血清中睾酮测定的能力验证研究

NIFDC-PT-319血清中睾酮测定能力验证计划是国家药品监督管理局项目,依据ISO/IEC 17043:2010《合格评定能力验证的通用要求》运作,该计划由中国食品药品检定研究院负责组织及实施。

胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ测定试剂盒行业标准的建立和验证

胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)是胃蛋白酶的前体,被认为是胃黏膜损伤的重要生物标志物,主要包括两种同工酶,PGI和PGII(也称为PGA和PGC)[1]。PGI只在胃底和胃体的腺黏膜中产生,PGII由整个胃和十二指肠产生。以往的研究表明,PGI水平和(或)PGI/PGII比值反映了胃黏膜的形态和功能状态[2],可用于预测萎缩性胃炎[3],此外,已有研究证实PG的表达与胃癌的发生有很好的相关性[4-6]。与内镜检查相比,测量血清PGI和PGII水平提供了一种无创、直接的大规模筛查方法,可用于胃癌的早期筛查。

尿酸测定试剂盒质量分析研究

尿酸是客观反映人体嘌呤及肾脏功能的常规临床检验指标,也是肾小管中重要的运转介导物质[1-2]。近来,该项指标用于冠状动脉粥样硬化检查的研究较多[3],有研究显示,当尿酸水平上升为正常水平的1.5倍时,冠心病的发病率可提升[4]。部分临床研究表明,高尿酸所导致的高尿酸血症可以导致胰岛素抵抗,而胰岛素抵抗是影响心衰临床预后的重要指标,该指标的升高可对心衰预后产生不良影响[5]。高尿酸血症本身也可导致严重的痛风症状[6],而痛风的临床症状主要表现为痛风石的产生、严重的关节炎症、畸形、疼痛甚至死亡,痛风石中主要成分为无机盐和尿酸[7]。

脊髓小脑共济失调Ⅲ型atxn3基因变异检测国家参考品的研制

目的 研制脊髓小脑共济失调Ⅲ型atxn3基因变异检测国家参考品。方法 通过对脊髓小脑共济失调Ⅲ型atxn3基因变异外周血进行EB病毒(EBV)转染、细胞扩繁培养,完成永生化细胞的建系工作。提取atxn3基因的脱氧核糖核酸(DNA)并稀释浓度至50 ng/μL后分装,经5个协作标定单位采用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)、PCR-毛细管电泳法对国家参考品的阳性符合率、阴性符合率、最低检出限、冻融稳定性和均匀性指标进行检测。结果 成功研制包含4个阳性样本和6个阴性样本的脊髓小脑共济失调Ⅲ型atxn3基因变异检测国家参考品。全部阳性样本及4种野生型样本的碱基排列与样本的CAG重复数一致且核酸质量合格,5家协作标定实验室的实验结果与参考品标示值一致。该参考品阳性符合率为100%、阴性符合率为100%、最低检出限阳性结果均检出、最低检出限阴性结果均未检出、冻融稳定性相关系数为0.999 9、均一性相关系数为1.000 0。结论 脊髓小脑共济失调Ⅲ型atxn3基因变异检测国家参考品的全部性能指标均符合规定,适用于atxn3基因变异体外诊断试剂盒的性能评价及质量控制。

EPS混凝土的冲击力学行为及本构模型

采用大直径分离式霍普金森压杆(SHPB)试验装置研究了多种EPS体积掺量的EPS混凝土在不同应变率下的力学行为。分析了平均应变率以及EPS体积掺量对EPS混凝土的冲击力学性能的影响。采用朱-王-唐(ZWT)模型,在试验研究的基础上,建立了EPS混凝土非线性粘弹性本构模型。结果表明:在高应变率条件下,EPS混凝土的动态抗压强度与极限应变随平均应变率的提高近似线性增长,呈现出显著的应变率相关性。随着EPS体积掺量的增加,混凝土的动态抗压强度和弹性模量降低,变形能力得到改善。本构模型提供的理论曲线与试验曲线比较接近,ZWT模型可以较为准确地描述EPS混凝土的高应变率力学行为。

电子输尿管硬镜的过氧化氢低温等离子体灭菌效果研究

电子输尿管硬镜与图像处理系统配合使用,可用于输尿管疾病的检查、诊断和治疗。此类医疗器械具有安全、术后并发症少、缩短手术及住院时间等优点[1]。由于电子输尿管硬镜预期使用过程中会接触人体内部组织,因此使用前必须进行灭菌达到无菌状态。医院消毒供应中心(central sterile supply department,CSSD)常用的灭菌方式包括高压蒸汽灭菌法、过氧化氢低温等离子体灭菌法、甲醛灭菌法等[2-3]。电子输尿管硬镜通常由航空插头、光缆接口、镜管三部分组成,其中部分材料不耐受高温(温度不能高于60℃),因此只能选择低温灭菌方式。常用低温灭菌方式包括环氧乙烷灭菌、过氧化氢低温等离子体灭菌和碱性戊二醛浸泡灭菌等[4-5],其中过氧化氢低温等离子体灭菌法由于灭菌周期短、低温、不留消毒剂残余、安装方便等优点被广泛应用于内窥镜等可重复使用医疗器械的灭菌[6-7]。对电子输尿管硬镜的过氧化氢低温等离子体灭菌效果进行研究能为临床使用后CSSD等消毒应用提供指导。

聚苯乙烯混凝土的冲击压缩性能实验研究

采用100 mm分离式霍普金森压杆(SHPB)实验装置研究了多种聚苯乙烯(EPS)体积掺量的EPS混凝土在不同应变率下的冲击压缩力学性能。分析了应变率效应以及EPS体积掺量对抗压强度及变形的影响。结果表明:EPS混凝土材料呈现出显著的应变率相关性。随着EPS体积掺量的增加,EPS混凝土的动态抗压强度降低,变形能力得到改善。

我国免疫细胞治疗临床研究和应用的现状及管理对策

免疫细胞治疗又称细胞免疫治疗或细胞过继免疫治疗,近年来发展迅速,被誉为继手术、化疗、放疗后第四种最有前景的肿瘤治疗方法,其临床研究在国外非常活跃,某些种类的免疫细胞治疗也已经获得临床应用。但我国对免疫细胞治疗的管理尚不明晰,对我国免疫细胞治疗的发展非常不利,甚至给患者带来安全隐患。中国医药生物技术协会会同所属生物技术临床应用专业委员会首次将我国免疫细胞治疗调研结果公布,并在参考国际管理经验基础上对我国相关部门对免疫细胞治疗的管理提出对策,以期起到抛砖引玉的作用,为科学规范此项治疗建言献策。

流式细胞术检测试剂质量控制要点分析

目的:对流式细胞术检测试剂的性能指标和实验方法的质量控制要点进行分析梳理,旨在促进该类试剂质量评价标准的提高,规范实验操作。方法:对流式细胞仪用单克隆抗体试剂检测中关键性能指标的质量控制要点进行剖析,并结合流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群操作要点进行探讨,提出相关建议。结果与结论:准确度、稀释线性、精密度、染色稳定性和试剂稳定性是流式细胞仪用单克隆抗体试剂检测的关键性能指标,对于试剂的质量至关重要;应设立科学有效的产品性能指标、选择合理的实验方法来确保或提高流式试剂的质量标准,从而满足临床和监管的需要。

人类白细胞抗原B5801/5701/1502核酸检测国家参考品的建立

目的建立人类白细胞抗原B5801/5701/1502核酸检测国家参考品。方法采集HLAB5801/5701/1502阳性和阴性志愿者的新鲜外周血,经EB病毒转化,培养建立永生化细胞系。细胞扩增培养,提取基因组DNA,制备成国家参考品并经高通量测序验证。4家协作标定单位采用荧光PCR法、高通量测序(NGS)、基因测序分型(SBT测序法)对国家参考品进行定值,并进行国家参考品的复溶(在-20℃and 20~25℃之间反复冻融3次)稳定性和均匀性研究。结果 HLA-B5801/5701/1502核酸检测国家参考品成功制备,包含5例HLA-B5801阳性、3例HLA-B5701阳性、3例HLA-B1502阳性和9例阴性样本。该参考品定值准确,均匀性结果一致,参考品复溶3次后仍然稳定。结论人类白细胞抗原B5801/5701/1502核酸检测国家参考品的各项指标均符合要求,可用于HLA-B5801核酸检测试剂盒、HLA-B5701核酸检测试剂盒、HLA-B1502核酸检测试剂盒的性能评价。

人巨细胞病毒IgG抗体检测试剂盒国家监督抽验质量评价

人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus,CMV）,属疱疹病毒科,乙组疱疹亚科,分子量为150×10~6 D,是直径为200 nm的线状双链DNA病毒,人是其唯一的宿主。巨细胞病毒的主要感染途径是与被感染病人接触,包括接触被感染病人的唾液、生殖器分泌物、尿液和乳汁,同时也可通过胎盘传播或发生医源性传染.

人淋巴细胞国家参考品的协作标定

根据卫生行业标准WS/T 360-2011《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》[1]以及业内共识,通常使用白细胞分化抗原CD45/CD4/CD8/CD3/CD19/CD16和(或)CD56单一检测试剂或组合亚群检测试剂(流式细胞法),通过流式细胞术检测外周血或骨髓细胞表面的白细胞分化抗原(CD)表达,来分析不同亚群淋巴细胞的绝对计数和百分比[2-4]。

人淋巴细胞国家参考品的研制

目的制备人淋巴细胞国家参考品,用于人T/B/NK淋巴细胞亚群检测试剂的准确性评价。方法收集健康志愿者的新鲜外周血白细胞,采用人淋巴细胞分离液无菌分离得到外周血单个核细胞(PBMCs)。将PBMCs均匀重悬于细胞固定液,于2~8℃静置过夜。次日离心去除细胞固定液,加入适量冻干保护液重悬细胞。每支西林瓶按1 ml进行分装,分装后的细胞进行冻干,制备成人淋巴细胞国家参考品候选品。同时对候选品的分装均匀性、瓶间均匀性、基质效应和稳定性进行评价。结果成功研制出冻干型人淋巴细胞国家参考品,其均匀性和稳定性良好且无基质效应。结论人淋巴细胞国家参考品候选品各项指标均符合要求,可用于人T/B/NK淋巴细胞亚群检测试剂(流式细胞法)的准确性评价。

CGM灌浆料在抢修机场道面中的应用

由于飞机起落冲击荷载的反复作用,机场混凝土道面板易产生断裂破损,对飞行训练和战斗保障产生巨大威胁。介绍了应用于机场混凝土道面补修加固技术中的CGM高强无收缩灌浆料的配置、性能及施工注意事项,探讨了它在抢修施工应用中的新老界面粘结问题。

人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的建立

目的建立人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品。方法采集HLA-B27阳性和阴性志愿者的新鲜外周血,经EB病毒转化,培养建立永生化细胞系。提取细胞基因组DNA,制备成国家参考品并经高通量测序验证。用4家协作标定单位的HLA-B27核酸检测试剂,采用荧光PCR法、PCR-SSP法、SBT测序法对国家参考品进行定值,并进行国家参考品的复溶(在-20℃和25℃之间反复冻融3次)稳定性和均匀性研究。结果成功制备HLA-B27国家参考品,包含3例HLA-B27阳性DNA样本和7例HLA-B27阴性DNA样本。经荧光PCR法、PCR-SSP法、SBT测序法协作标定,参考品定值准确。参考品均匀性结果一致,参考品复溶3次后仍然稳定。结论人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的各项指标均符合要求,可用于人类白细胞抗原B27核酸检测试剂盒的性能评价。

人类白细胞抗原基因分型检测试剂盒行业标准的修订与验证

目的对2010年发布的YY/T 1180-2010《人类白细胞抗原(HLA)基因分型试剂盒(SSP法)》进行修订并验证。方法按照拟定行业标准的要求,选择不同方法学的人类白细胞抗原(HLA)基因分型试剂盒进行验证。结果外观、参考品符合率、重复性、有效检测范围、检出限、稳定性等性能指标符合要求。结论人类白细胞抗原(HLA)基因分型试剂盒行业标准的修订及时科学合理,适用范围更加全面,有助于规范此类试剂盒的技术要求和检验方法,从而提高此类试剂盒的产品质量,并为其上市前后的监管提供依据。

抗A抗B血型定型试剂的质量分析

目的评价按照生物制品批签发管理的血筛诊断试剂之抗A抗B血型定型试剂品种的产品质量。方法按照《中国药典》要求,检查抗A抗B血型定型试剂成品的外观、特异性、亲和力、效价、冷凝集素和不规则抗体以及稳定性等性能指标。结果4家国产336批抗A抗B血型定型试剂成品的质量均满足《中国药典》要求。抗A试剂均为透明的蓝色液体,抗B试剂均为透明的黄色液体;抗A试剂与A_(1)、A_(2)B红细胞均产生凝集,与O及B型红细胞均不凝集,抗B试剂与B红细胞均产生凝集,与A1、O红细胞均不凝集;抗A试剂与A_(1)、A_(2)、A_(2)B红细胞出现凝集的时间均分别≤15 s、≤30 s、≤45 s,抗B试剂与B红细胞出现凝集的时间均≤15 s,且在3 min内凝集块均达到1 mm^(2)以上;抗A试剂与A1、A2、A2B型红细胞的凝集效价均不低于国家参考品的同步测定结果,抗B试剂与B型红细胞的凝集效价均不低于国家参考品的同步测定结果;抗A试剂与10例非血缘性O型红细胞和3例B型红细胞在4℃、18~25℃、37℃三个反应条件下均不出现凝集反应,也不发生溶血,抗B试剂与10例非血缘性O型红细胞和3例A型红细胞在4℃、18~25℃、37℃三个反应条件下均不出现凝集反应,也不发生溶血。结论对抗A抗B血型定型试剂进行每一批次全部项目的质量检测,是保障血筛诊断试剂批签发工作的重要技术支撑,有助于梳理此品种的质量风险,为监管提供科学依据。

肌营养不良蛋白基因检测的评价

目的使用国家参考品,对人肌营养不良蛋白基因检测试剂盒(荧光PCR-毛细管电泳法)进行评价。方法将国家参考品基因组DNA分别加入到DMD引物混合液1和DMD引物混合液2等两个PCR反应体系中,进行PCR扩增。取扩增产物1、扩增产物2和1% GeneScan 500 LIZ Size Standard,经过95℃变性,在3500Dx基因分析仪进行检测。结果对国家参考品中性染色体正常的DMD基因缺失或者重复的样本,试剂盒均能准确检出标示的相应外显子的缺失或者重复。对X0单体的国家参考品,试剂盒的结果与标示结果不一致。对国家参考品中DMD基因点突变、微缺失的样本以及未检出致病突变的样本,试剂盒均未检出试剂盒范围内的外显子的缺失或者重复。结论国家参考品可以用于评价荧光PCR-毛细管电泳法的人肌营养不良蛋白基因检测试剂盒的准确性和特异性,增加了国家参考品的检测方法适用性。

抗人球蛋白检测卡行业标准的研究

抗人球蛋白试验已成为临床上保障安全输血,诊断预防新生儿溶血病、自身免疫溶血性疾病、药物免疫溶血性疾病以及血型学研究工作中最重要的实验技术。抗人球蛋白检测试剂以凝胶柱或玻璃珠柱的柱凝集法为主流,是一个量大面广的产品。从监管角度,属于Ⅲ类高风险体外诊断试剂产品。随着检测技术发展和临床需要的增加,国内外已有多家生产企业开发的抗人球蛋白检测卡获得国家药监局批准,并且仍有不少企业正在申报该类产品的注册。但是该类试剂没有相应的国家标准或行业标准,对产品临床使用上的风险不易把控。因此急需制订针对抗人球蛋白检测卡的行业产品标准来规范统一此类产品的技术评价指标,并对此类试剂质量进行评估。

冲击荷载作用下早强EPS混凝土的力学性能

采用100 mm分离式霍普金森压杆(split Hopkinson pressure bar,简称SHPB)试验装置,对养护龄期分别为12 h、24 h和36 h的早强聚苯乙烯混凝土(EPS)进行冲击压缩试验,得到了相应的应力-应变曲线,并与养护龄期为28 d的聚苯乙烯混凝土的应力-应变曲线进行比较。结果表明:养护龄期为36 h、28 d的EPS混凝土随着应变率的增加,其冲击压缩强度也相应增加;养护龄期为12 h、24 h的EPS混凝土随着应变率的增加,其冲击压缩强度变化不明显。另外,还研究了试件动态抗压强度与平均应变率的关系和养护龄期对动态抗压强度的影响,证明了EPS混凝土的抗冲击性能随养护龄期的增长而增加。