱影响顺序为Ｍｇ＋＋>Ｃａ＋＋Ｎａ＋。与大豆蛋白相比，菜籽蛋白的溶解性不如大豆蛋白好，但持水性好于大豆蛋白。在碱性条件下，菜籽蛋白的溶解性比酸性条件下好。在高离子浓度（ ０～０.８ｍｏｌ／），其溶解性和持水性比在低离子浓度中的好。

富含海带多糖的乳酸发酵饮料的研究

本研究以海带为主要原料,采用乳酸菌发酵生产富含海带多糖的饮料,探讨了海带的酶解条件以及各因素对粗海带多糖提取量的影响。研究乳酸菌在海带水解液中生长产酸及脱腥效果,并确定了发酵饮料的配方。结果表明:海带多糖的最佳提取条件为加入海带粉重1.5%的复合酶,在pH6.0、40℃酶解6h,粗海带多糖的得率可达10.89%。其中复合酶(纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶)的最佳配比为2:1:2。海带多糖饮料发酵的最佳条件为在海带水解液中加入乳清粉0.5%,蔗糖7%,乳酸菌粉为1mg/100ml,发酵温度为40℃,发酵时间为24h,乳酸的产量为0.7%左右。

提取紫薯淀粉的副产物对SHR血压的影响

以紫薯为原料,12周龄雄性原发性高血压大鼠(SHR)和Wistar大鼠为受试动物,研究紫薯全粉、滤渣、淀粉、水溶性提取物的降血压作用。上述分别以低、中、高3个剂量(0.1、1、5g/kgbw)灌胃SHR大鼠和Wistar大鼠,观察对大鼠血压的影响。结果表明:在所选定的灌胃剂量范围内紫薯各成分对正常大鼠(Wistar大鼠)血压无影响。除淀粉外,其他各成分对SHR大鼠的血压均具有显著降低的作用,其中以水溶性提取物作用最为明显,灌胃后,低剂量组在1h时达到最低值,下降了20.83mmHg,中剂量组在2h时达到最低值,下降了23.50mmHg,高剂量组在4h时达到最低值,下降了24.48mmHg,然后血压开始慢慢回升,在8h时基本恢复到灌胃前的水平。提取紫薯淀粉后的副产物均有明显降血压作用。

酪蛋白水解物中ACE抑制肽分离及氨基酸序列分析

以牛乳酪蛋白为底物,先经胃蛋白酶水解,再经胰蛋白酶水解,从水解物中分离获得血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽并确定其氨基酸序列.酪蛋白的双酶水解物经超滤和葡聚糖凝胶色谱分离,分离得到3个组分,收集高ACE活性抑制效果组分Ⅱ和Ⅲ.采用离子色谱法分析水解片段的氨基酸组成,液相色谱-质谱法分析水解片段的氨基酸序列,采用固相合成法制备获得的短肽片段,用分光光度法检测ACE活-性抑制效果.结果表明,组分Ⅱ包含缬氨酸、丝氨酸、脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、酪氨酸,共8种氨基酸,组分Ⅲ包含痕量的丝氨酸和酪氨酸;将组分Ⅱ和Ⅲ经液相色谱-质谱分析,获得8个片段,其中,αs2-f（56～57）∶YS、αs2-f （98～107）∶YQKFPQYLQY和κ-f （52～61）∶INNQFLPYPY具有ACE活性抑制作用,其IC50值分别为11.89、l1.75 μg/mL和421 μg/mL.

乳铁蛋白和乳铁素的抗菌活性比较

牛乳铁蛋白是从牛乳中提取出来的一种铁结合性糖蛋白,牛乳铁素是从牛乳铁蛋白N-端水解下来的25个氨基酸残基。它们具有多种生物学功能,其中的广谱抗菌性尤为引人注目。本实验以牛初乳中提取的乳铁蛋白及其水解产物乳铁素为研究对象,选取大肠杆菌为实验菌株,进行铁饱和乳铁蛋白和缺铁性乳铁蛋白、乳铁素对大肠杆菌生长抑制的比较研究。研究结果表明:铁饱和乳铁蛋白、缺铁性乳铁蛋白和乳铁素的最小抑菌浓度分别为6mg/ml、3mg/ml和15μg/ml,乳铁素的最小杀菌浓度为30μg/ml。乳铁蛋白水解后,经纯化获得的乳铁素,其抗菌能力较缺铁性乳铁蛋白增加200倍,较铁饱和乳铁蛋白增加400倍。

添加紫薯提取物和酪蛋白水解物酸奶降血压和护肝功能评价

在普通酸奶的基础上,添加富含花青素的紫薯提取物(purple sweet potato extract,PSPE)-A和富含血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的酪蛋白水解物(CH-A),制备发酵酸奶,采用动物实验模型评价其降血压和护肝功能。将1 kg中含有3.0 g CH-A+1.5 g PSPE-A的酸奶和1 kg中含有3.0 g CH-A+3.0 g PSPE-A的酸奶,每天以3.33 g/kg(以体质量计,下同)的剂量,分别灌胃原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)。结果显示:在灌胃后4 h,SHR尾动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)分别下降了(23.13±2.41)、(26.23±1.44)mm Hg。将两种酸奶以3.33 kg/kg的剂量连续灌胃30 d,通过酒精性肝损伤模型评价护肝作用。结果显示:两种酸奶对SHR血清及肝脏的5个指标:谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、甘油三酯、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽中至少3个指标(AST、ALT、MDA)水平有显著改善作用(P<0.05);通过肝组织病理切片观察,两种酸奶对肝细胞和脂肪代谢均有改善作用。因此,添加富含花青素紫薯提取物和富含ACE抑制肽的酪蛋白水解物的酸奶,在实验的剂量范围内具有降血压和保护肝脏的作用。

萃取超滤技术制备食用菜籽蛋白

通过对不同萃取剂、不同条件下的萃取比较，确定了较好的萃取条件，即：5．5％的食盐溶液，料液比为1：50，萃取温度40℃；以及超滤膜的截留分子量超滤的工艺路线和条件。经超滤萃取，可得到不含毒素的纯度在90％以上的菜籽蛋白。

乳铁蛋白免疫增强作用评价

根据我国免疫调节功能食品的评价方法,对乳铁蛋白的免疫调节作用进行评价。在实验中,采用Balb/c小鼠建立免疫低下模型,以不同剂量(100μg/mL、1mg/mL、10mg/mL)乳铁蛋白灌胃实验动物,分别进行免疫脏器质量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能指标的检测。结果表明,在灌胃剂量为0.1～10mg/mL范围内,结果均为阳性,且以1mg/mL最为显著。判定乳铁蛋白具有增强免疫力,但与剂量有关。

不同条件下水解酪蛋白所得到的抗菌肽抑菌效果比较

本文采用胰蛋白酶水解酪蛋白制备抗菌肽,针对不同底物浓度下,改变酶与底物浓度比,水解产物的抑菌活性随着水解度的变化情况进行对比。确定了在45℃时该反应的最适底物浓度是9%(g/ml);最佳酶与底物浓度比为1∶120。同时,通过在不同水解时间取点,发现水解所得到产物的抑菌强度随水解度的增大而增大。

富含生理活性功能成分的蛋白质——牛初乳蛋白

本文主要介绍了富含生理活性功能牛乳蛋白中天然含有的活性成分—乳铁蛋白、转铁蛋白、免疫球蛋白、溶菌酶、过氧化物酶及富含脯氨酸多肽,以及利用牛乳蛋白质经蛋白酶水解后所能分离得到的生物活性肽的种类、分子结构、生理活性功能和作用。

牛乳铁蛋白及乳铁素的生产与应用现状

牛奶中的乳铁蛋白和其水解产物乳铁素具有多种生物活性功能。综述了国外的乳铁蛋白和乳铁素生产、分离和纯化的方法,并介绍了乳铁蛋白和乳铁素作为食品保存剂、抗氧化剂、营养强化剂、免疫强化剂、免疫调节剂等应用的现状。展望了我国乳铁蛋白和乳铁素生产的前景。

食品加工条件及主要成分对CPPs延缓磷酸钙沉淀能力的影响

对食品加工条件(温度、pH值)、食品中的主要组分(葡萄糖、蔗糖、淀粉、蛋白质)、及VC和苯甲酸钠等对CPP在pH8时延缓磷酸钙沉淀形成能力的影响进行了研究。其结果为:加热温度在100℃以下时,对CPP活性无影响,在pH8～9时CPP仍能延缓磷酸钙沉淀的形成;应用CPP时在蛋白质含量高、淀粉含量低的条件下较好。

不同干燥方法对乳源血管紧张素转化酶抑制肽活性的影响

用不同的干燥方法干燥富含血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的酪蛋白水解物,研究对ACE活性抑制的影响。在研究过程中,采用喷雾干燥法、流化床干燥法和真空冷冻干燥法干燥富含ACE抑制肽的酪蛋白水解产物,以干燥产物的水分含量低于5%为指标,确定干燥条件,以干燥产物的ACE活性半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值,优化干燥条件。并通过动物实验,评价不同干燥方法所得产物的降血压效果。结果显示,采用喷雾干燥法干燥水解产物优化条件为:进风温度190℃、出风温度75℃、进料量44 m L/min,其干燥产物的ACE活性抑制的IC50值为0.442 mg/m L;流化床干燥水解物的条件为:进风温度65℃、进料量180 m L、悬浮介质添加量30 g,其干燥产物ACE活性抑制的IC50值为0.294 mg/m L;真空冷冻干燥产物的ACE活性抑制的IC50值为0.275 mg/m L。动物实验结果显示,采用真空冷冻干燥方法所得干燥产物,最有利于ACE抑制肽活性的保留,其次是流化床干燥,而喷雾干燥产物的活性损失最大。因此,在富含ACE抑制肽水解产物干燥时,采用冷冻干燥方法较好。

芹菜汁乳酸发酵饮料的研究

对芹菜汁乳酸发酵饮料的生产工艺进行了研究，确定了生产工艺流程及主要工艺参数。通过该工艺生产出的饮料，澄清透明，无沉淀，色泽为芹菜的浅绿色，酸甜适口，具有芹菜汁及乳酸发酵所产生的独特的香气。

乳铁素免疫调节功能评价

根据我国免疫调节功能食品的评价方法,对乳铁素的免疫调节作用进行评价。在实验中,采用Balb/c小鼠建立免疫低下模型,以不同剂量(400、40、4μg/ml)乳铁素对小鼠进行灌胃实验后。分别进行免疫脏器质量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨嗜细胞功能等指标检测。结果表明,在灌胃剂量为40μg/ml时,结果均为阳性,判定乳铁素具有增强免疫力,但与剂量有关。

酪蛋白水解物对瑞士乳杆菌生长的影响

利用胰蛋白酶水解酪蛋白,以水解物对瑞士乳杆菌增殖效果为指标,优化水解条件,并研究最佳增殖效果。结果表明:胰蛋白酶水解酪蛋白的最佳水解条件为水解温度37℃、底物质量分数5%、酶与底物质量比1:600、pH8.0,此条件下制备的水解产物添加量为1g/100mL时对瑞士乳杆菌生长增殖效果最好,而添加量大于4g/100mL时,对瑞士乳杆菌生长呈现抑制作用。

超高压处理对凡纳滨对虾原肌球蛋白构象的影响

以凡纳滨对虾的原肌球蛋白（tropomyosin,TM）为原料,研究不同超高压条件下引发的TM构象变化。采用压力0.1~800 MPa,处理时间10~40 min,温度10~37℃处理TM,圆二色光谱法检测其二级结构变化,荧光光度法检测其荧光强度变化,DNA Star Protean软件预测可塑性。结果显示,超高压处理对TM的二级结构无显著影响,不同超高压条件下TM三级结构有显著变化。在实验压力范围内,300 MPa处理的TM疏水性氨基酸暴露程度最小;700 MPa处理后暴露程度最高。经预测,TM的可塑性区域占总氨基酸序列的72.9%。因此,超高压条件下TM的二级结构稳定,三级结构变化较大,三级结构的变化可能与其可塑性区域的比例较高有关。