3’-羟基紫檀芪抑制胰腺导管腺癌细胞生长的作用及其机制研究

目的 探究3’-羟基紫檀芪(3’-HPT)对胰腺导管腺癌(PDAC)细胞在体内外的抗肿瘤作用,为3’-HPT在临床上用于PDAC的治疗提供实验基础。方法 用不同浓度的3’-HPT分别处理PDAC细胞系PANC-1和PaTu8988t细胞24 h和48 h;CCK-8实验检测两种细胞的活力变化,计算药物的IC50;集落形成实验检测3’-HPT处理24 h后的PDAC细胞集落形成能力,细胞迁移实验检测3’-HPT处理后肿瘤细胞的迁移能力,流式细胞术检测3’-HPT处理后活细胞凋亡率。Western blotting实验检测3’-HPT处理后肿瘤细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail、Cleaved Caspase 3及Bcl-2表达水平;免疫荧光实验检测3’-HPT处理后细胞中Ki-67、Snail、Bcl-2表达情况。构建裸鼠皮下成瘤模型探究3’-HPT在体内的效应;免疫组化实验检测3’-HPT(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))处理后裸鼠PDAC移植瘤细胞中Ki-67、Snail、Bcl-2表达情况。结果 3’-HPT可以抑制PDAC细胞PANC-1和PaTu8988t生长,并具有浓度依赖性。3’-HPT对PANC-1细胞的IC50为4.97μmol/L,对PaTu8988t细胞的IC50为4.75μmol/L。经2.5μmol/L和5.0μmol/L 3’-HPT处理后,PDAC细胞的集落数目显著减少,细胞迁移能力显著降低,活细胞凋亡率显著升高。Western blotting实验结果显示3’-HPT处理能够抑制PDAC细胞中N-cadherin、Snail与Bcl-2蛋白表达并促进E-cadherin、Cleaved Caspase 3蛋白表达。免疫荧光实验显示细胞中Ki-67、Snail、Bcl-2表达水平均有所降低。3’-HPT能显著抑制裸鼠体内PDAC移植瘤的生长,但对裸鼠体质量无显著影响。免疫组化实验显示3’-HPT处理能够显著降低裸鼠移植瘤中的Ki-67、Snail和Bcl-2表达水平。差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 3’-HPT能够抑制体内外PDAC细胞的生长,并抑制细胞迁移,促进凋亡。