目的:研究不同基因型聚合酶(polymerase,pol)复制乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA的能力是否存在差异。方法:采用不依赖酶切和连接的克隆(restriction digestion and ligation-independent cloning,RLIC)方法和HBV聚合酶反式互...目的:研究不同基因型聚合酶(polymerase,pol)复制乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA的能力是否存在差异。方法:采用不依赖酶切和连接的克隆(restriction digestion and ligation-independent cloning,RLIC)方法和HBV聚合酶反式互补技术表达并检测A、B、C、D 4种基因型聚合酶复制HBV DNA的情况。结果:(1)反式互补技术可使A、B、C、D型HBV重新获得表达,HBV DNA量分别为A=(63.03±8.03)×105 copies/μl,B=(23.23±3.53)×105 copies/μl,C=(17.63±1.25)×105 copies/μl,D=(75.73±9.43)×105 copies/μl。(2)HBV不同基因型聚合酶之间复制HBV能力存在差异,F(4,10)=91.88,P=0.000。(3)A型和D型聚合酶复制HBV能力强于B型和C型聚合酶,差异有统计学意义,P(A,B)=0.001,P(A,C)=0.001,P(B,D)=0.001,P(C,D)=0.001。结论:HBV不同基因型聚合酶之间复制HBV能力存在差异;为深入研究不同基因型在地理分布、所致疾病严重性等方面提供了有用信息并奠定了坚实的基础。展开更多
目的：了解重庆地区乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）基因型的分布情况并进行精确定量分析。方法：采用荧光分型定量聚合酶链反应法（Real-time genotyping and quantitative PCR,GQ-PCR）对收集的血清标本进行HBV基因分型并定量...目的：了解重庆地区乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）基因型的分布情况并进行精确定量分析。方法：采用荧光分型定量聚合酶链反应法（Real-time genotyping and quantitative PCR,GQ-PCR）对收集的血清标本进行HBV基因分型并定量。结果：152株血清标本成功分型148株（97.37%）,其中B基因型109例（男88例、女21例）[定量值范围4-12 log10copies/ml、均值和标准差（7.94±1.44）log10copies/ml]、C基因型10例（男6例、女4例）[定量值范围5~10 log10copies/ml、均值和标准差（8.12±1.64）log10copies/ml]、基因B＋C混合型29例（男24例、女5例）[定量值范围4~10 log10copies/ml、均值和标准差（7.45±1.59）log10copies/ml]。检出率分别为73.65%（男74.58%、女70.00%）、6.76%（男5.08%、女13.30%）、19.59%（男20.34%、女16.70%）。结论：重庆地区HBV优势基因型以B型和B＋C混合型为主,与前几年相比较,C型有下降趋势。基因型的分布与性别无关（P〉0.05）。HBV载量在B、C型及B＋C混合型三者之间无统计学差异（P〉0.05）。荧光分型定量PCR（GQ-PCR）法灵敏度和特异性高,能够同时准确的对临床标本进行HBV基因分型及定量检测,并有望替代传统的基因分型方法。展开更多
文摘目的：了解重庆地区乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）基因型的分布情况并进行精确定量分析。方法：采用荧光分型定量聚合酶链反应法（Real-time genotyping and quantitative PCR,GQ-PCR）对收集的血清标本进行HBV基因分型并定量。结果：152株血清标本成功分型148株（97.37%）,其中B基因型109例（男88例、女21例）[定量值范围4-12 log10copies/ml、均值和标准差（7.94±1.44）log10copies/ml]、C基因型10例（男6例、女4例）[定量值范围5~10 log10copies/ml、均值和标准差（8.12±1.64）log10copies/ml]、基因B＋C混合型29例（男24例、女5例）[定量值范围4~10 log10copies/ml、均值和标准差（7.45±1.59）log10copies/ml]。检出率分别为73.65%（男74.58%、女70.00%）、6.76%（男5.08%、女13.30%）、19.59%（男20.34%、女16.70%）。结论：重庆地区HBV优势基因型以B型和B＋C混合型为主,与前几年相比较,C型有下降趋势。基因型的分布与性别无关（P〉0.05）。HBV载量在B、C型及B＋C混合型三者之间无统计学差异（P〉0.05）。荧光分型定量PCR（GQ-PCR）法灵敏度和特异性高,能够同时准确的对临床标本进行HBV基因分型及定量检测,并有望替代传统的基因分型方法。
