Ras基因及其信号转导通路与皮肤肿瘤关系

Ras基因是人类肿瘤中一种常见的癌基因,约有30%的恶性肿瘤存在Ras基因的点突变。皮肤肿瘤是一种常见的肿瘤,Ras基因及其信号转导通路的异常与皮肤肿瘤的发生、发展密切相关。文中就Ras基因及其信号转导通路与皮肤肿瘤关系作一综述。

皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中Ras基因家族12/13位密码子突变的检测

目的:探讨皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中Ras基因家族(H-ras/N-ras/K-ras)12/13位密码子的突变情况。方法:从14例皮肤病理性瘢痕,14例瘢痕癌石蜡包埋组织中提取DNA,进行PCR扩增及测序,分析H-ras、N-ras、K-ras基因第12、13位密码子突变情况。结果:28个样本均成功提取DNA,扩增出基因片段,经测序均未发现H-ras、N-ras、K-ras基因第12、13位密码子的点突变。结论:皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌中Ras基因家族的突变位点有待进一步探讨。

喜树碱前体多相脂体的药理学研究

本文报道了对喜树碱前体(A-CPT)及喜树碱前体多相脂质体(A-CPT-pl)的药理学研究结果。结果表明,A-CPT腹腔注射给药(ip)及经口腔给药(PO),寇氏法求得小鼠的LD50分别为159.3mg/kg及33.7mg/kg,较喜树碱钠盐(CTP-Na)的毒性降低,按最大允许给药容量(0.5ml/10g)ip或PO A-CPT-pl 50mg/kg,在观察期间未见死亡。抑瘤试验结果表明,A-CPT-pl对S180及HepS的抑制率可达74%及82%,可使荷EAC小鼠的生命延长126%;A-CPT对S180及HepS的抑制率可达52%及53%,可使荷EAc小鼠的生命延长54%。肿瘤相伴免疫试验结果表明,每日ip,A-CPT-pl 0.5mg/kg,连续9天,对小鼠肿瘤相伴免疫没有明显影响。

喜树碱前体的药物动力学研究

用沉淀荧光法研究了喜树碱前体(A-CPT)在小鼠体内的药物动力学,结果表明,A-CPT在小鼠体内的血药浓度经时过程符合三隔室开放模型。其α、β及γ相的半衰期分别为1.8,64.5及852min;Vc及Vd分别为4.63×1O^(-3)及O.741,Cl及AUC分别为6.07×10^(-4)l/min及2082μg·min/ml;MRT为999min。组织分布研究表明,静脉注射给药后24h内的组织浓度时间曲线下面积按照肠(含内容物),骨(含髓),肾,脑,肝(含胆),胃(含内容物)肺,脾,血及心的顺序依次递减。除胃、肠的组织浓度时间曲线有浓度峰以外,其它组织的浓度时间曲线呈单调下降的趋势。

K-RAS蛋白的表达、基因突变在皮肤瘢痕癌组织中的意义

目的探讨K-ras蛋白表达、基因突变在皮肤瘢痕癌组织中的意义。方法以皮肤病理性瘢痕、皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以正常皮肤组织为对照。采用免疫组织化学(SP)法检测K-ras蛋白的表达。另外,从瘢痕和瘢痕癌石蜡组织中提取DNA,进行PCR扩增及测序,分析K-RAS基因第12、13位密码子点突变情况。所有数据运用SPSS16.0软件包进行统计学分析。结果①K-ras蛋白在正常皮肤表皮和皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性表达,在瘢痕癌组织中呈强阳性表达。瘢痕癌组的表达与正常皮肤组及皮肤瘢痕组比较,差异均有显著性(P<0.05);正常皮肤组与瘢痕组比较,差异无显著性(P>0.05)。②从14例皮肤瘢痕和14例瘢痕癌石蜡组织中提取DNA,经PCR反应,均成功扩增出目的片段,测序未发现K-ras基因第12、13位密码子的点突变。结论①皮肤瘢痕癌的发生可能与K-ras蛋白的高表达有关。②瘢痕癌中K-ras基因的突变位点有待进一步探讨。

喜树碱前体多相脂质体的药物动力学研究

本文考察了沉淀荧光法测定组织中喜树碱浓度的可行性。实验结果表明,沉淀荧光法测定组织中喜树碱具有简便、快速的特点,且该法的选择性较好;灵敏度较高。用沉淀荧光法测定静脉注射给药后血浆中药物浓度研究结果表明,静注给药喜树碱前体多相脂质体(A-CPT-p1)后,其血药浓度时间过程符合三隔室开放模型,其α、β、γ相的半衰期分别为9.0,66.0及644min;V_(?),Vd分别为4.4296×10^(-2)及0.2508L;AUC及CJ分别为19474μg·min/ml及2.70×10^(-4)l/min;MRT为22.8h.

喜树碱前体多相脂质体的组织分布研究

本文报道了喜树碱前体多相脂质体(A-CPT-PL)小鼠体内的组织分布研究结果。静注给药后,A-CPT-PL主要分布于肺,给药后24h内组织中药物浓度时间曲线下面积AUC_0^(24)依肺、肝、肠、肾、脾、血、胃、心、骨、脑的顺序递减,这种分布特征是脂质体运载药物的结果;A-CPT-PL的组织分布是剂量依赖性的。口服给药后,大部分药物仍然保留在消化道系统。

20例皮肤瘢痕癌中RAS蛋白表达及意义

目的探讨皮肤瘢痕癌中RAS蛋白(H-ras/N-ras/K-ras)表达及意义。方法以20例皮肤瘢痕癌组织为研究对象,以10例正常皮肤表皮和16例瘢痕上皮为对照。采用免疫组化SP法分别检测H-ras、N-ras、K-ras蛋白的表达并结合图像分析,分别观测各组被检组织中所检各项指标的表达(平均光密度和阳性面积)。结果 (1)H-ras、N-ras、K-ras蛋白在正常皮肤表皮和瘢痕上皮中呈阴性或弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性,瘢痕癌组的表达(平均光密度和阳性面积)与正常皮肤组和瘢痕组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)K-ras蛋白阳性信号在正常皮肤表皮呈胞核表达,在瘢痕上皮中同时出现胞核和胞质表达,在瘢痕癌中呈胞质表达,出现自胞核向胞质移位表达。(3)瘢痕癌中不管是组织学类型还是细胞的分化,均显示分化越高RAS蛋白表达越强,分化越低RAS蛋白表达越弱,高分化组与低分化组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 H-ras、N-ras、K-ras 3种蛋白的高表达以及K-ras蛋白的移位表达可能与瘢痕癌的发生有关3,种蛋白的表达强度与肿瘤细胞的分化成熟度相一致。

皮肤瘢痕癌组织中MDM2的表达及意义

目的:检测皮肤瘢痕癌组织中MDM2蛋白和mRNA的表达并探讨其作用机制。方法:以皮肤瘢痕癌、病理性瘢痕为研究对象,正常皮肤作为对照。采用免疫组化和原位杂交法,分别检测MDM2蛋白和mRNA的表达,运用图像分析系统检测3组标本的表达指标(平均光密度和阳性面积)。结果:在皮肤瘢痕癌组织中MDM2蛋白和mRNA的表达呈阳性或强阳性,在皮肤病理性瘢痕组织中呈弱阳性或阳性,在正常皮肤组织中呈阴性或弱阳性。组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:皮肤瘢痕癌的发生可能与MDM2蛋白和mRNA的高表达有关。检测MDM2蛋白和mRNA表达水平,有可能预测皮肤病理性瘢痕早期癌变。

鳞状细胞癌放疗后非典型性纤维黄瘤1例

患者男,78岁。18年前患者左面颊出现黄豆大肿物,逐渐增大、破溃,针刺细胞学检查诊断为鳞状细胞癌。放疗后,皮损消退。3个月前,原损害处再次出现黄豆大结节,反复破溃。病理检查为非典型性纤维黄瘤。手术切除,术后放疗,随访半年无复发、无转移。

Ras基因蛋白的表达及基因突变与皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌的相关性

目的探讨Ras基因家族(K-ras、H-ras、N-ras)蛋白的表达和基因突变与病理性瘢痕上皮癌变和瘢痕癌发生的相关性。方法用激光扫描共聚焦显微技术检测皮肤病理性瘢痕和瘢痕癌组织中K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光蛋白表达;免疫组织化学技术(SP)法检测正常皮肤、病理性瘢痕和瘢痕癌组织中K-ras、H-ras、N-ras蛋白的表达;从病理性瘢痕和瘢痕癌组织中提取DNA,分析K-ras、H-ras、N-ras基因第12、13位密码子突变情况。所有数据运用SPSS16.0软件包进行统计学分析。结果①K-ras、H-ras、N-ras3种蛋白在病理性瘢痕上皮中呈现较弱荧光,为弱阳性表达,在瘢痕癌组织中呈现较强荧光,为强阳性表达。②3种蛋白在正常皮肤表皮、病理性瘢痕上皮和瘢痕癌组织中分别呈阴性或弱阳性、弱阳性或阳性和强阳性表达。瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均光密度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01;P﹤0.05);但正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。③病理性瘢痕和瘢痕癌中均未发现K-ras、H-ras、N-ras基因12、13位密码子突变。结论①瘢痕癌的发生与K-ras、H-ras、N-ras蛋白的高表达有相关性;②病理性瘢痕上皮和瘢痕癌组织中不存在K-ras、H-ras、N-ras基因12、13位密码子突变。③病理性瘢痕上皮中没有发现癌变早期信号。

Ras、MAPK、CyclinD1与皮肤病理性瘢痕癌变相关性研究

目的探讨Ras/Raf/MAPK信号通路及其通路下游靶基因CyclinD1与病理性瘢痕癌变的相关性。方法 (1)激光扫描共聚焦显微技术,对病理性瘢痕和瘢痕癌组织进行K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光双标记。(2)免疫组织化学SP法分别检测正常皮肤、病理性瘢痕和瘢痕癌三组组织中MAPK、Cy-clinD1蛋白的表达。(3)原位杂交技术检测三组组织中MAPK mRNA、CyclinD1 mRNA的表达。(4)用基因测序技术,检测病理性瘢痕上皮中K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变。结果 (1)免疫荧光双标记:K-ras、H-ras、N-ras在病理性瘢痕上皮中呈现较弱荧光,为弱阳性表达;在瘢痕癌组织中呈现较强荧光,为强阳性表达。(2)MAPK及其mRNA和CyclinD1及其mRNA在正常皮肤表皮均呈阴性或弱阳性表达,在皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性表达,在瘢痕癌组织中呈强阳性表达。瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均吸光度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)在病理性瘢痕中未发现K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变。结论 (1)Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPK mR-NA、CyclinD1 mRNA不是瘢痕上皮癌变的早期信号。(2)K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变与病理性瘢痕上皮癌变无关。

替米沙坦对阿霉素肾损伤大鼠血浆中血管紧张素(1～7)水平的影响

目的 观察替米沙坦对阿霉素（adriamycin, ADR）诱导的肾损伤大鼠血浆中血管紧张素（1~7）[Ang（1~7）]水平的影响.方法 50只健康、雄性SD大鼠,随机分为对照组（n=10）、ADR模型组（n=20）、替米沙坦组（n=20）.对照组腹腔注射同等剂量的生理盐水;另两组均腹腔注射ADR 2.5mg/kg,每周3次,共2周,累积量15mg/kg,同时替米沙坦组给予替米沙坦10mg/（kgd）（累积量420mg/kg）灌胃干预共6周.实验过程中观察大鼠精神、活动、饮食等一般情况.于末次注射停药后4周,检测大鼠终末体重、血浆Ang（1~7）水平,处死大鼠后制作肾脏病理切片并观察组织学变化.结果 ADR模型组及替米沙坦组大鼠体重均较对照组下降（P均〈0.01）,但替米沙坦组体重较ADR模型组有所增加（P〈0.01）,ADR模型组与替米沙坦组大鼠血浆Ang（1~7）的水平较对照组亦下降（4.272.79 vs 10.262.39ng/ml, P〈0.01;7.162.13 vs 10.262.39ng/ml,P〈0.05）,但替米沙坦组血浆Ang（1~7）水平较ADR模型组升高（P〈0.05）,组织病理学变化：与对照组相比,ADR模型组大鼠肾脏炎性细胞成簇聚集、浸润明显增多,且肾小管上皮细胞水肿;替米沙坦组炎性细胞浸润则较模型组明显减少,肾小管上皮细胞水肿程度亦减轻.结论 替米沙坦能够提高阿霉素肾损伤大鼠血浆中Ang（1~7）的水平,且该变化水平可能与肾脏炎性反应的严重程度有一定的相关性.

曲尼司特在人体内的药动学及生物利用度研究

目的：测定曲尼司特（Ｔｒａ）在人体内的药动学及生物利用度。方法：健康志愿者１２人，随机、交叉、单剂量ｐｏＴｒａ片剂或胶囊４００ｍｇ，采用反相高效液相色谱法测定不同时间血药浓度，在计算机上以３Ｐ８７程序拟合处理，计算药动学参数。结果：Ｔｒａ片剂和胶囊的Ｔ１／２Ｋ，Ｋ，Ｔｍａｘ，ｃｍａｘ和ＡＵＣ分别为７．３１和９．４４ｈ，０．１１４和０．０８５６ｈ－１，５．１１和４．８４ｈ，７４．９２和７７．４０μｇ／ｍｌ，１３３９和１５４４（μｇ·ｈ）／ｍｌ。结论：经统计学分析表明，片剂与胶囊剂之间的药动学参数无显著性差异（Ｐ＞０．０５），片剂相对于胶囊的生物利用度为９９．６６％。

黑素瘤组织中乙醛脱氢酶1、上皮性钙黏附蛋白及尿激酶型纤溶酶原激活物受体的表达及临床意义

目的研究黑素瘤组织中乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin,E-cad)及尿激酶型纤溶酶原激活物受体(urokinase-type plasminogen activator receptor,uPAR)的表达及与临床病理特征的关系。方法选择50例黑素瘤和50例色素痣患者的病变组织作为研究对象,采用免疫组化法检测病变组织中的ALDH1、E-cad及uPAR的表达情况,分析这3种蛋白表达与患者临床组织病理特征、肿瘤分期的关系。结果黑素瘤组织中ALDH1和uPAR表达阳性率分别为82.00%(41/50)和86.00%(43/50),均显著高于色素痣组(P<0.05);黑素瘤组织中E-cad阳性表达率为38.00%(19/50),显著低于色素痣组(P<0.05)。ALDH1、uPAR表达阳性率与患者年龄、性别、肿瘤厚度、浸润深度、是否淋巴结转移和组织病理分型均无相关性,但肿瘤厚度≥4 mm、浸润深度Ⅳ~Ⅴ、发生淋巴结转移等患者黑素瘤组织中ALDH1、uPAR表达阳性率均>90%。浸润深度Ⅳ~Ⅴ的黑素瘤患者E-cad表达阳性率显著低于浸润深度Ⅰ~Ⅲ的患者(P<0.05),黑素瘤患者E-cad表达阳性率与其他临床特征无相关性。结论黑素瘤在发生和进展过程中ALDH1、uPAR表达上调,E-cad表达下调,E-cad表达下调与肿瘤程度有关。

乳腺颗粒细胞瘤一例报道并文献复习

颗粒细胞瘤（granular cell tumor，GCT）是一种少见的起源于神经系统的软组织良性肿瘤，可发生于身体的任何部位，最常发生于头颈部区域，尤其多见于舌部，有8％的GCT发生于消化道，发生于乳腺者更为少见，大约占此类肿瘤的6．6％。本文报道1例乳腺GCT患者的临床病理资料，并结合文献探讨该瘤的病理特征、诊断及鉴别要点。