一种小鼠原代肝细胞的分离与培养方法

目的:探索一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离方法,并延长其体外培养的时间。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以含双抗的D-Hanks灌流液经肝门静脉充分灌注肝脏,然后以0.2 mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注消化,接着过滤、离心、洗涤,获得小鼠原代肝细胞。通过台盼蓝染色检验小鼠原代肝细胞活率,利用倒置显微镜观察肝细胞的形态变化,糖原染色鉴定细胞纯度,添加ITS-X和HGF细胞因子延长小鼠原代肝细胞的体外培养时间。结果:平均每只成年小鼠肝脏可提取获得原代肝细胞约2×107个,台盼蓝染色显示细胞活率均超过95%,糖原染色结果表明此方法获得的原代肝细胞纯度高于95%,通过添加HGF和ITS-X两种细胞因子能够有效地延长肝细胞形态的体外维持时间。结论:本实验在原有小鼠原代肝细胞两步灌流分离法和培养的基础上,经过优化,成功建立了一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离和培养方法,为肝脏的体外研究提供了技术保障。

不锈钢支架的塑性变形量对血管壁细胞行为的影响

心血管疾病介入治疗中大量使用金属支架。支架撑开后,各位置塑性变形量不同,与血管壁/细胞直接接触并发生相互作用时,金属塑性变形量将对表面血管壁细胞行为产生影响。基于此,本文以生物医用不锈钢为对象,针对血管支架扩张后的塑性变形,设定不同变形量ε (20%、60%、100%),并借助万能试验机制备相应样品;通过光学显微镜(OM)、扫描电子显微镜(SEM)、台阶仪等对样品表面进行材料形貌表征;通过水接触角测试、表面能分量计算等对样品表面进行理化性质测定;通过荧光染色法和CCK-8 (Cell Counting Kit-8)细胞活性检测对血管壁细胞的生长行为进行评价。结果显示,因塑性变形量的差异,内皮细胞在ε = 60%时细胞活性最好,平滑肌细胞的细胞活性没有明显差异;当ε 】60%时,内皮细胞与平滑肌细胞的生长方向均趋向于与拉伸方向平行。本文研究结果提示,对血管支架进行恰当构型设计,调整服役过程中支架不同位置的塑性变形量,改善血管壁细胞行为,具有重要意义。

湿疹膏的制备工艺研究

为治疗湿疹提供一款质量稳定的湿疹膏配方。采用文献分析和实验对比的方法,选定氧化锌乳膏配方为初始基质配方,在原配方中添加紫草油、苦参提取物及甘草次酸等有效成分,不断调整配比,制成湿疹膏。结论:凡士林2.5 g、十八醇4.5 g、紫草油5 mL、薄荷脑0.47 g、羊毛脂2.0 g、甘油3.5 g、硼酸2.0 g、甘草次酸0.5 g、十二烷基硫酸钠0.5 g、丙二醇2.0 g、对羟基苯甲酸乙酯0.05 g、苦参总碱0.05 g、氧化锌5.0 g、纯化水16.0 g制备出来的湿疹膏质地细腻、延展性好。

医药中间体对氯溴苯的合成新方法

以氯苯为原料,溴素为溴源,铁粉为催化剂,对在超声波作用下合成对氯溴苯的反应进行了研究,通过单因素实验考察了反应时间、反应温度、超声波频率、催化剂用量和物料配比等因素对反应产率的影响,得到了较佳的工艺条件,并与传统方法进行了对比试验。较佳反应条件是:以等物质的量的氯苯和溴作为反应物,催化剂的物质的量是反应物的物质的量的1/10,滴溴时间20 min,继续震荡时间10 min,反应温度20℃,超声频率40 kHz,对氯溴苯产率为53.44%。

武汉:开拓创新,久久为功,筑牢学生视力健康防线

自2018年教育部等八部委颁布《近视防控实施方案》以来,3年间,我国近视防控工作从规划到落地执行,不断向好向稳推进。当前,面对儿童青少年近视高发这一重大而突出的公共卫生问题,学校、家庭、社会各界都置身其中,合力筑牢学生近视防控责任共同体,各司其职、各尽其责,为共同呵护好学生视力健康而积极贡献力量。以全国学生视力健康管理示范区武汉为例,自2005年起就在当地政府主导下,在全国率先开展近视防控工作,并做出了一些成果。在近视防控道路上,“武汉案例”或能给各地带来更多切实可行的方法借鉴。