以玉米芯木聚糖为碳源的草菇木聚糖酶的发酵条件

在玉米芯木聚糖的碱法提取中,玉米芯木聚糖在80℃抽提120min的抽提率较高,还原糖质量分数较低,同时,抽提液的颜色较浅,明显优于121℃抽提30min.以80℃抽提的木聚糖为诱导,草菇产生的木聚糖酶的酶活比121℃抽提的木聚糖的酶活高.以80℃抽提的木聚糖为碳源,通过正交试验,设计出适合草菇生长和产生木聚糖酶的发酵条件.培养基组成为:木聚糖15g/L,(NH4)2SO42.5g/L,Tween 803g/L,酵母膏1g/L,KH2PO41g/L,MgSO4·7H2O0.6g/L,微量元素0.0005g/L.pH7.0,40℃下150r/min培养4d,此时酶活达32.4IU/mL.

酯化红曲的筛选和酯化酶酶学性质研究

从洋河大曲中筛选到1株具有较高酯化活力的红曲霉,经26S RNA分子鉴定为紫红曲霉(Monascus pur-pureus),命名为YHM-6。YHM-6菌株能分别耐受8‰的乳酸和10%vol的酒精。以YHM-6为出发菌株,生产得到酯化红曲粗酶制剂催化己酸合成己酸乙酯具有很强的专一性和选择性。结果表明,其最适催化温度为35℃,最适催化pH值为3.5,最适催化酒精浓度为28%vol,最适己酸浓度为1%,其适合于浓香型白酒和黄水酯化液的生产。

浓香型白酒堆积发酵酒醅挥发性成分分析

采用索氏提取法结合气质联用技术,对浓香型白酒堆积发酵酒醅的微量成分进行初步定性分析研究,共检出82种化合物,其中酯类化合物45种、酸类12种,占挥发性成分总数的69.51%,它们是浓香型白酒主要的香气成分。此外,愈创木酚类(5种)、呋喃类(3种)、芳香族类(8种)以及吡嗪类化合物(2种)也为浓香型白酒的复合香气作出了重要贡献。实验结果表明,浓香型白酒采用堆积发酵工艺,有利于增加白酒中的香味成分,使香气更加芳香浓郁、丰满协调。

木聚糖酶

木聚糖酶(EC3.2.1.8)是降解木聚糖最关键的水解酶。木聚糖酶由功能或非功能结构域和连接区组成。木聚糖酶通过酸碱和亲核催化来水解β-1,4糖苷键。由于木聚糖酶的工业应用价值,人们从不同生物筛选了大量木聚糖酶基因。

中高温大曲中的挥发性成分分析

采用索氏提取法对浓香型中高温大曲中的挥发性成分进行提取,并应用气质联用技术对提取物进行定性分析研究。结果表明,从大曲中共检测出主要成分39种,其中含氮化合物8种、醇类化合物7种、有机酸类化合物10种、酚类化合物4种、酯类化合物2种、含氧杂环类化合物3种、烷烃类化合物2种、芳香族化合物1种、酮类化合物2种。其中,四甲基吡嗪、愈创木酚、4-乙烯基愈创木酚和苯乙醇对大曲的香气有重要贡献。

生香酵母Yeast-1产香物质的GC-MS分析

从洋河大曲中成功筛选到一株生香酵母 Yeast-1。采用 GC-MS 联用技术，对该株酵母葡萄糖发酵产生的香气成分进行定性分析。结果表明：发酵产物中的风味组分多达 27 种，包含醇类（4 种）、酮类（2 种）、醛类（2 种）、有机酸类（4 种）、酯类（4 种）等典型的香味成分；此外还有一些特有的生理活性组分，如 3 种吡咯并吡嗪酮类、4 种哌嗪二酮类，这些发酵代谢产物也具有特殊的香气。所有风味组分独特优雅的香气将会赋予白酒独特的风味香型。

酯化红曲M-6培养条件的优化

以酯化酶活力为指标,对酯化红曲YHM-6麸曲培养基和培养条件进行了优化,得到最佳培养条件为:以麸皮作为培养基质,添加葡萄糖0.5%,蛋白胨1.5%,乳酸4‰,乙醇5%vol,大豆油1%,水50%,KH2PO41‰,MgSO4·7H2O 1‰;培养温度35℃,培养时间7 d。

浓香型白酒双轮底酒醅香气成分分析

采用索氏提取法提取浓香型白酒双轮底酒醅的香气成分,并应用气相色谱-质谱法(GC-MS)对其组分进行分离和定性分析,共鉴定出19种主要香味物质,其中10种属于酯类化合物,占总数的52.6%。这赋予了浓香型白酒浓郁的酯香气。

草菇木聚糖酶SDS-PAGE后的复性及活性染色

草菇木聚糖酶经SDS PAGE后在胶中能够原位复性,通过银染和刚果红活性染色比较,可确定该酶在胶中的位置.草菇木聚糖酶是单亚基蛋白,相对分子质量为24500.

草菇木聚糖酶的纯化提取和酶学性质

草菇产胞外木聚糖酶通过各级浓缩和纯化,获得接近电泳纯蛋白.通过SDS PAGE测得相对分子质量为24500.木聚糖酶为糖基化修饰的蛋白,含有质量分数20.24%的糖.O 糖基化能增加木聚糖酶的活性,O 和N 糖基化都能提高木聚糖酶的稳定性.5min反应,草菇木聚糖酶在60℃和pH值5.65时活性最高.在此条件下,该酶的Km值为3.87mg/mL,Vmax为1250IU/mg.纯酶的稳定pH值为6.54,57℃时半衰期为1h.

生香酵母Yeast-1液态发酵培养条件优化

以酵母菌体个数为主要参考指标,研究不同碳源、氮源、pH值、温度对培养酵母菌体数的影响。在单因素实验基础上采用响应面Box-Behnken试验设计,建立4因素的二次多项式回归方程模型。优化试验结果显示,酵母数最佳的参数是葡萄糖浓度10.52%、蛋白胨浓度5.06%、KH2PO41‰、MgSO4.7H2O 1‰、pH 6.28、温度28.76℃,在此条件下菌体数量达7.71×108个。经验证试验,实验值与预测值基本相符。

产酯酵母的筛选及其发酵特性研究

从大曲中筛选到8株产酯酵母,选酶活最高菌株进行26S rDNA鉴定,确定其为异常毕赤酵母。试验结果表明,该酵母麸曲的酯化力可达到19.36 mg/100 mL。该菌株麸曲最佳培养时间为6 d;液体培养最高耐受温度为43℃;最低耐受pH值为3.5;最高耐受酒精度为18%vol;最适生长温度为27℃;利用葡萄糖产酒精能力较低。

分子生物学技术在担子菌中的研究进展

担子菌有较高的经济价值和研究价值,近年来,随着分子生物学在担子菌中的深入研究,担子菌的品质、产量、栽培效率和利用价值得到进一步提高。本文从分子标记技术和转化系统两个方面重点阐述讨论担子菌在分子生物技术的研究进展及应用前景。

草菇半纤维素酶系统的诱导、分布及初步定性

以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素或木聚糖为碳源培养草菇 (Volvariellavolvacea) ,对所产生的半纤维素酶进行初步研究发现 ,半纤维素酶系主要是由木聚糖诱导 .半纤维素酶中的木聚糖酶分布在胞外 ,木糖糖苷酶分布在胞内 ,阿拉伯糖苷酶胞内胞外都有分布 .木聚糖酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应 pH为 5 .8,在pH 5 .4～ 7.0时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 5℃ .木糖糖苷酶的最适反应温度为 5 5℃ ,最适反应 pH为 6 .6 ,在 pH 6 .6～ 7.4时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 2℃ .阿拉伯糖苷酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应pH为 5 .0 ,在 pH 4 .6～ 6 .2时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度为 6 0℃ .

极端耐辐射球菌sbcD基因(dr1921)功能分析

在真核生物中,Mre11-Rad50-Nbs1(MRN)复合体处于DNA修复和细胞周期调控的关键位置.当DNA双链断裂损伤诱导后,MRN复合体可快速与损伤部位结合,参与起始的DNA末端的处理.在MRN复合体中,任何一个亚基的基因突变都会引起生物体对DNA损伤超敏感、基因组不稳定、端粒缩短和减数分裂异常.MR蛋白在进化上高度保守.Mre11和Rad50在细菌中的直系同源物分别是SbcD和SbcC.极端抗辐射的耐辐射球菌能修复大量的DNA双链断裂.其SbcD和SbcC蛋白分别由Dr1921和Dr1922基因编码.本研究应用定点反向插入突变的技术,构建了SbcD基因突变株.发现突变株对电离辐射、紫外线、过氧化氢和丝裂霉素C等DNA损伤诱变试剂敏感.同时还发现,drSbcD蛋白,无论是在细胞正常生长状态下,还是在DNA修复过程中,特别是对6000Gy电离辐射所产生的DNA双链断裂的修复有重要的作用.综上所述,drSbcD蛋白在DNA双链断裂修复的过程中扮演重要的角色.