犬瘟热病毒和犬腺病毒2型双重PCR方法的建立及应用

根据犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬腺病毒2型(Canineadenovirus type2,CAV-2)GeneBank登陆的基因序列各设计一对引物,经试验条件优化,建立了检测CAV-2的PCR方法和CDV的RT-PCR方法,CAV-2可扩增1108bp片段、CDV可扩增560bp的目的片段,特异性试验表明建立的方法只能特异扩增CAV-2和CDV,不能扩增犬细小病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、犬钩端螺旋体和犬黄胆出血群、狂犬病病毒。敏感性试验表明,所建立的双重PCR方法可以扩增4.63ng总核酸量。在上述试验基础上继续优化条件建立了能同时检测CAV-2和CDV两种病毒的双重PCR检测方法,并用该方法检测来自辽宁、吉林等15家动物医院134份鼻液和眼眵样品,与商品化试纸条检测结果相比,本方法更加敏感和方便。研究结果表明,本实验建立的方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热病毒和犬腺病毒2型的快速检测和鉴别诊断。

沈阳市及周边地区规模化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫效果及病原调查

为了解沈阳及周边地区猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒感染情况和疫苗免疫效果，应用已建立的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒RT—PCR．检测方法在2011年1月～2013年6月期间，对来自辽宁省沈阳、大连、鞍山等16个市县地区的猪场和屠宰场的送检样品进行检测。结果发现，2011年辽宁省猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的阳性率为9．28％，2012年为27．3％，2013年上半年为0．6％，3年平均阳性率为12．1％；同时选择沈阳市5家规模化养猪场3年采集血清902份进行猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫效果的评价，结果显示，2011年5个猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗免疫抗体合格率为97．3％，2012年为98．8％，2013年上半年为94．8％，3年平均阳性率为97．5％；另外，对沈阳市某猪场免疫母猪所产仔猪的母源抗体进行为期7周的监测，发现，仔猪猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒母源抗体在7日龄时达到最大值，直到21日龄维持在较高水平，之后呈现下降趋势。

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