基于经验反馈模型的模具企业知识获取框架

针对模具企业知识集成过程中出现的经验知识提取困难等问题,提出了基于经验反馈模型的知识获取框架。研究了面向模具生命周期的知识获取方法,实现了基于本体的知识提取和表达,采用概念图对经验进行可视化建模,并使用Web本体语言(Web Ontology Language,OWL)对知识进行统一的描述与存储。阐述了该框架的结构与运行原理,并在此基础上实现了基于面向服务架构的模具企业集成平台知识获取服务。该框架满足模具企业设计制造经验性强等特点,采用符合业务流程的知识获取过程和可视化经验表达方法,降低了知识获取的难度和成本。

基于SOA的数字化模具设计制造集成平台研究

面向模具企业信息化,提出了基于面向服务架构(Service-oriented architecture,SOA)的数字化模具设计制造集成平台,研究了基于SOA企业应用集成的若干关键技术,实现了平台原型系统。模具企业内部、客户及供应商间的应用通过平台所提供的服务以松散耦合的方式集成在一起,实现了数据、流程与知识三方面的共享与协作。该平台的应用为解决模具企业内部和企业间的设计、制造集成问题提供新的方案。

面向模具企业数据集成的事件驱动ESB框架研究

分析了模具企业信息共享与数据集成的需求与特点,结合面向服务思想和事件驱动架构,提出了一种事件驱动型企业服务总线(enterprise service bus,ESB)框架;阐述了该框架的运行原理及实现技术,并在此框架基础上实现了基于SOA的模具企业设计制造集成平台数据集成服务。该框架满足模具企业事件驱动的业务特征,并采用总线式的集成模式和异步消息的方式,松散耦合地集成各种应用系统及数据,降低了应用集成的难度和成本,为中小型制造企业解决数据集成问题提供了新的方案。

EZH2 shRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌A2780细胞系的稳定表达

目的采用基因工程技术,构建EZH2 shRNA的真核表达载体,获得稳定表达干扰质粒的卵巢癌A2780细胞系。方法合成特异性干扰EZH2的shRNA片段并定向克隆插入Supersilencing shRNA质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo,获得表达载体pGPU6/GFP/Neo-shEZH2。脂质体介导重组质粒转染A2780细胞,经G418加压筛选获得稳定转染细胞株,Real time RT-PCR和Western blot检测转染后细胞系EZH2的表达。结果测序结果证实重组载体构建成功,稳定转染shEZH2的A2780细胞EZH2的mRNA和蛋白水平下降(90.20±1.66)%和(73.80±5.49)%,P<0.01,差异有统计学意义。结论成功构建EZH2 shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的A2780细胞系,为进一步研究以EZH2为靶点的卵巢癌治疗奠定实验基础。

基于本体的模具企业知识集成系统研究

针对模具企业的特点及其知识共享与重用的需求,提出了基于本体的知识集成系统,研究了基于本体的知识表达、规则推理和异构环境知识获取与重用等关键技术,实现了系统原型。该系统运用本体理论和方法对企业知识进行统一的描述与储存,采用面向服务架构实现了与知识源系统松散耦合的连接,并为企业用户和应用程序提供知识重用服务。该系统的研究与应用为模具全生命周期的知识管理提供了新的思路。

潜伏活性的人可溶性TNFⅠ型受体融合蛋白真核表达载体的构建及表达

目的:采用基因工程技术,将转化生长因子β前体相关蛋白(LAP)通过基质金属蛋白酶(MMP)水解部位与人可溶性TNFⅠ型受体(hsTNFRⅠ)连接,构建pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ融合蛋白真核表达载体,获得LAP-MMP-hsTNFRⅠ融合蛋白。方法:将编码MMP水解部位氨基酸的正反义DNA序列退火形成互补双链后定向克隆插入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到pcDNA3.1/MMP重组体;将TGF-β1的LAP段和hsTNFRⅠ与MMP水解部位连接,获得pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ真核表达载体。测序鉴定后,脂质体介导重组质粒转染COS-7细胞,通过RT-PCR检测融合基因的表达。结果:酶切及测序结果证实pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ重组载体构建成功,转染后RT-PCR结果表明重组质粒在COS-7细胞中得到有效表达。结论:成功构建了融合蛋白真核表达载体pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ,并获得融合基因的瞬时表达,为进一步研究融合蛋白在子宫内膜异位症中的靶向治疗奠定了实验基础。

CAD数据交换与互操作性的研究

针对目前三维CAD数据的交换状况,分析了基于标准模型和专用接口等两种主要CAD数据交换技术。以STEP标准为例,阐述了基于标准模型的CAD交换技术的架构和实际交换过程中遇到的数据丢失问题。专用接口是点对点的交换,是最原始的解决CAD数据交换的方法,涉及到各个CAD软件的商业利益,在CAD软件众多的情况下,使得CAD数据交换异常复杂。这两种CAD数据交换方法存在一个重大缺陷,即产生的都是"哑"模型,在非原CAD系统中无法对其进行编辑,极大地阻碍了CAD数据的交换。同步建模技术采用概念设计的理念和非历史特征的建模方法,不仅加速了模型设计,也较好地解决了CAD数据的交换问题。

甲拌磷人工抗原的合成及多克隆抗体制备

以五硫化二磷与无水乙醇为原料，首先制得硫化物中间体，再添加甲醛和2-巯基乙醇进行反应，得到甲拌磷半抗原。在DMAP作为催化剂的条件下，甲拌磷半抗原与丁二酸酐反应，得到甲拌磷半抗原的衍生物。通过碳二亚胺法将甲拌磷半抗原衍生物分别与牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白（OVA）共价偶联，得到免疫抗原和包被抗原。用免疫抗原免疫兔子获得了高效价的多克隆抗体，抗血清效价达到了1：50000。通过试验确立甲拌磷标准曲线，检测限为6．383μg／L，检测线性范围为6．383-10000μg／L。

白藜芦醇对卵泡颗粒细胞线粒体的调节作用及人工辅助生殖效果的影响

目的探讨口服白藜芦醇对卵泡颗粒细胞线粒体功能及人工辅助生殖技术(ART)效果的影响。方法研究入组受试对象109例,其中,对照组59例,白藜芦醇组50例。分析其颗粒细胞氧化应激水平和线粒体功能,检测胚胎发育和妊娠结局相关指标及不良反应。结果白藜芦醇使颗粒细胞的还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化活性下降了28.57%(P<0.05),同时也降低了丙二醛(MDA)水平(0.653±0.084)nmol/mL vs.(0.382±0.052)nmol/mL,(P<0.05)。白藜芦醇增加了线粒体DNA(mtDNA)拷贝数(4.62±0.24)×105 vs.(5.77±0.38)×105,(P<0.05)和ATP生成(2.516±0.160)pmol vs.(4.484±0.180)pmol,(P<0.05)。白藜芦醇组较之对照组其卵成熟率(87.75%vs.94.15%,P<0.05)、受精率(86.69%vs.91.49%,P<0.05)和优质胚胎率(44.30%vs.51.22%,P<0.05)均显著提高,且尚未发现有明显的不良反应。结论白藜芦醇可能对提高ART的成功率具有一定的辅助作用。

基于XML的模具CAD功能快速定制框架

分析了CAD软件提供的二次开发功能以及模具企业在此方面的需求,针对目前模具CAD功能二次开发存在的低效率问题,提出了一种快速实现模具CAD功能定制的框架。该框架采用知识管理、XML和数据库技术,结合业务流程领域的流程描述思想,实现了松散耦合的CAD功能提取和描述,提出了一种功能流程描述技术,建立了基于Xerces工具的XML功能流程解释引擎。结合某企业具体需求,将上述框架应用于注塑模具二次功能开发,为模具企业开发定制功能模块提供了新的方案。

基于SOA的业务流程管理在模具协同设计任务管理中的应用

为了实现模具设计任务的自动管理,结合模具设计任务的特点,提出了基于活动树的任务分解模型。该模型能最大程度地避免任务间冲突的发生,并且能够保证模具设计人员之间模型信息的一致。在此模型的基础上,结合业务流程管理技术开发出了一套模具协同设计任务管理原型系统。该系统提高了模具协同设计的自动化程度,实现了模具设计任务的自动管理。

microRNA let-7e逆转人卵巢癌细胞顺铂耐药及其作用机制

目的:研究人类microRNA let-7e(hsa-let-7e)在人卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达及其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测let-7e在卵巢癌亲本细胞株A2780及耐顺铂卵巢癌细胞A2780/CP中的表达;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测A2780细胞和A2780/CP细胞中果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)mRNA和蛋白的表达。将let-7e模拟物(mimics)及阴性对照(negative control,NC)转染A2780/CP细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测EZH2 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测细胞的半数抑制浓度(IC50),台盼蓝染色实验检测经顺铂作用不同时间后的细胞存活率。结果:与A2780细胞比较A2780/CP细胞中let-7e呈低表达、EZH2mRNA和蛋白相对表达水平显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。A2780/CP细胞转染let-7e mimics后,EZH2 mRNA和蛋白的相对表达水平较阴性对照组明显下降(P<0.05),细胞对顺铂的敏感性显著增强,其半数抑制浓度(IC50值)与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。顺铂作用于转染let-7e mimics的A2780/CP细胞后,细胞的存活率较阴性对照组明显降低(P<0.05)。结论:let-7e在卵巢癌耐药细胞A2780/CP中异常低表达,上调其表达可部分逆转细胞耐药性。let-7e可能通过作用于靶蛋白EZH2参与卵巢癌细胞顺铂耐药的发生和发展。

抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性影响的研究

目的:研究抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性的影响。方法:用浓度递增法建立卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;Stem-loop real-time PCR技术检测A2780/Taxol及亲本细胞A2780中hsa-miR-27a表达水平;利用脂质体Lipofectamine2000将化学合成的miR-27a抑制物及阴性对照(Negative Control,NC)转染A2780/Taxol细胞;分别用Real-time PCR和蛋白印迹法技术检测MDR1mRNA和P-glyco-protein(P-gp)蛋白表达;MTT检测A2780/Taxol对紫杉醇敏感性的变化;流式细胞术检测细胞内P-gp荧光底物罗丹明123(Rh-123)的荧光强度。结果:(1)成功建立了卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;(2)miR-27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比,表达增高2.2倍。(3)P-gp蛋白在A2780/Taxol细胞中高表达,在A2780细胞中未检测出其表达;(4)转染miR-27a抑制物后,A2780/Taxol细胞的MDR1mRNA和P-gp表达下降,与转染NC组相比,P-gp表达降低36%;对紫杉醇的敏感性增加,IC50为0.53μmol/L,与转染NC组IC506.8μmol/L相比,有明显差异;(5)流式细胞仪结果显示,细胞内Rh-123荧光强度在转染抑制物的A2780/Taxol细胞为5.10±0.35,与A2780/Taxol细胞的2.95±0.39和转染NC的A2780/Taxol细胞的3.30±0.45相比,差异均有统计学意义。结论:hsa-miR-27a在卵巢癌耐紫杉醇A2780/Taxol细胞中高表达,可能通过间接调节P-gp的表达和功能,参与耐药。抑制miR-27a表达后,可以增加A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性,部分逆转耐药。

星形胶质细胞生物学功能研究进展

星形胶质细胞广泛分布于中枢神经的灰质与白质中,并作为在中枢神经系统中数目占绝对优势的一类大胶质细胞,近二十年来,学者们对星形胶质细胞的研究可谓突飞猛进;星形胶质细胞新的功能和作用逐渐被发现并证实;回顾了星形胶质细胞的一般生物学功能及其生物学功能研究的近期进展,论述了其与几种神经系统疾病的关系及其在中枢神经系统损伤与衰老时形态功能的变化。

最小二乘参数估计的递推算法及其C语言实现

最小二乘参数估计的递推算法是系统参数辨识中最基本、最成熟的方法。文章首先介绍了最小二乘法的递推算法原理和本识别系统的框架流程图,然后针对文章的算法分别阐述了服从N(0,1)正态分布自相关随机噪声v(k)的产生方法。文章着重介绍了利用C语言编程对一个简单系统的参数辨识实现最小二乘参数估计的递推算法,详细说明了本系统各个环节的C语言实现,并通过matlab仿真对数据进行了详细的分析。从仿真实验结果可以看出,试验数据符合试验要求,系统的参数辨识实现最小二乘参数估计的递推算法的效果令人满意。

藏药色吉美多乙酸乙酯部位化学成分研究

目的研究藏药色吉美多Herpetospermum caudigerum Wall种子的化学成分。方法通过多种柱层析和重结晶的方法分离纯化色吉美多乙酸乙酯部位,利用理化性质,TLC和核磁共振氢谱等分析测试手段鉴定化合物结构。结果从色吉美多乙酸乙酯部位分离并鉴定了5个化合物,分别为波棱素(I),葫芦素R(II),波棱醛(III),去氢双松伯醇(IV),齐墩果酸(V)。结论化合物II、V为首次从该植物中分离得到。

Egr1信号途径参与NDRG1表达调节的机制研究

目的:研究人宫颈癌细胞中早期生长反应基因1(Egr1)信号途径参与N-myc下游调节基因1(NDRG1)表达调节的机制。方法:以人宫颈癌细胞株SiHa为研究对象,利用siRNA干扰技术使Egr1基因沉默,用RT-PCR和W estern blot检测转染前后Egr1表达的变化。通过RT-PCR和W estern blot检测细胞在低氧条件下,以及转染siRNA-Egr1后在低氧或低氧模拟物(DFX)条件下,Egr1与NDRG1表达的变化。结果:siRNA能有效地抑制Egr1基因表达(P<0.001)。低氧条件下,Egr1、NDRG1的蛋白水平均明显升高(P<0.001)。转染siRNA-Egr1 48h后,细胞在低氧条件下作用1h,Egr1 mRNA表达显著下降(P<0.05)。细胞转染siRNA-Egr1 48h后,在低氧及DFX条件下作用24h,结果显示DFX使NDRG1 mRNA的表达显著高于低氧条件(P<0.05)。同时也显示siRNA-Egr1能够使NDRG1 mRNA水平明显减少(P<0.05)。结论:体内环境因素如低氧、DFX等上调NDRG1基因的表达,通过Egr1信号途径参与NDRG1在宫颈癌细胞中表达的调节。

EZH2基因与卵巢癌细胞系A2780化疗敏感性的关系

目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog2,EZH2)基因与卵巢癌细胞A2780顺铂敏感性的关系。方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞A2780-shEZH2,实时定量PCR(Real time RT-PCR)法和免疫印记法检测转染株的EZH2基因表达,MTT法检测细胞对顺铂的耐药性,流式细胞学检测细胞凋亡。结果:以未转染组A2780细胞EZH2的表达水平为100%,EZH2-shRNA转染组A2780-shEZH2细胞EZH2的mRNA及蛋白水平分别下降90.20±1.66%和76.54±8.92%,与未转染组比较差异均有高度统计学意义(P<0.01)。EZH2-shRNA转染组A2780-shEZH2细胞对顺铂的IC50与未转染组A2780细胞IC50值和空质粒转染组A2780-shVector细胞IC50值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。EZH2-shEZH2转染组的细胞凋亡率与空质粒转染组凋亡率及未转染细胞凋亡率相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EZH2基因与卵巢癌原发性顺铂耐药无关。

Tunelab pro中钢琴音准曲线对调律的指导作用

钢琴音准曲线是钢琴固有物理属性与调律师个人风格的集中体现。传统调律是以调律师“艺术的耳朵”为主导，具有主观性。而使用 Tunelab pro调律是以软件测得的音准平均曲线为主导，具有客观性，对调律结果起着指导作用。

Dppc^+PF_6^--Pd(dba)_2催化的水相中的Suzuki偶联反应

文章报道了二茂钴阳离子双膦配体dppc+PF6-与Pd(dba)2组成的催化剂在纯水中催化Suzuki反应的活性,以三乙胺为碱,该催化剂体系对于不同的溴代底物与苯基硼酸在120℃反应3h,能以中等到较高的产率得到相应的偶联产物。该催化体系既避免了使用毒性、易挥发和易燃的有机溶剂,并且形成的离子型催化剂由于极性比较大,不溶于乙醚或正己烷等弱极性溶剂,很容易实现催化剂与底物的分离。