新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系。构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中。分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平。逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达。结果与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05)。筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度。与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κBp65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05)。与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5pinhibitor相比,将miR-502-5pinhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响。结论XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴。

基于网络药理学和分子对接探究新风胶囊“异病同治”类风湿关节炎和骨关节炎作用机制

目的:分析新风胶囊(XFC)“异病同治”类风湿关节炎(RA)和骨关节炎(OA)的分子机制。方法:TCMSP数据库筛选XFC的活性成分及靶点,疾病数据库中筛选RA和OA的靶点,构建药物-成分-靶点网络。构建交集靶点的蛋白互作网络,进行功能富集分析和分子对接。绘制XFC治疗RA和OA信号通路。结果:共鉴定103种化合物和217个靶点,槲皮素、蜈蚣素、山柰酚、谷甾醇α1、芒柄花黄素、雷公藤甲素、豆甾醇、山海棠二萜内酯A等11个化合物与≥30个靶基因相关联,其中9个靶基因(STAT3、MAPK14、NR3C1、JUN、FOS、MYC、TNF、RELA和MAPK1)是网络中的核心靶基因。富集分析表明IL-17、TNF、Th17、Toll和NF-κB信号通路可能是关键信号通路。分子对接表明山海棠二萜内酯A、槲皮素、雷公藤甲素、谷甾醇α1、蜈蚣素与NR3C1、FOS、STAT3、MAPK1和TNF靶点具有良好的结合活性。结论:XFC “异病同治”RA与OA的机制与抗炎、免疫调节、减少骨破坏等相关,具有多系统、多成分、多靶点的作用。

黄芩清热除痹胶囊治疗风湿病湿热痹阻证研究进展

风湿病是以炎症免疫失调为主要特征的一组系统性疾病,湿热痹阻证是风湿病活动期的常见中医证型,刘健教授依据新安医家治痹经验结合临床实践创制的黄芩清热除痹胶囊,治疗风湿病湿热痹阻证疗效显著。该文对黄芩清热除痹胶囊的组方方解、药学研究及治疗风湿病的临床、实验研究进行综述,以期为黄芩清热除痹胶囊的进一步深入研究提供理论参考。

强直性脊柱炎患者与Chat GPT的对话实验:患者教育的新方式

医疗资源的紧张限制了强直性脊柱炎患者与临床医生交流的时间,需要为强直性脊柱炎患者的临床困扰寻找一种人工智能式的解决方案。模拟真实强直性脊柱炎患者与基于大型语言模型技术的聊天机器人ChatGPT进行对话,内容包括强直性脊柱炎患者所困扰的病因、症状、并发症、预后、治疗、用药、生活调理等方面。ChatGPT以其相当高的医疗水平,友善的交流态度,全面地回答了所设计的问题。将ChatGPT用于解答强直性脊柱炎患者临床问题是有效的,其能够完成患者教育的任务,缓解医疗资源的紧张。

基于久病入络理论探讨刘健教授治疗难治性痛风经验

难治性痛风的特点是反复发作,迁延难愈,近年来发病率逐渐升高。刘健教授基于“久病入络”理论认为,难治性痛风的病机是脾虚湿盛,湿痰瘀蓄积络中;治疗上要遵循健脾、通络两大治则,根据病程阶段、病邪偏盛而选用不同治法。

基于“心肺同归一治”学术思想论治慢阻肺并发失眠

“心肺同归一治”学术思想认为心肺位置毗邻,两脏之病可通治。慢阻肺以肺气虚为本,痰、水、瘀兼交为患,病久迁及于心,心神不宁或心神失养而发失眠,在治疗上需两脏统筹一治。文章从实邪外扰、五行乘侮、气血同归、阴阳失衡角度探讨慢阻肺并发失眠的病机及诊治,旨在为此病的发生发展提供诊疗思路借鉴。

中药血清指纹图谱的研究进展

中药复方是中医药防病治病的主要应用方法,中药复方的成分复杂多样,通过多成分、多靶点起到防病治病的作用。中药指纹图谱虽然可以解决中药复方药效成分复杂的问题,但是不能够有效地表征体内的活性,逐渐兴起的中药血清指纹图谱就可以为中药复方活性成分在体内的变化情况做进一步的补充,有助于阐明中药复方血中的移行成分、中药复方药效物质基础和中药体内药动学特点等,结合近年来的相关研究,进行综述。

生物信息学和机器学习策略识别骨关节炎炎性衰老生物标志物与临床验证

目的 本研究旨在识别骨关节炎(osteoarthritis, OA)中炎性衰老生物标志物。方法 GEO(Gene Expression Omnibus)数据库获得年轻OA和老年OA微阵列基因谱,人类衰老基因组资源数据库(Human Aging Genome Resource,HAGR)获得衰老相关基因(aging-related genes, ARGs)。筛选获得年轻OA与老年OA的差异基因,再与ARGs取交集得到OA衰老相关基因。富集分析揭示OA衰老相关标志物的潜在机制。3种机器学习方法识别OA核心衰老标志物,受试者工作特征(receiver operating characteristic curve, ROC)曲线评估其诊断OA炎性衰老的能力。收集临床OA患者外周血单核细胞验证衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype, SASP)因子和衰老标志物的表达。结果 总共获得45个衰老相关标志物,主要参与对细胞衰老、细胞周期、炎症反应等的调控。3种机器方法筛选得出5个核心衰老标志物(FOXO3、MCL1、SIRT3、STAG1和S100A13)。纳入20例正常组,40例OA患者,包括年轻组和老年组各20例。与年轻组相比,老年组OA中C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-1β上升,IL-4水平下降(P<0.01);FOXO3、MCL1、SIRT3 mRNA表达下降,STAG1和S100A13 mRNA表达上升(P<0.01)。Pearson相关性分析表明选定的标志物与红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、IL-1β、IL-4、CRP、IL-6指标相关。5个核心衰老基因ROC曲线下面积均大于0.8,列线图预测模型中校正曲线的C-index为0.755,模型校准能力较好。结论 FOXO3、MCL1、SIRT3、STAG1和S100A13可作为OA炎性衰老的新型诊断分子标志物和潜在治疗靶点。

GEO数据库联合机器学习策略识别骨关节炎特征性lncRNA分子标志物及实验验证

目的利用GEO(Gene Expression Omnibus)数据库联合机器学习筛选骨关节炎(osteoarthritis,OA)特征性的长链非编码RNA(lncRNA)分子标志物。方法纳入185例OA及76例正常健康人样本,GEO数据库筛选数据集得出差异表达lncRNA,通过随机森林(randomforest,RF)、最小绝对收缩和选择算子(LASSO)逻辑回归、支持向量机递归特征消除(SVM-RFE)3种算法筛选候选的lncRNA模型,绘制受试者操作特征曲线评价模型。收集临床OA患者30例和正常对照15例的外周血,测定免疫炎症指标,RT-PCR定量分析外周血单核细胞lncRNA分子标志物的表达,Pearson分析lncRNA与免疫炎症指标的相关性。结果LASSO得出14个关键标志物,SVM-RFE算法确定6个基因,RF算法确定24个基因。Venn图筛选得出3种算法的重叠基因,包括HOTAIR、H19、MIR155HG和NKILA。受试者工作特征曲线显示这4个lncRNA的曲线下面积均大于0.7。RT-PCR法发现与正常对照组相比,HOTAIR、H19、MIR155HG在OA患者外周血单核细胞中相对表达量升高,NKILA表达量下降(均P<0.01),结果与生物信息学预测结果相一致。Pearson相关性分析表明选定的lncRNA与临床免疫炎症指标相关。结论HOTAIR、H19、MIR155HG和NKILA可作为OA临床诊断分子标志物,且与临床免疫炎症指标相关。

中医药与降低强直性脊柱炎湿热证患者再入院风险相关:一项回顾性队列研究

该研究旨在分析中药对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)湿热证患者再入院风险的影响。对1 295例住院的AS患者进行了电话随访,通过筛查和排除,最终纳入1 044例随访成功的患者。基于倾向评分匹配(PSM)进行回顾性队列研究,使用Cox比例风险模型评估各因素对AS湿热证患者再入院风险的影响,Kaplan-Meier生存曲线用于分析中药干预时间对再入院的影响。结果显示,AS患者湿热证发生率为51.3%。在1∶1 PSM后,385例AS湿热证和385例非湿热证患者纳入分析。湿热证再入院率高于非湿热证患者(P<0.05),中药组AS湿热证患者在入院率方面明显低于非中药组(P=0.01)。Cox比例风险模型显示,中药是一个独立的保护因素,可将再入院风险降低35%(HR=0.35,95%CI[0.26,0.95],P<0.05)。此外,与低暴露亚组(使用中药≤12个月)相比,高暴露亚组(使用中药>12个月)再入院风险大幅降低。结果表明,AS湿热证患者的再入院率高于非湿热证患者,中药是其再入院风险降低的保护性因素,而且中药干预时间越长再入院风险越低。

氯化钴诱导低氧与气体低氧对大鼠原代肺动脉平滑肌细胞增殖作用的比较研究

该研究比较了氯化钴(cobalt chloride,CoCl_(2))诱导低氧与气体低氧对大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖及氧化应激的影响。采用不同剂量(25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L) CoCl_(2)诱导细胞或将细胞置于低氧培养箱中,通过MTT、CCK-8和EdU检测比较CoCl_(2)诱导低氧与气体低氧对大鼠原代PASMCs增殖的影响,并通过Western blot、流式细胞术比较CoCl_(2)诱导低氧与气体低氧对低氧敏感蛋白低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达量和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的影响。结果显示,CoCl_(2)或气体低氧刺激细胞24 h均可增加PASMCs增殖活力、HIF-1α蛋白表达量和ROS含量。气体低氧下PASMCs增殖活力显著高于低(25 mmol/L)、中(200 mmol/L)、高(400 mmol/L)剂量CoCl_(2)组,且HIF-1α蛋白表达、ROS含量显著上调。中剂量CoCl_(2)诱导的PASMCs增殖活力、ROS含量显著高于低、高剂量组;随着CoCl_(2)剂量增加,HIF-1α蛋白表达量增加。结果表明,CoCl_(2)能一定程度诱导低氧,引起细胞内氧化应激,促进大鼠原代PASMCs增殖,并呈一定的剂量、时间依赖性,但其增殖效应不及气体低氧。