茶树NAC转录因子基因CsNAC79和CsNAC9鉴定及其对非生物胁迫的响应

【目的】鉴定茶树NAC转录因子基因CsNAC79和CsNAC9,并分析它们在干旱、盐、高温、低温、外施ABA和外施GA3胁迫下的表达模式,为进一步解析CsNAC79和CsNAC9转录因子的生物学功能提供参考。【方法】以茶树‘龙井43’为材料,用RT-PCR扩增NAC转录因子家族基因CsNAC79和CsNAC9,并进行生物信息学分析;用qRT-PCR检测CsNAC79和CsNAC9在茶树6种非生物胁迫下的相对表达量。【结果】(1)CsNAC79和CsNAC9分别编码409个和282个氨基酸,且分别在15—150氨基酸位点、11—134氨基酸位点含有NAC家族成员典型的NAM保守结构域。(2)CsNAC79蛋白与中华猕猴桃、柿、洋蓟亲缘关系较近,CsNAC9蛋白与桃、荔枝、榴莲亲缘关系较近;2个NAC转录因子均是亲水性蛋白,皆不含信号肽和跨膜结构;CsNAC79和CsNAC9的启动子区域都含有非生物胁迫响应元件;蛋白质空间结构分析显示,CsNAC79和CsNAC9蛋白主要是由不规则卷曲和α-螺旋组成。(3)表达分析表明:CsNAC79和CsNAC9基因在6种不同非生物胁迫下均上调表达。【结论】茶树CsNAC79和CsNAC9基因响应多种非生物胁迫。

茶树蔗糖转运蛋白(SUTs)基因家族鉴定及组织表达分析

蔗糖转运蛋白(SUTs)是蔗糖转运的主要载体,其运输、装载蔗糖需要消耗能量,在植物光合产物从源到库的转运过程中起关键作用。从茶树品种舒茶早中鉴定获得7个CsSUTs家族成员,对其理化性质、基因结构、亚细胞定位、进化关系、顺式作用元件等展开生物信息学分析。CsSUTs家族蛋白含有一个保守MFS-2结构域,且与拟南芥AtSUCs蛋白的亲缘关系较近,茶树CsSUTs蛋白被聚类在SUTⅠ、Ⅱ和Ⅳ;在STRING在线网站中以拟南芥AtSUCs为模型,推测茶树CsSUTs蛋白与SWEET、SUS、STP蛋白可能存在直接的相互作用关系。对茶树CsSUTs家族基因的启动子区域进行分析,发现其中存在大量与激素响应、非生物胁迫,以及植物生长发育相关的顺式作用元件,推测这些启动子可能受到植物激素、逆境等多种因素的调控,从而影响茶树的生长和发育过程。CsSUTs家族基因在龙井43和舒茶早中的表达模式存在差异,CsSUT6在茶树花中特异性高表达,推测其可能在花器官蔗糖供给、贮藏和分配中发挥重要作用;CsSUT1和CsSUT5在茶树各个器官中均有表达,表明其可能协同参与蔗糖在“源”叶的装载和“库”器官卸载等过程。

乡村数字治理的苏北探索与政策启示

在数字经济时代,如何把互联网、云计算、大数据、人工智能等数字技术运用到乡村治理之中,以更好回应基层民众需求和基层治理需要,已成为全面推进乡村振兴的重大课题。徐州丰县、连云港东海、淮安洪泽、宿迁泗阳和盐城东台等5个苏北县区,在乡村数字治理领域开展了有益探索,但也面临诸多挑战和困难。新阶段推动乡村数字治理,要进一步完善制度规划,提高软硬件协同能力,提升基层治理参与者的数字素养,推动数字治理与乡村治理同频共振。

农村人居环境整治的探索、现实挑战与对策建议——以淮安市为例

改善农村人居环境是党中央从战略和全局高度作出的重大决策部署,是实施乡村振兴战略的重点任务,也是实施乡村振兴战略第一场硬仗。为了更好地推动农村人居环境整治工作,以淮安市农村人居环境整治为例,采用案例研究方法,总结淮安市杨庙村、小岗村和卢滩村3种典型的农村人居环境整治模式,提出当前农村人居环境整治仍存在思想认识不到位,资金缺口较大,长效管理运维机制缺乏等问题,需要进一步提高思想认识,注重规划引领;拓宽资金渠道,提高使用效率;完善管理机制,强化治理能力。

茶树捕光色素蛋白复合体基因CsLhcb2的鉴定及低温响应分析

茶树是我国重要的经济作物之一,其生长和发育过程中会遭受不同逆境影响,导致茶叶产量和品质下降。捕光色素蛋白复合体(Light-harvesting chlorophyll-protein complex)主要影响植物光合效率,在植物适应环境胁迫方面也发挥着重要作用。为研究茶树捕光色素蛋白复合体的特性,从龙井43克隆获得编码捕光色素蛋白复合体基因CsLhcb2,分析该基因编码蛋白序列特征、进化树、理化性质、亚细胞定位、二级结构、三级结构及其在4℃低温处理的表达情况。结果表明,CsLhcb2开放阅读框为798 bp,共编码265个氨基酸;该基因含有典型的Chloroa-b-bind保守结构域;与15种植物的LHCB2氨基酸序列进行多重比对,氨基酸序列的相似度达91.32%。进化树分析显示,CsLHCB2与曼陀罗、东南景天、葡萄亲缘关系较近,与麻竹和毛竹亲缘关系较远。CsLHCB2分子量为28 662.77,理论等电点为5.69,属于亲水性蛋白;亚细胞定位预测结果显示CsLHCB2主要定位在叶绿体中。荧光定量结果显示,CsLhcb2可能参与茶树低温胁迫的过程。常温处理条件下,一个光周期(24 h)内CsLhcb2的相对表达量呈现先上升,后下降趋势,龙井43和舒茶早在光照处理1 h达峰值,白叶1号在光照处理6 h达峰值;4℃低温条件下,3个茶树品种中CsLhcb2的表达均在光照处理12 h达到峰值,舒茶早中CsLhcb2表达量较高,分别为龙井43和白叶1号的1.18倍和1.98倍。研究结果为进一步研究茶树捕光色素蛋白复合体在茶树低温响应中的作用提供了参考。

二氯甲烷高效降解菌株的诱变选育

从工厂活性污泥中分离筛选到1株二氯甲烷降解菌WH22,鉴定为梭形芽孢杆菌(Lysiniba-cillus Fusiformis),利用60Coγ辐射和紫外线(UV)进行复合诱变.诱变的最佳条件:菌悬液经0.5 kGy60Coγ射线处理后,紫外照射处理(18 W,距离30 cm)100 s或120 s.菌液经以二氯甲烷为唯一碳源的无机盐培养基筛选,最终筛选到3株正突变株.在二氯甲烷浓度为800 mg/L的水溶液中,3株正突变株二氯甲烷的降解率分别为66.20%,52.90%,52.10%,比原始菌株的降解率分别提高了191.63%,133.04%,129.52%.正交试验表明:温度对突变株的降解效果影响最大,最佳温度为30℃.3株正突变株经8次传代培养,降解效率分别下降12.40%,11.05%,0.68%,是性状较为稳定可深入研究开发的优良菌株.

减重手术治疗肥胖症近期疗效的分析

目的探讨减重手术治疗肥胖症的临床疗效及其安全性。方法回顾分析14例行腹腔镜袖状胃切除术(LSG)及腹腔镜胃转流术(LGBP)治疗肥胖症病人的临床资料,随访时间6个月。结果 14例手术均在腹腔镜下顺利完成,无中转开腹和术中并发症发生。经过术后6个月随访,14例病人术后1、3、6个月腹围、体质量及体质量指数较术前均不断下降,均差异有统计学意义(P<0.01)。术后1、3及6个月额外体质量减轻百分率分别为(43.90±13.16)%,(67.62±18.21)%,(86.66±22.05)%。高脂血症、高血压及2型糖尿病等肥胖相关并发症发生率显著降低(P<0.05)。结论 LSG和LGBP治疗肥胖症及其合并症短期内安全有效,远期疗效有待进一步随访及观察。

齿瓣石斛提取物的急性毒性和遗传毒性

目的探讨齿瓣石斛的急性毒性和遗传毒性。方法 20只ICR小鼠灌胃3次,每次间隔4 h,观察7 d,考察对小鼠的急性毒性;选用TA97a、TA98、TA100、TA1024株组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌在加和不加S9两种条件下设齿瓣石斛5个剂量组(32、160、800、4 000、20 000μg/皿)行Ames试验;按齿瓣石斛5.0、10.0、20.0 g/kg进行小鼠精子畸形试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验考察遗传毒性。结果齿瓣石斛对小鼠经口最大耐受量大于45.0 g/kg;Ames试验显示,在加和不加S9时各剂量组回变菌落数与溶剂对照组相似;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验结果均为阴性。结论在本实验条件下,齿瓣石斛属无毒级物质,未见遗传毒性。

染料木黄酮抑制3T3-L1细胞成脂分化机制

目的：研究染料木黄酮是否通过雌激素受体介导影响3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,并探讨其可能的机制。方法：以不同浓度染料木黄酮处理3T3-L1细胞,四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法测定细胞存活率;在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中分别加入不同浓度染料木黄酮、染料木黄酮和ICI182780（一种雌激素受体抑制剂）混合物及不同浓度雌二醇,油红染色观察分化结果,测定细胞甘油三酯（triglyceride,TG）含量;染料木黄酮、染料木黄酮和ICI182780混合物及不同浓度雌二醇处理诱导成熟后的脂肪细胞,测定培养液甘油含量;分别用染料木黄酮（30μmol/L）、染料木黄酮（30μmol/L）和ICI182780混合物干预细胞成脂分化,Western blotting法检测细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）、p-ERK、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK）、p-AMPK、激素敏感性脂肪酶（hormone sensitive lipase,HSL）、脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）蛋白表达量。结果：3T3-L1细胞存活率随染料木黄酮浓度的升高而降低,50-200μmol/L染料木黄酮能抑制细胞生长（P〈0.01）;染料木黄酮能负向调节成脂分化后细胞胞浆内TG含量,在0-50μmol/L浓度范围内呈剂量依赖关系,高剂量雌二醇（100 nmol/L）能下调TG含量;染料木黄酮能促进成熟脂肪细胞脂解,提高细胞培养液甘油浓度;染料木黄酮（30μmol/L）能上调p-AMPK、HSL蛋白表达,下调FAS蛋白表达（P〈0.01）,对ERK、p-ERK、AMPK表达量无明显影响（P〉0.05）。ICI182780（1μmol/L）能部分阻断染料木黄酮（30μmol/L）对p-AMPK的调节作用（P〈0.05）。结论：染料木黄酮能抑制3T3-L1细胞成脂分化,其机制可能是染料木黄酮一方面下调FAS蛋白表达,抑制脂肪合成,另一方面激活AMPK-HSL途径促进脂肪分解;染料木黄酮还可能通过非雌激素受体途径抑制3T3-L1细胞成脂分化。

齿瓣石斛提取物对SD大鼠的致畸作用研究

目的研究齿瓣石斛对SD大鼠的胚胎毒性与致畸毒性。方法孕SD鼠随机分为4组,分别为齿瓣石斛4.5(低剂量)、9.0(中剂量)、18.0(高剂量)g/kg剂量组和阴性对照组,每组大于17只。在受孕的第7~16 d,每天经口给予受试物,实验期间记录孕鼠的一般状况、体重,于受孕第20 d剖检孕鼠,检查孕鼠的体重及妊娠情况,胎鼠的体重、身长、尾长与外观、骨骼、内脏的畸形情况。结果各剂量组孕鼠增重、活胎率、吸收胎率、活胎体重、身长及尾长与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。各剂量组和阴性对照组胎鼠的外观、骨骼及内脏未见畸形。结论在本实验条件下,未发现齿瓣石斛对SD大鼠的胚胎毒性和致畸毒性。

浅谈温度对铸铁导热性的影响特性

本文详细总结了温度影响铸铁导热性的原理和不同铸铁热导率的温度依存性。

研究制定《四川省铸造行业能耗计算方法和限额》标准的必要性分析

分析了我国和四川省铸造行业的基本状况,研究了铸造产业能耗标准的必要性和紧迫性以及我国铸造行业技术标准研究制定的发展过程和能耗判定标准的空白现状,提出《四川省铸造行业能耗计算方法和限额标准》的技术指导原则和技术分解建议。

茶树捕光色素蛋白复合体CsLhcb1基因的鉴定及干旱胁迫响应分析

【目的】捕光色素蛋白复合体是高等植物中能够捕获光能,并把能量快速传递至反应中心从而引起光化学反应的一类色素蛋白复合体,在光合作用中发挥着不可代替的作用。采用基因克隆、生物信息学分析和基因表达等方法探究干旱胁迫下CsLhcb1在茶树中的作用,为进一步揭示茶树CsLhcb1基因的功能提供理论依据。【方法】以茶树品种‘龙井43’‘舒茶早’和‘白叶一号’为试验材料,利用PEG-6000(20%)模拟干旱胁迫环境,通过基因克隆、生物信息学以及实时荧光定量的方法,检测CsLhcb1的结构和特征及其在干旱胁迫响应。【结果】从‘龙井43’的c DNA中克隆获得CsLhcb1基因,序列分析表明,该基因全长为810 bp,共编码269个氨基酸;该蛋白的分子量为29065.36 Da。荧光定量结果显示,干旱胁迫,茶树品种‘龙井43’中的CsLhcb1基因相对表达量在1 h时达到最高值,之后逐渐下降;在‘舒茶早’中该基因相对表达量也在1 h时达到最高值,之后下降,24 h又上升;在‘白叶一号’中该基因的相对表达量在6 h时达到最高值,之后下降,在1h时‘舒茶早’的表达量分别为‘龙井43’和‘白叶一号’的1.49、1.6倍;在24 h时‘舒茶早’的表达量分别为‘龙井43’和‘白叶一号’的9.56、5.73倍。【结论】干旱胁迫影响了捕光色素蛋白复合体基因CsLhcb1的表达,且在不同的茶树品种中表达量有差异。

人才引领创新、创新驱动发展、发展提高服务--以溧水区华成蔬菜专业合作社为例

南京市地处长三角,经济发达,是我国科技创新之城,南京市溧水区作为国家农业高新技术产业示范区,全国农业科技现代化先行县,蔬菜产业具有鲜明的特色。近年来,溧水区华成蔬菜合作社紧紧围绕人才、创新、服务等方面开展工作,成为南京市乃至江苏省具有较高影响力的蔬菜专业生产、销售、加工型企业。

水稻编码光系统Ⅱ相关捕光色素蛋白Lhcb2基因的克隆与表达分析

捕光复合物蛋白(LHCP)在植物光合作用过程中发挥重要的作用。基于水稻基因组信息,以亚洲栽培稻籼稻品种黄华占、长雄蕊野生稻及其杂种F1为试验材料,克隆了水稻Lhcb2基因,并对其基因内含子信息、蛋白序列特征、进化树、蛋白结构、基因表达进行分析。结果表明:水稻Lhcb2基因全长880 bp,含有1个长98 bp的内含子。开放阅读框长度为792 bp,编码263个氨基酸;水稻LHCB2与13个其他植物的LHCB氨基酸序列一致性为68.78%。进化树分析显示,水稻LHCB2蛋白与同属禾本科的毛竹和麻竹亲缘关系最近,与低等植物团藻亲缘关系最远。水稻LHCB2蛋白属于亲水性蛋白,其理论分子量为28 495.40,理论等电点为5.62,具有2个无序化区域,无序化比例为30.04%;水稻LHCB2蛋白三级结构有2个β折叠和3个α螺旋组成。Lhcb2基因荧光定量分析结果显示,长雄蕊野生稻和杂交F1代植株叶片中表达量分别为黄华占的1.22和1.96倍。长雄蕊野生稻中的叶绿素a和b、色素、类胡萝卜素等均高于黄华占及其杂交F1代。长雄蕊野生稻叶绿素a的含量分别为另2份水稻材料的1.13和1.75倍,叶绿素b含量为1.10和1.60倍,色素含量则为1.13和1.72倍。

妊娠期灾难性抗磷脂抗体综合征合并急性脑卒中1例

抗磷脂抗体综合征(Antiphospholipid syndrome,APS)是由抗磷脂抗体引起的,以反复动脉、静脉血栓,习惯性流产及血小板减少为主要临床表现的一组临床综合征,属于自身免疫性疾病,原因不明,近一半病例患有系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)[1]。迄今为止,仍然没有确切有效的调节免疫的治疗方法[2]。

构建“国考+校考”的递进式研究生招生考试新模式

硕士研究生招生考试是招收、录取研究生的基本途径,健全的研招考试制度是开展研究生教育的逻辑起点和培养国家高层次人才的关键。本文对现行硕招考试制度进行梳理,着重就其局限性进行分析,并提出了构建“国考+校考”递进式招生考试模式的政策建议,即国家统一开展评价基础能力的资格性考试“国考”,继而由学校开展以专业知识考核为主的“校考”,并对该模式进行了优劣分析,为加快推进硕士研究生教育改革发展提供了理论借鉴。

激流式生物反应器培养MDCK细胞条件优化

应用激流式生物反应器培养MDCK细胞,从培养基种类、接种密度、pH和溶氧量等关键参数进行优化。结果表明,激流式生物反应器培养MDCK细胞,细胞接种密度为1.5×106个/mL、pH7.2、溶氧量50%～60%、循环流量400mL/min和振荡频率60r/min条件下培养5d可达到最大细胞密度(1.02×107个/mL)及最高糖耗量(3.1g/L),为激流生物反应器大规模培养细胞及病毒疫苗生产奠定基础。