GGH基因多态性研究及一个新的错义突变T191G的发现

目的:研究γ-谷氨酰水解酶基因(γ-glutamyl hydrolase,GGH)T16C单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)在急性白血病(acute leukemia,AL)患儿和正常儿童中的频率分布特征,并以期发现新的多态性位点。方法:应用DNA直接测序技术,对90例AL患儿和120例正常儿童的cDNAs进行GGH T16C基因型的筛查。结果:在GGH的第2外显子发现一新的错义突变T191G,导致第64位氨基酸由亮氨酸(Leu)被色氨酸(Trp)替代。首次鉴定了中国儿童GGH T16C多态性,其在AL患儿及正常儿童中的等位基因频率分别为20.0%和17.1%,两组间的等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05),表明与白血病的易感性无相关性。结论:首次确定了国内汉族儿童GGH T16C的等位基因频率,并发现一新的错义突变GGHT191G。

新生儿缺氧缺血性脑病预后影响因素及不良预后的预测模型构建和效能评价

目的观察分析新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)不良预后的预测模型,为协助临床简便、有效、快速识别HIE患儿不良预后的高危群体奠定基础。方法选取2020年5月至2022年4月四川省妇幼保健院新生儿科收治的128例HIE患儿作为建模组人群,2022年5月至2023年2月收治的103例HIE患儿作为验证组人群。收集患儿一般及临床资料,Logistic回归建模,限制性立方样条(RCS)优化,进一步绘制列线图,采用Bootstrap法、决策曲线(DCA)、受试者操作特征(ROC)曲线进行评价。结果128例建模组HIE患儿中,预后不良31例,预后良好97例,分别占24.219%、75.781%。5 min Apgar评分、病情程度、合并持续性肺动脉高压(PPHN)、昏迷、惊厥、脑电异常、早期干预时间窗<6 h、亚低温治疗是HIE患儿预后的影响因素(P<0.05);模型1、模型2的标准度良好,绝对误差依次为0.011、0.017,表明模型校准度良好;模型1、模型2列线图对HIE预后预测的AUC依次为0.870、0.922;DCA提示,任何阈值概率下,采用列线图(模型1、2)预测HIE患儿预后的净收益率均较高,且模型2净收益率大于模型1;验证组HIE患儿预后良好75例,预后不良28例,在验证组人群内,模型2列线图预测HIE患儿预后的AUC为0.914,模型2列线图在验证组、建模组人群中的AUC对比,无显著差异(P>0.05)。结论影响HIE患儿预后不良的风险因素众多,且列线图模型可对其进行有效预测,相关部门可加强预测模型构建和应用,给予高危人群有效处理对策,降低高危因素危害,从而减少不良预后事件。

叶酰多聚谷氨酸合成酶基因一个新的错义突变的发现

目的研究叶酰多聚谷氨酸合成酶(FPGS)基因编码区突变及多态性在中国汉族急性白血病(AL)患儿与健康儿童中的频率分布特征,为探讨FPGS基因多态性与肿瘤化疗个体化用药之间的关系提供理论依据。方法采用PCR-DGGE结合DNA直接测序的方法对91例AL患儿和124例上呼吸道感染儿童(对照组)的FPGS基因第5号外显子的突变及多态性情况进行分析,计算等位基因频率和基因型频率并分析其差异性。结果在对照组儿童FPGS编码区中发现了一个国内外未见报道的错义突变502/490 T>C(L151/101P),分别在FPGS线粒体型和胞浆型中发现了新突变2例和3例,并鉴定了其等位基因频率为0.70%(胞浆型)和0.47%(线粒体型)。这个新的错义突变与儿童AL无明显的相关性。结论首次在中国汉族儿童中发现FPGS外显子5的一个新的错义突变502/490 T>C(L151/101P),其在中国汉族儿童中的等位基因频率为0.70%(胞浆型)和0.47%(线粒体型)。

急性白血病儿童γ-谷氨酰水解酶基因452C／T单核苷酸多态性研究

目的研究γ-谷氨酰水解酶（-γ-glutamylhydrolase，GGH）基因452C／T单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）在急性白血病（acuteleukemia，AL）患儿和正常儿童中的频率及分布特征。方法应用逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳结合DNA直接测序技术，对92例AL患儿和124名正常儿童的cDNAs进行GGH基因第452位点SNP筛查。结果AL组中GGH452TT、CT及CC基因型频率分别为2．2％、13．0％和84．8％；对照组中相应3种基因型频率分别为1．6％、16．9％和81．5％；两组T等位基因频率分别为8．7％和10．1％；两组间的基因型频率及等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05），但中国儿童与日本、非裔-美洲及墨西哥人群的T等位基因频率差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论确定了中国汉族儿童GGH452C／T的等位基因频率，并初步确认GGH452C／T基因多态性存在种’族差异。

叶酰多聚谷氨酸合成酶与甲氨蝶呤敏感性的关系

叶酰多聚谷氨酸合成酶（folypolyglutamatesynthetase，FPGS）作为甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）类抗肿瘤药物细胞内代谢过程中的关键酶，催化形成活性形式的MTX多聚谷氨酸，其异常是MTX耐药的重要原因之一。近年来研究发现，FPGS表达及活性的降低可使细胞内MTX多聚谷氨酸浓度降低，从而导致MTX耐药。FPGS基因多态性在MTX耐药中也起着重要的作用，但其具体机制尚未完全明了。该文就FPGS酶活性及基因多态性与MTX药物敏感性的关系进行综述。